Arabidopsis thaliana - OPUS - Universität Würzburg

9.2 MS-Methoden
Zur massenspektrometrischen Analyse aller Proben wurde ein Quattro Premier Triple
Quadrupol Massenspektrometer von Waters verwendet, welches an die Aquity
UPLC gekoppelt war. Die Ionisierung der Analyten erfolgte durch negative
Elektrospray-Ionisation (ESI - ). Zur Detektion wurde der Multiple Reaction Monitoring
(MRM)-Modus verwendet. Mittels dieses MRM-Modus kommt es zur Isolierung eines
Molekülions anhand seines Masse/Ladungs-Verhältnis (m/z) im ersten Quadrupol
des Tandem-MS. Anschließend werden im zweiten Quadrupol (Kollisionszelle) durch
die Kollision mit Argon Fragmentionen generiert (Collision induced disociation, CID),
welche im dritten Quadrupol spezifisch selektiert werden. Im Folgenden sind die
Geräteparameter sowie die spezifischen Massenübergänge der einzelnen Analyten
tabellarisch aufgeführt.
Die Auflösung des Massenspektrometers war regulär auf 0,6-0,7 Dalton bei
halbmaximaler Peakbreite eingestellt. Als Desolvatisierungs- und Konusgas wurde
Stickstoff verwendet.
9.2.1 Freie Lipide
Tabelle II.11: Geräteinstellungen zur Bestimmung freier Lipide
Kapillarspannung [kV] 3
Konusspannung [V] 20
Extraktor [V] 5
Quellentemperatur [°C] 120
Desolvatisierungstemperatur [°C] 400
Konusgasfluss [l/h] 50
Desolvatisierungsgasfluss [l/h] 800
Kollisionsgasfluss [ml/min] 0,27
Tabelle II.12: Spezifische Massenübergänge (m/z) freier Lipide im negativen Elektrospray-
Ionisations-Modus (ESI - ) mit verwendeten Kollisonsenergien.
Bezeichnung
m/z
Molekülion
m/z
Fragmentlion
Kollisionsenergie
[V]
JA 209 59 17
[ 18 O]2-JA 213 63 17
OPDA 291 165 26
[ 18 O]2-OPDA 295 165 26
dnOPDA 263 165 16
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