Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...

Protrusion-Anzahl
14
12
10
8
6
4
2
0
Abb. 14: Anzahl der ausgebildeten Protrusion in den verwendeten RT4-D6P2T-Zelllinien
3. Ergebnisse
GST Merlin (+HA) Merlin (-HA) CD44tail CD44tail mut
Wie unter 3.2 beschrieben, wurden auch in den verwendeten RT4-D6P2T-Zellen die Längen der
ausgebildeten Protrusions untersucht. Innerhalb der verwendeten RT4-D6P2T-Zellpopulationen
konnten keine signifikanten Unterschiede zwischen den gemessenen Protrusionlängen ermittelt
werden und waren mit den unter 3.2 dargestellten Ergebnissen vergleichbar.
3.5 Antikörper-Aktivierung des Merlin und Auswirkungen auf die Protrusionzahl
Das durch Doxycyclin überexprimierte Merlin wurde in den vorher beschriebenen Experimenten
durch die Zugabe von Hyaluronsäure aktiviert, was zu einer signifikanten Reduktion in der Anzahl der
ausgebildeten Protrusions führte. Alternativ zu der Hyaluronsäure-Aktivierung bestand die
Möglichkeit, Merlin mittels eines CD44-spezifischen Antikörpers (1.1 ASML) zu aktivieren. Ebenso
wie Hyaluronsäure, ein extrazellulärer Ligand des CD44-Rezeptors, bindet der 1.1 ASML Antikörper
an die extrazelluläre Domäne des CD44, vermittelt eine schnelle Dephosphorylierung des Merlins und
damit dessen Aktivierung. Da auch die Antikörper-induzierte Aktivierung des Merlins zu einer
Delokalisation der ERM-Proteine vom CD44 führen sollte, wurde überprüft, ob dieser
Aktivierungsmechanismus ebenfalls Auswirkungen auf die Anzahl der Protrusions hat.
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