Genetische Untersuchung der Populationsstruktur ... - Die Schmellers
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ANHANG<br />
NADP-LÖSUNG<br />
200 mg NADP in 100 ml Aqua bidest.<br />
ADP - GLUCOSELÖSUNG<br />
15 g D-Glucose<br />
250 mg ADP<br />
in 50 ml Aqua bidest.<br />
ATP - GLUCOSELÖSUNG<br />
15 g D-Glucose<br />
250 mg ATP<br />
in 50 ml Aqua bidest.<br />
MgCl 2<br />
20 mg/ml<br />
11.2.5 Färbechemikalien<br />
MTT{ XE "MTT" }-LÖSUNG<br />
10 g 3-(4,5-dimethylthiazolyl-2)2,5-diphenyl tetrazolium bromid<br />
in 1 l Aqua bidest.<br />
PMS{ XE "PMS" }-LÖSUNG<br />
2 g Phenazin Methosulfat in 1l Aqua bidest.<br />
GOT #1<br />
200 ml 0,1M Phosphatpuffer (pH 7,0)<br />
10 mg Pyridoxal-5-Phosphat<br />
460 mg L-Aspartic acid<br />
260 mg a-Ketoglutaric acid<br />
mit NaOH auf pH 7,4 einstellen<br />
GOT #2<br />
gesättigte Lösung von Fast Blue BB-salt<br />
ca. 100 mg in 100 ml Aqua bidest. lösen<br />
TPI-SUBSTRAT<br />
20 ml 0,02M Tris-Hcl, pH 8,0<br />
650 mg DL-α-Glycerophosphat<br />
220 mg Pyruvat<br />
20 mg NAD<br />
20 µl Glycerophosphat Dehydrogenase<br />
20 µl Lactat Dehydrogenase<br />
für 2 Stunden bei 37°C inkubieren, dann die Reaktion durch Zugabe von HCl konz. bis<br />
pH 2,0 stoppen; anschließend den pH-Wert mit verschieden konzentrierten NaOH-<br />
Lösungen zügig auf pH-Wert 8,0 einstellen.<br />
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