Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...

3. Ergebnisse
Im Gegensatz zu den Ezrin-Domänen in Versuch 3.1 führte die Expression der C- und N-terminalen
Merlin-Domänen nicht zu einem einheitlichen Ergebnis (Abb.19). Die Expression der
aminoterminalen Domäne des Merlins führte im Vergleich zu den Kontrollzellen (6,45 +/-1,44) zu
einer Reduktion der Protrusionzahl um 51% (3,12 +/-1,39). Die Expression der carboxyterminalen
Domäne erbrachte jedoch gegenüber den Kontrollzellen keine signifikante Reduzierung der
Protrusionzahl (6,56 +/-1,36).
72
Protrusionzahl
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
RT4 (Kontrolle) RT4+N-Merlin (+Dox) RT4+C-Merlin (+Dox)
Abb. 19: Vergleich der Protrusionzahl zwischen N- bzw. C-Merlin exprimierenden RT4-D6P2T-
Zellen
3.8 Klonierung von GFP-markierten CD44tail- und CD44tail mut-Fusionsproteinen
In den bereits gezeigten Versuchen konnte durch eine Kompetition der Funktion der ERM-Proteine
eine Reduzierung in der Anzahl der Listerien-induzierten Protrusions festgestellt werden (s. 3.4ff).
Die Versuche zur Kompetition der ERM-Proteine durch die Expression des CD44tails wurden jedoch
in der sehr spezialisierten Schwannoma-Zelllinie RT4-D6P2T durchgeführt. Es stellte sich daher die
Frage, ob der Einfluss der ERM-„Inhibierung“ auf die Protrusion-Ausbildung auch auf andere
Zellinien übertragbar ist. Dementsprechend wurde die zytoplasmatische CD44-Domäne (AS 290-362
des wtCD44; CD44tail) und dessen mutiertes Äquivalent (CD44tail mut) in die MCS der GFP-
Vektoren pEGFP-C2 und pEGFP-N1 ligiert (Abb. 20). Diese GFP-CD44-Fusionsproteine