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Genetische Untersuchung der Populationsstruktur ... - Die Schmellers

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ANHANG<br />

NADP-LÖSUNG<br />

200 mg NADP in 100 ml Aqua bidest.<br />

ADP - GLUCOSELÖSUNG<br />

15 g D-Glucose<br />

250 mg ADP<br />

in 50 ml Aqua bidest.<br />

ATP - GLUCOSELÖSUNG<br />

15 g D-Glucose<br />

250 mg ATP<br />

in 50 ml Aqua bidest.<br />

MgCl 2<br />

20 mg/ml<br />

11.2.5 Färbechemikalien<br />

MTT{ XE "MTT" }-LÖSUNG<br />

10 g 3-(4,5-dimethylthiazolyl-2)2,5-diphenyl tetrazolium bromid<br />

in 1 l Aqua bidest.<br />

PMS{ XE "PMS" }-LÖSUNG<br />

2 g Phenazin Methosulfat in 1l Aqua bidest.<br />

GOT #1<br />

200 ml 0,1M Phosphatpuffer (pH 7,0)<br />

10 mg Pyridoxal-5-Phosphat<br />

460 mg L-Aspartic acid<br />

260 mg a-Ketoglutaric acid<br />

mit NaOH auf pH 7,4 einstellen<br />

GOT #2<br />

gesättigte Lösung von Fast Blue BB-salt<br />

ca. 100 mg in 100 ml Aqua bidest. lösen<br />

TPI-SUBSTRAT<br />

20 ml 0,02M Tris-Hcl, pH 8,0<br />

650 mg DL-α-Glycerophosphat<br />

220 mg Pyruvat<br />

20 mg NAD<br />

20 µl Glycerophosphat Dehydrogenase<br />

20 µl Lactat Dehydrogenase<br />

für 2 Stunden bei 37°C inkubieren, dann die Reaktion durch Zugabe von HCl konz. bis<br />

pH 2,0 stoppen; anschließend den pH-Wert mit verschieden konzentrierten NaOH-<br />

Lösungen zügig auf pH-Wert 8,0 einstellen.<br />

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