Arabidopsis thaliana - OPUS - Universität Würzburg

sich diese essentielle Beteiligung bei der Regulation der JA-Produktion lediglich auf
die Blüten von A. thaliana. DAD1-defiziente Mutanten wiesen nur noch 22% der JA-
Konzentration in Blüten im Vergleich zum Wildtyp auf und waren durch männliche
Sterilität charakterisiert.
1. Analyse von Monogalaktosyldiacylglycerolen, Digalaktosyldiacylglycerolen
und Phosphatidylcholinen in Rosettenblättern von A. thaliana
Sowohl im alternativen Syntheseweg als auch im klassischen Vick-Zimmerman-
Pathway ist der initiale Schritt der Biosynthese von JA die Freisetzung von oxidierten
bzw. nicht oxidierten Fettsäuren aus der Chloroplastenmembran mittels einer Lipase.
In der vorliegenden Arbeit wurde deshalb eine rasche Aufarbeitungs- und
Analysemethode zur Bestimmung von komplexen chloroplastidären Lipiden
entwickelt, um sowohl die Substratspezifität der gesuchten Lipase in vivo als auch
die Arabidopsid-Synthese zu klären. Mit der in II.8.2 beschriebenen
Extraktionsmethode war es möglich, innerhalb von weniger als zwei Stunden die
Lipidkompositionen der Chloroplasten-spezifischen Galaktolipide (MGDG und
DGDG) sowie der Phosphatidylcholine (PC), welche die abundandesten
Phospholipide im Chloroplasten darstellen, mittels LC-MS/MS (II.9.1.2 und II.9.2.2)
zu bestimmen.
Der Vergleich der in Abb.III.1, Abb.III.2 und Abb.III.3 gezeigten Lipidzusammen-
setzungen der komplexen Lipidgruppen MGDG, DGDG und PC mit der in der
Literatur (Devaiah et al. 2006, Welti et al. 2002) beschriebenen Lipidkompositionen in
Blättern von A. thaliana Ökotyp Col-0 wies eine gute Übereinstimmung auf. In der
vorliegenden Arbeit konnten mit dem entwickelten Extraktionsverfahren für komplexe
Lipide alle Lipidspezies der MGDG, DGDG und PC bestimmt werden, welche in der
führenden Publikation von Devaiah et al. 2006 analysiert wurden. Ein direkter
Vergleich der in dieser Arbeit analysierten absoluten Gehalte der Membranlipide
MGDG, DGDG und PC mit denen von Devaiah et al. 2006 publizierten Daten war
nicht möglich, da die Autoren alle Angaben in mol%, bezogen auf alle von ihnen
gemessenen Glycerolipide, darstellten. Der Vergleich mit der von Welti et al. (2002)
beschriebenen quantitativen Analyse der einzelnen Lipdspezies zeigte, dass mit dem
in II.8.2 aufgeführten Extraktionsverfahren lediglich 25% der Konzentrationen der
einzelnen Lipidspezies detektiert werden konnte. Ein Grund hierfür könnten
unterschiedliche Aufzuchtsbedingungen der in Welti et al. (2002) verwendeten
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