Arabidopsis thaliana - OPUS - Universität Würzburg

dnOPDA beteiligt sein. Da JA ebenfalls aus dnOPDA gebildet werden kann, sollte die
JA-Synthese in DGL-knock-out-Mutanten nicht völlig ausgeschaltet sein. Zur
Abklärung dieser Hypothese wurde neben der Überexpressionsmutante dgl-D auch
die RNAi-Mutante dgl-i bei den Autoren angefordert und untersucht.
Die Analyse der Gehalte an freien Oxylipinen in den Blättern von dgl-i Pflanzen bis zu
einer Stunde nach Verwundung ist in Abb.III.10 dargestellt. Die von Hyun et al.
(2008) publizierte JA-Defizienz in unverwundeten Blättern der dgl-i Mutante und
drastisch erniedrigten JA-Konzentrationen in der frühen Verwundungsphase bis zu
einer Stunde nach Behandlung (Abb.III.8) konnte in dieser Arbeit nicht reproduziert
werden. Die basalen JA-Konzentrationen (Abb.III.10) lagen in den Wildtyp-Pflanzen
bei 0,22 ± 0,02 µg/g TG und bei den dgl-i Pflanzen bei 0,14 ± 0,02 µg/g TG. Dies
bedeutet, dass DGL-RNAi-Mutanten basal circa 65% des Wildtyp-Gehaltes an freier
JA in den Blättern aufwiesen. Diese Differenz ist auch bei JA-Konzentrationen in
gleichaltrigen Wildtyp-Individuen keine Seltenheit und somit nicht signifikant. Eine
halbe Stunde nach Verwundung zeigte die Analyse, dass in beiden getesteten
Pflanzenlinien (WT und dgl-i) nahezu identische Gehalte an freier JA zu finden
waren. Blätter der Mutante dgl-i wiesen 91% des Wildtyp-Spiegels an freier JA auf.
Auch zu den Zeitpunkten 30 min sowie 60 min nach Verwundung konnte in der
vorliegenden Arbeit nicht die von Hyun et al. (2008) publizierte über 80%ige
Reduktion an freier JA in den Blättern von dgl-i im Vergleich zum Wildtyp gezeigt
werden. Auch die Gehalte an freier OPDA (Abb.III.10.B) sowie dnOPDA
(Abb.III.10.A), welches beide Vorstufen von JA sind, wiesen in der dgl-i-Linie und
Col-0 vergleichbare Gehalte auf. Zehn bzw. dreißig Minuten nach Verwundung lagen
die Konzentrationen von OPDA und dnOPDA sogar über jenen der Wildtyp-Pflanzen.
Die in der vorliegenden Arbeit detektierten Konzentrationen an freier OPDA, dnOPDA
und JA in Blättern der Mutante dgl-i stehen im klaren Widerspruch zu den
publizierten Daten. Durch eine Kooperation mit der Arbeitsgruppe Weiler/Kubigsteltig
des Lehrstuhls für Pflanzenphysiologie der Ruhr-Universität Bochum war es in der
vorliegenden Arbeit möglich, zwei weitere unabhängige DGL-RNA-i-Linien (pla-Iα1 7-
1 und pla-Iα1 8-1) auf ihre Gehalte an freien Oxylipinen zu untersuchen. Diese RNAi-
Linien wurden im Rahmen der Dissertation von Frau Dr. Dipl. Biol. Dorothea Ellinger
angefertigt und für meine Analysen zur Verfügung gestellt.
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