Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...

3. Ergebnisse
Um ausschließen zu können, dass die durch die spezifische Inhibierung der ERM-Proteine
hervorgerufene Reduzierung der Protrusionanzahl nur eine Zelltyp-spezifisches Phänomen darstellt,
wurden die GFP-Fusionsproteine in PtK2-Zellen (Nierenepithelzellen aus der Kängururatte Potorous
tridactyli) transfiziert. Die Fusion der beiden CD44-Domänen an das GFP ermöglichte nach der
transienten Transfektion eine einfache und schnelle Selektion der positiv transfizierten Zellen. Nach
der Infektion der Zellen mit Listeria monocytogenes erfolgte die mikroskopische Analyse der fixierten
und fluoreszenzmarkierten Zellen.
Die in dieser Arbeit vorgestellten Ergebnisse beruhen auf Untersuchungen von PtK2-Zellen die mit in
den pEGFP-C2 Vektor klonierten CD44-Domänen durchgeführt wurden. Entsprechende Ergebnisse
wurden auch mit den in pEGFP-N1 klonierten CD44tail bzw. CD44tail mut erzielt (nicht gezeigt).
Protrusion-Anzahl
12
10
8
6
4
2
0
Ptk2 Ptk2+CD44tail Ptk2+CD44tail mut
Abb. 21: Vergleich der Protrusionanzahl zwischen transfizierten und nichttransfizierten
PtK2-Zellen
Es zeigte sich bereits in den vorher untersuchten RT4-D6P2T-Zelllinien, dass es durch die Expression
des CD44tail zu einer drastischen Abnahme der ausgebildeten Protrusions kommt. Bei einem Zelltypbzw.
Organismus-unspezifischen Mechanismus der ERM-regulierten Protrusion-Ausbildung sollte es
auch in den PtK2-Zellen zu einer deutlichen Reduktion der Protrusionanzahl kommen.
Die Auszählung der Anzahl der durchschnittlich ausgebildeten Protrusions ergab, dass durch die
Expression des CD44tail die Protrusion-Ausbildung deutlich reduziert wurde (Abb. 21). In den
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