Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...
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Inhaltsverzeichnis<br />
3. Ergebnisse<br />
3.1 Transfektion <strong>der</strong> N- <strong>und</strong> C-terminalen Domäne des Ezrin in PtK2-<strong>Zell</strong>en <strong>und</strong><br />
57<br />
Auswirkungen <strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>-Anzahl 57<br />
3.2 Vergleich <strong>der</strong> <strong>Protrusion</strong>längen in nicht-transfizierten <strong>und</strong> transfizierten PtK2-<strong>Zell</strong>en 59<br />
3.3 Lokalisation von Merlin <strong>und</strong> Ezrin in RT4-D6P2T-<strong>Zell</strong>en 61<br />
3.4 Auswirkungen <strong>der</strong> induzierten Merlin-<strong>und</strong> CD44tail-Expression <strong>auf</strong> <strong>die</strong><br />
<strong>Protrusion</strong>zahl 66<br />
3.5 Antikörper-Aktivierung des Merlin <strong>und</strong> Auswirkungen <strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>zahl 67<br />
3.6 <strong>Einfluss</strong> <strong>der</strong> Expressionsstärke des Merlins <strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>zahl 69<br />
3.7 Auswirkungen <strong>der</strong> Expression <strong>der</strong> N- bzw. C-terminalen Merlin-Domäne in RT4-<br />
P6P2T-<strong>Zell</strong>en <strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>-<strong>Ausbildung</strong> 71<br />
3.8 Klonierung von GFP-markierten CD44tail- <strong>und</strong> CD44tail mut-Fusionsproteinen 72<br />
3.9 Auswirkungen <strong>der</strong> CD44tail- <strong>und</strong> CD44tail mut-Expression <strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>-<br />
Anzahl in PtK2-<strong>Zell</strong>en 74<br />
3.10 Analyse von GFP-CD44/CD44mut-transfizierten <strong>und</strong> FACS-sortierten PtK2-<strong>Zell</strong>en 76<br />
3.11 Inhibierung <strong>der</strong> <strong>ERM</strong>-<strong>Proteine</strong> durch RNA-Interferenz (RNAi) <strong>und</strong> Auswirkungen<br />
<strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>-<strong>Ausbildung</strong> 79<br />
3.12 Analyse <strong>der</strong> <strong>Protrusion</strong>-<strong>Ausbildung</strong> in CD44-defizienten RPM-MC-<strong>Zell</strong>en 85<br />
3.13 Auswirkungen <strong>der</strong> Expression von Ezrin-Phosphomutanten 87<br />
3.14 <strong>Einfluss</strong> <strong>der</strong> <strong>ERM</strong>-<strong>Proteine</strong> <strong>auf</strong> <strong>die</strong> Dynamik <strong>der</strong> <strong>Protrusion</strong>-<strong>Ausbildung</strong><br />
3.15 Auswirkungen <strong>der</strong> <strong>ERM</strong>-Inhibierung <strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Zell</strong>-<strong>Zell</strong>-Ausbreitung von Listeria<br />
92<br />
monocytogenes 94<br />
4. Diskussion 98<br />
4.1 Die Expression <strong>der</strong> amino- bzw. carboxyterminalen Ezrin-Domäne sowie <strong>der</strong><br />
aminoterminalen Domäne des Merlin führen zu einer reduzierten <strong>Protrusion</strong>-<br />
<strong>Ausbildung</strong> 98<br />
4.2 Die induzierbare <strong>Zell</strong>linie RT4-D6P2T <strong>die</strong>nt als System zur funktionellen<br />
Inhibierung <strong>der</strong> <strong>ERM</strong>-<strong>Proteine</strong> 100<br />
4.3 Die Interaktion zwischen den <strong>ERM</strong>-<strong>Proteine</strong>n <strong>und</strong> dem CD44-Rezeptor hat einen<br />
entscheidenden <strong>Einfluss</strong> <strong>auf</strong> <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>-<strong>Ausbildung</strong> 101<br />
4.4 Die Blockierung <strong>der</strong> Interaktion zwischen <strong>ERM</strong>-<strong>Proteine</strong> <strong>und</strong> <strong>der</strong> <strong>Zell</strong>membran bzw.<br />
dem Aktinzytoskelett verhin<strong>der</strong>t nicht vollständig <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>-<strong>Ausbildung</strong> 103<br />
4.5 Die <strong>ERM</strong>-Inhibierung hat we<strong>der</strong> einen <strong>Einfluss</strong> <strong>auf</strong> <strong>die</strong> Dynamik <strong>der</strong> <strong>Protrusion</strong>-<br />
<strong>Ausbildung</strong> noch <strong>auf</strong> <strong>die</strong> Länge <strong>der</strong> ausgebildeten <strong>Protrusion</strong>s 105<br />
4.6 Die Phosphorylierung des konservierten Thr 567 im Ezrin erhöht <strong>die</strong> <strong>Protrusion</strong>-<br />
<strong>Ausbildung</strong> 106<br />
III