Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...

Protrusion-Anzahl
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
GST Merlin (+1.1ASML) Merlin (+5G8)
Abb. 16: Anzahl der ausgebildeten Protrusions nach Induktion durch Doxycyclin und
Antikörper-induzierter Merlin-Aktivierung
3. Ergebnisse
Die Kontrollzellen (RT4-D6P2T+GST) bildeten durchschnittlich 6,18 +/-1,25 Protrusions aus
(Abb. 16), dies war mit der Protrusionzahl in den 5G8 behandelten RT4-D6P2T+Merlin-Zellen (6,4
+/-1,3) vergleichbar. Die Zugabe des 5G8-Antikörpers hatte durch die fehlende Merlin-Aktivierung
keinen Einfluss auf die Anzahl der ausgebildeten Protrusions. Im Gegensatz dazu zeigte sich bei den
1.1 ASML-behandelten Zellen eine Reduktion der Protrusions um 51% (3,02 +/-1,2). Die
Delokalisation der ERM-Proteine durch die Aktivierung des exprimierten Merlins führte wie in den
vorherigen Versuchen zu einer signifikanten Reduktion der Protrusionzahl.
3.6 Einfluss der Expressionsstärke des Merlins auf die Protrusionzahl
Wie unter 3.2 beschrieben wurde für die Inhibierung der ERM-Proteine und der anschließenden
Auswertung der Protrusionanzahl u.a. der RT4-D6P2T+Merlin-Klon 54 verwendet. Dieser Klon führt
nach der Induktion durch Doxycyclin zu einer 28fachen Überexpression des Merlin gegenüber der
Menge endogen exprimierten Proteins (Morrison et al. 2001). Aus diesem Grund musste
ausgeschlossen werden, dass die ermittelte Reduktion der Protrusionanzahl um über 60% nicht durch
die starke Überexpression des Merlins und daraus resultierender unspezifischer Effekte, sondern durch
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