Arabidopsis thaliana - OPUS - Universität Würzburg

Für das lipolytische Enzym DAD1 (At2g44810) wurde bereits gezeigt, dass dieser
Lipase eine Rolle in der Aufrechterhaltung der JA-Spiegel in verwundeten Blättern in
der späten Phase der Wundantwort zukommt (Hyun et al. 2008). Ferner konnte
durch die Analyse der Jasmonsäuregehalte der Mutanten dgl-i-, pla-Iα1 7-1 und pla-
Iα1 8-1 in der vorliegenden Arbeit eine Beteiligung von DONGLE (PLA1-Iα1,
At1g05800) als initiales lipolytisches Enzym der JA-Biosynthese ausgeschlossen
werden. Die Auswertung der JA-Analyse aller verwendeten Einzelmutanten zeigte,
dass keine der getesteten Lipasen eine vollständige JA-Defizienz aufwiesen.
Deshalb wurden die PLA1-I-Lipasenmutanten, welche niedrigere JA-Spiegel unter
basalen Bedingungen (pla-Iγ2 und pla-Iγ3) oder 30 min nach Verwundung (pla-Iβ2
und pla-Iγ1) im Vergleich zu Col-0 aufwiesen, über den zeitlichen Verlauf der frühen
Wundantwort (0 min bis 60 min) bzgl. der Gehalte an freier dnOPDA, OPDA und JA
erneut untersucht. Zusätzlich wurde eine Vierfachmutante, welche durch
Mehrfachkreuzung der Mutanten pla-Iγ1, pla-Iγ2, pla-Iγ3 und pla-Iβ2 von Frau Dr.
Dipl. Biol. Dorothea Ellinger am Lehrstuhl für Pflanzenphysiologie der Ruhr-
Universität Bochum generiert wurde, ebenfalls über den zeitlichen Verlauf der frühen
Wundantwort analysiert, um eine mögliche redundante Funktion der PLA1-I-Lipasen
aufzuklären.
In Abb.III.20 ist der zeitliche Verlauf an freier dnOPDA, OPDA sowie JA sowohl in
den Einzelmutanten pla-Iγ1, pla-Iγ2, pla-Iγ3 und pla-Iβ2 als auch in der
Vierfachmutante c1x11 in der frühen Wundantwort zwischen 0 min und 60 min nach
Blattverwundung dargestellt. Als Kontroll-Pflanzen dienten A. thaliana Ökotyp Col-0
sowie Nossen (Nos), da die Lipasemutante pla-Iγ1 als genetischen Hintergrund den
Ökotyp Nos besitzt. Zur vergleichenden Analyse von c1x11 jedoch wurden als
Referenz Col-0 Pflanzen gewählt, da diese Mutante durch mehrfache Kreuzung der
Einzelmutanten entstanden ist und dem zur Folge der dominierende genetische
Hintergrund von c1x11 der Ökotyp Col-0 ist. Die Untersuchungen der Gehalte an
freier dnOPDA in den Blättern von pla-Iγ2, pla-Iγ3 , pla-Iβ2 (Abb.III.20.A), pla-
Iγ1(Abb.III.20.D) sowie von c1x11(Abb.III.20.G) zeigten, dass alle Mutanten außer
pla-Iγ1 unter basalen Bedingungen niedrigere dnOPDA-Konzentrationen im
Vergleich zum Wildtyp aufwiesen. So enthielten die Blätter von pla-Iγ2 und pla-Iβ2
mit 0,3 µg/g TG basal nur 50% des Wildtypgehaltes an freier dnOPDA, pla-Iγ3 wies
sogar nur 16,7% des Wildtypgehaltes auf. In den Blättern der Vierfachmutante c1x11
konnte mit 0,2 µg/g TG nur 33% der wildtypischen dnOPDA-Konzentration detektiert
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