Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...

Inhaltsverzeichnis
3. Ergebnisse
3.1 Transfektion der N- und C-terminalen Domäne des Ezrin in PtK2-Zellen und
57
Auswirkungen auf die Protrusion-Anzahl 57
3.2 Vergleich der Protrusionlängen in nicht-transfizierten und transfizierten PtK2-Zellen 59
3.3 Lokalisation von Merlin und Ezrin in RT4-D6P2T-Zellen 61
3.4 Auswirkungen der induzierten Merlin-und CD44tail-Expression auf die
Protrusionzahl 66
3.5 Antikörper-Aktivierung des Merlin und Auswirkungen auf die Protrusionzahl 67
3.6 Einfluss der Expressionsstärke des Merlins auf die Protrusionzahl 69
3.7 Auswirkungen der Expression der N- bzw. C-terminalen Merlin-Domäne in RT4-
P6P2T-Zellen auf die Protrusion-Ausbildung 71
3.8 Klonierung von GFP-markierten CD44tail- und CD44tail mut-Fusionsproteinen 72
3.9 Auswirkungen der CD44tail- und CD44tail mut-Expression auf die Protrusion-
Anzahl in PtK2-Zellen 74
3.10 Analyse von GFP-CD44/CD44mut-transfizierten und FACS-sortierten PtK2-Zellen 76
3.11 Inhibierung der ERM-Proteine durch RNA-Interferenz (RNAi) und Auswirkungen
auf die Protrusion-Ausbildung 79
3.12 Analyse der Protrusion-Ausbildung in CD44-defizienten RPM-MC-Zellen 85
3.13 Auswirkungen der Expression von Ezrin-Phosphomutanten 87
3.14 Einfluss der ERM-Proteine auf die Dynamik der Protrusion-Ausbildung
3.15 Auswirkungen der ERM-Inhibierung auf die Zell-Zell-Ausbreitung von Listeria
92
monocytogenes 94
4. Diskussion 98
4.1 Die Expression der amino- bzw. carboxyterminalen Ezrin-Domäne sowie der
aminoterminalen Domäne des Merlin führen zu einer reduzierten Protrusion-
Ausbildung 98
4.2 Die induzierbare Zelllinie RT4-D6P2T dient als System zur funktionellen
Inhibierung der ERM-Proteine 100
4.3 Die Interaktion zwischen den ERM-Proteinen und dem CD44-Rezeptor hat einen
entscheidenden Einfluss auf die Protrusion-Ausbildung 101
4.4 Die Blockierung der Interaktion zwischen ERM-Proteine und der Zellmembran bzw.
dem Aktinzytoskelett verhindert nicht vollständig die Protrusion-Ausbildung 103
4.5 Die ERM-Inhibierung hat weder einen Einfluss auf die Dynamik der Protrusion-
Ausbildung noch auf die Länge der ausgebildeten Protrusions 105
4.6 Die Phosphorylierung des konservierten Thr 567 im Ezrin erhöht die Protrusion-
Ausbildung 106
III