Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...
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2. Material <strong>und</strong> Methoden<br />
DMEM: Dulbecco´s Modifiziertes Eagle Medium (Gibco) mit Na-Pyruvat, 1000mg/l Glukose <strong>und</strong><br />
Pyridoxin<br />
DMEM („high glucose): Dulbecco´s Modifiziertes Eagle Medium (Gibco) mit Na-Pyruvat, 4500mg/l<br />
Glukose <strong>und</strong> Pyridoxin-HCl<br />
DMEM mit 10% FCS (Gibco), 2 mM L-Glutamin (Flow-Laboratories) <strong>und</strong> 1mM Natriumpyruvat<br />
(Gibco)<br />
Infektionsmedium (IM) <strong>und</strong> Post-Infektionsmedium (PIM):<br />
Bezeichnet <strong>die</strong> Standardme<strong>die</strong>n (MEM bzw. DMEM) ohne P/S-Lösung <strong>und</strong> FCS (IM) bzw. ohne<br />
P/S-Lösung aber mit FCS (PIM).<br />
Observationsmedium:<br />
Standardme<strong>die</strong>n (MEM bzw. DMEM) mit 10mM HEPES-Puffer, 10% FCS (Gibco), 2 mM L-<br />
Glutamin (Flow-Laboratories), 1mM Natriumpyruvat (Gibco) 0,1 mM nicht essentielle Aminosäuren<br />
(Flow-Laboratories).<br />
Lösungen:<br />
26<br />
CB (Cytoskeleton-Buffer):<br />
EGTA 5 mM<br />
Glucose 5 mM<br />
MES 10 mM<br />
MgCl2<br />
5 mM<br />
NaCl 150 mM<br />
mit NaOH wird <strong>der</strong> pH <strong>auf</strong> 6,1 eingestellt<br />
PBS (Phosphate-Buffered-Saline):<br />
KCl 2,6 mM<br />
KH2PO4<br />
1,5 mM<br />
NaCl 140 mM<br />
Na2HPO4<br />
pH 7,3<br />
8,3 mM
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