Arabidopsis thaliana - OPUS - Universität Würzburg
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Tabelle III.2: Ergebnis der molekularbiologische Analyse auf Reinerbigkeit.<br />
Aufgelistet sind die Genloci der Lipase codierenden Gene, welche als homozygote T-DNA-<br />
Insertionsmutanten in der vorliegenden Arbeit selektiert werden konnten und zur vergleichenden<br />
Analyse der Oxylipine OPDA sowie JA verwendet wurden.<br />
Genlocus Benennung nach Ryu 2004<br />
At1g13610<br />
At1g18360<br />
At1g33270<br />
At1g51440 AtPLA1-Iγ3<br />
At1g54570<br />
At1g73480<br />
At2g30550 AtPLA1-Iγ2<br />
At3g14075<br />
At3g26820<br />
At3g61680<br />
At5g11650<br />
At5g14890<br />
At5g43860<br />
3.3.2 Lipidomische Analyse nach Verwundung<br />
Wie bereits in 3.3.1 erwähnt, konnten nur 18 der 21 durch In-Silico-Analyse<br />
identifizierten putativen chloroplastidären Lipasen zur Bestimmung der OPDA- sowie<br />
JA-Gehalte in Blättern unter basalen Bedingungen und nach Verwundung untersucht<br />
werden. Alle 18 Lipasemutanten zeigten keine morphologischen Auffälligkeiten. Auch<br />
die Blütenbildung und Samengenerierung wies bei 17 Mutanten keinen Unterschied<br />
zu Wildtyp-Pflanzen auf. Lediglich die Mutante des lipolytische Enzym AtPLA1-Iβ1<br />
(At2g44810), welches bereits als DAD1 publiziert wurde, zeigte den beschriebenen<br />
männlichen-sterilen Phänotyp.<br />
Die prozentualen Gehalte an freier OPDA und JA in den verschiedenen<br />
Lipasemutanten und der Vierfachmutante c1x11 (pla-Iβ2/pla-Iγ1/pla-Iγ2/pla-Iγ3, zur<br />
Verfügung gestellt von Frau Dr. Dipl. Biol. Dorothea Ellinger) im Vergleich zum<br />
Wildtyp Col-0 sind in Abb.III.18 bzw. Abb.III.19 dargestellt. Die basalen<br />
Konzentrationen von OPDA in Blättern von sechs Wochen alten Col-0 Pflanzen lag<br />
bei 5,9 µg/g TG (100%). Eine halbe Stunde nach Verwundung konnte ein<br />
durchschnittlicher Anstieg der OPDA-Konzentration auf einen Wert von 28,5 µg/g TG<br />
(100%) in den verwundeten Blättern detektiert werden. Wie in Abb.III.18.A zu<br />
erkennen ist, variierten die Gehalte der freien OPDA unter basalen Bedingungen von<br />
6% des Wildtypgehaltes (At3g14075) bis 117,2% des Wildtypgehaltes (At1g33270) in<br />
den getesteten Lipasemutanten stark. Jedoch konnte ein signifikanter Unterschied<br />
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