Arabidopsis thaliana - OPUS - Universität Würzburg

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At5g11650 Col-0 T-DNA-Insertion SAIL_716_F08 NASC, Nottingham At5g14890 Col-0 T-DNA-Insertion SALK_079693 NASC, Nottingham At5g23530 Col-0 T-DNA-Insertion SAIL_4_H02 NASC, Nottingham At5g43860 Col-0 T-DNA-Insertion SAIL_646_E09 NASC, Nottingham Vierfachmutante: c1x11 Lehrstuhl für At1g06800 NOS T-DNA-Insertion RATM_12_1251_1 Pflanzenphysiologie At1g51440 Col-0 T-DNA-Insertion SALK_004710 der Ruhr-Universität At2g30550 Col-0 T-DNA-Insertion SALK_001305 Bochum At4g16820 Col-0 T-DNA-Insertion SM_3_20786 Tabelle II.3: Verwendete Oligonukleotide zum T-DNA-Insertionsnachweis und entsprechende Annealingtemperaturen. Bezeichnung Sequenz (5`→3`) Annealingtemperatur °C SAIL_897_D11 CTCAATGTCAATCTCATGGGG 50,2-62 TCACCACATCGTCATCTGTTC SALK-072002c CTCTTGGTCGTGAATAGCGAG 56,2 GATGTTTGAGCTCAATTTCGC SALK_023029 ACACCCTAACGGTAACGTTCC 49,8-65 TTCAAGGGACTCGATGAACTC SALK_139011C TTTAGCAGGATCTTCTGCTGG 52,2-56,1 TCAAGTGCCCAATTCAATAGC SALK_076354c GCGACTAGTGAATTAACTGCG 54,3 TTTCCCATTCACTTCATTTGC SALK-095195c ATATGGGGTTACCAAAATCCG 49,8-58,3 ATTCGATTCGCGTAATTTGTG SALK_003105 GGTTTAAGAAACGGCGAGTTC 44,9-65,1 GCTGGAGAACTATGGATGACG SALK_014323 CTACTCTACCCTCCTCCACCG 57,1-66,6 GACTTGGGAATTAGCCGACTC SALK_139280 ATGCATTGTTCGACCTCAGAC 50-65 TACTGAATGGAATATTCCGCG SALK_147687c TTATTACCGGAGCGACAACAC 54,3 40

TCCAATAACGGTTAAGCAACG SAIL_716_F08 CCAATGCTTACAAATTCCCAG 52,2-57,4 AAAATCCCCCTGAAGACACAC SALK_079693 CTTTGGTACCACCATGAATGG 52,2-59,9 TTGTCACACAAGAAGCATTGC SAIL_4_H02 ACGCAAACACAAACAAAAAGG 49,8-65 GAACGCTGATCTCTCGAGATG SAIL_646_E09 GAGGGTGGAGAGAATTTGAGG 55,9-65,6 GTCGCCTTAAAGAAATTTGGG SALK (LBb1) GCGTGGACCGCTTGCTGCAACT 60-62 SALK (LBa1) TGGTTCACGTAGTGGGCCATCG 60-62 SAIL (LB1) GCCTTTTCAGAAATGGATAAATAGCCTTGCTTCC 60-62 SAIL (LB2) GCTTCCTATTATATCTTCCCAAATTACCAATACA 60-62 3.1 Pflanzenanzucht Die Pflanzenanzucht erfolgte bei 22°C Tages- und 16°C Nacht-Temperatur in Klimaschränken der Firma Percival. Die Beleuchtungszeit betrug neun Stunden bei einer Belichtungsstärke von 120 µE. 3.1.1 Pflanzenanzucht auf Erde Für Verwundungs-, P.syringae-Infektions- sowie Sorbitol-Flotierungsexperimente wurden Pflanzen verwendet, welche auf Standard-Anzuchterde ausgesät und pikiert waren. Während des Wachstums wurden die Pflanzen regelmäßig im Abstand von 14 Tagen mit Nematoden der Spezies Steinernema feltiae zur biologischen Schädlingsbekämpfung behandelt. 3.1.2 Pflanzenanzucht in und auf MS-Medium Markierungsexperimente und Silbernitrat (AgNO3 - )-Experimente wurden ausschließlich an Pflanzen durchgeführt, die in MS-Medium steril kultiviert wurden. Zur Oberflächensterilisation der Samen wurden diese für zwei Minuten mit 700 μl Ethanol (70%) inkubiert. Nach Entfernung des Alkohols wurden die Samen für zehn Minuten in einer 1.5%igen (v/v) Natriumhypochlorit-Lösung, die mit 0.1% Tween 20 versetzt war, inkubiert. Um restliches Natriumhypochlorit zu entfernen, wurden die 41

At5g11650 Col-0 T-DNA-Insertion SAIL_716_F08 NASC, Nottingham<br />

At5g14890 Col-0 T-DNA-Insertion SALK_079693 NASC, Nottingham<br />

At5g23530 Col-0 T-DNA-Insertion SAIL_4_H02 NASC, Nottingham<br />

At5g43860 Col-0 T-DNA-Insertion SAIL_646_E09 NASC, Nottingham<br />

Vierfachmutante: c1x11 Lehrstuhl für<br />

At1g06800 NOS T-DNA-Insertion RATM_12_1251_1 Pflanzenphysiologie<br />

At1g51440 Col-0 T-DNA-Insertion SALK_004710 der Ruhr-<strong>Universität</strong><br />

At2g30550 Col-0 T-DNA-Insertion SALK_001305 Bochum<br />

At4g16820 Col-0 T-DNA-Insertion SM_3_20786<br />

Tabelle II.3: Verwendete Oligonukleotide zum T-DNA-Insertionsnachweis und<br />

entsprechende Annealingtemperaturen.<br />

Bezeichnung Sequenz (5`→3`) Annealingtemperatur °C<br />

SAIL_897_D11 CTCAATGTCAATCTCATGGGG 50,2-62<br />

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GCTGGAGAACTATGGATGACG<br />

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SALK_139280 ATGCATTGTTCGACCTCAGAC 50-65<br />

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