Einfluss der ERM-Proteine auf die Protrusion- Ausbildung und Zell ...

4. Diskussion
et al. 2002, Matsui et al 1998). Andere Untersuchungen liefern Beweise dafür, dass zahlreiche
Isoformen der Protein-Kinase C (PKC) für eine Aktivierung der ERM-Proteine verantwortlich sind
(Ng et al. 2001, Pietromonaco et al. 1998, Simons et al. 1998). Unabhängig davon, ob die Rho-Kinase,
eine Proteinkinase C oder eine unbekannte Kinase diesen konservierten Rest phosphorylieren, scheint
doch immer wieder dieses Threonin eine spezifische Rolle bei der Aktivierung zu spielen.
Auch LLC-Pk1-Zellen, die eine Ezrin-Mutante exprimieren, bei der die Aminosäureposition 567 nicht
phosphorylierbar ist (Ez T567A), weisen eine abgeschwächte Fähigkeit zur Reorganisation des
Aktinzytoskeletts auf und sind in der Ausbildung von tubulären Epithelstrukturen beeinträchtigt
(Gautreau et al. 2000). Des weiteren wurde in einem Wundheilungsversuch gezeigt, dass die
Migration von kultivierten Zellen von der Phosphorylierung des Thr567 im Ezrin abhängig ist (Ng et
al. 2001).
Die vorliegende Arbeit gibt erste Hinweise darauf, dass die Alanin-substituierte Ezrin-
Phosphomutante (Ez T567A) die Ausbildung der Listerien-induzierten Protrusion beeinflusst. Diese
Phosphomutante führte zu einer Verringerung der Protrusionzahl um ca. 50%. Im Gegensatz dazu
verursachte eine Ezrin-Mutante, die eine permanente Phosphorylierung imitiert (Ez T567D), keine
Veränderungen in der Protrusionzahl. Somit ist durch eine Erhöhung der Anzahl der zur Verfügung
stehenden aktivierten Ezrin-Moleküle nicht gleichzeitig die Protrusionausbildung zu steigern. Es
könnte bereits eine ausreichende Anzahl an aktivierten Ezrin- bzw. ERM-Molekülen in wt-Zellen
vorliegen, um eine maximale Anzahl an Protrusions ausbilden zu können. Die Reduktion der
Protrusionzahl bei Expression von Ez T567A ist wahrscheinlich auf einen dominant-negativen Effekt
zurückzuführen. Einen solchen Effekt der Ezrin-Mutante T567A konnten bereits Gautreau et al.
(2000) in ihren Experimenten nachweisen.
Die vorliegende Arbeit zeigt insgesamt erste Hinweise darauf, dass die Phosphorylierung des Ezrins
an dem konservierten Thr567 einen signifikanten Einfluss auf die Effizienz der Listerien-induzierten
Protrusions-Ausbildung hat. Es bleibt aber offen, ob eine Phosphorylierung dieses konservierten
Threonin-Restes im Radixin und im Moesin auch eine Relevanz in der Protrusionausbildung hat.
Andere Untersuchungen ziegen aber schon, dass Phosphorylierungen an diesem Threonin zu einer
Aktivierung des Radixin und Moesin führen (Jeon et al.2002, Meyer et al. 1998, Yonemura et al.
2002).
Die Mitglieder der ERM-Proteinfamilie werden auch über andere zelluläre Mechanismen aktiviert, die
dann wahrscheinlich einen Einfluss auf die Protrusionausbildung haben. Es gibt unter anderem
Hinweise auf eine zelltypspezifische Aktivierung der ERM-Proteine. Es sind Rho-Kinase unabhängige
Aktivierungen dokumentiert, die nicht auf einer C-terminalen Phosphorylierung basieren (Yonemura
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