Dissertation Klaus Heitkamp 1999
Dissertation Klaus Heitkamp 1999 Dissertation Klaus Heitkamp 1999
4 Ergebnisse und Diskussion 49O19H 3C1318 16 14 12 10 9 7 5 3 1 O171511864220OR 2OOR 121OR 2R 2=O1´2´3´4´5´7´ 9´ 10´ 12´ 13´ 15´ 17´6´ 8´ 11´ 14´ 16´CH 318´R 1=24CH 3OCH 322CH 323252-(13S-(1-Methoxy-1-methyl-ethylperoxy)-octadeca-9(Z),11(E)-diensäure)-1,3-dilinolein (VIII)R 1= HAbbildung 222-(13S-Hydroperoxy-octadeca-9(Z),11(E)-diensäure)-1,3-dilinolein (IX)Strukturen synthetisierter Trilinolein-Derivate (Legende zu Tabelle 14 undTabelle 15)VIII δ [ppm] IX δ [ppm]C-1, C-1´ 173,17 172,74 173,22 172,83C-2, C-2´ 34,15 34,01 34,22 34,03C-3,4,5,6,7,8,14,15,16,23,24C-3´,4´,5´,6´,7´,8´,14´,15´,16C-3,4,5,6,7,8,14,15,16C-3´,4´,5´,6´,7´,8´,14´,15´,1631,78 31,51 29,67 29,59 —29,33 29,15 29,10 29,0729,02 27,19 25,07 24,83— 31,74 31,52 30,33 29,6029,41 29,33 29,16 29,1029,08 29,02 28,96 28,9227,19 25,64 24,96 24,84C-9,10,11,12 132,92 132,59 128,08 127,83 133,69 131,38 127,64 125,49C-9´, 10´, 12´, 13´ 130,21 129,98 127,90130,22 130,00 129,85 128,09(8 C-Atome)127,91 (8 C-Atome)C-11´ 25,63 25,64C-17,23,24; C-17´ 23,04 22,85 22,54 22,50 —C-17, C-17´ — 22,55 22,48C-19, 21 68,95 68,98C-20 62,08 62,09C-1813,98 14,01 13,96 14,02C-18´C-22 104,54 —C-13 84,60 86,70C-25 49,23 —Tabelle 1413 C-NMR-Daten verschiedener Trilinolein-Derivate (vgl. Abbildung 22 undKapitel 6.5.11 und 6.5.12)
50 4 Ergebnisse und DiskussionSubstanzVIIIIXProtonen an C-X (Anzahl)C-3,4,5,6,7,14,15,16,171,2 - 1,8 ppm (m) 1,2 - 1,8 ppm (m)C-2´,3´,4´,5´,6´,7´,15´,16´,17´ (54 H)C-2,82,0 - 2,5 ppm (m) 2,1-2,5 ppm (m)C-2´,8´,11´,14´ (12 H)C-9 (1 H) — 5,52 ppm (dt)J 8-9 =6,8 Hz; J 9-10 =11,1 HzC-20— 5,3-5,4 ppm (br m)C-9´,10´,12´,13´ (9 H)C9,205,3-5,5 ppm (br m) —C-9´,10´,12´,13´ (11 H)C-10 (1 H) 6,04 ppm (dd)J 9-10 =J 10-11 =11 Hz6,05 ppm (dd)J 9-10 =J 10-11 =11,1 HzC-11 (1 H) 6,55 ppm (dd)J 10-11 =11 Hz; J 11-12 =15 Hz6,61 ppm (dd)J 10-11 =11,1 Hz; J 11-12 =15,2 HzC-12 (1 H) 5,65 ppm (dd)J 11-12 =15 Hz; J 12-13 =7 Hz5,62 ppm (dd)J 11-12 =15,2 Hz; J 12-13 =7,1 HzC-13 (1 H) 4,41 ppm (dt)J 12-13 =J 13-14 =7 Hz4,42 ppm (dt)J 12-13 =J 13-14 =7,4 HzC-18, C-18´ (9 H) 0,86-0,94 ppm (m) 0,85 - 0,96 ppm (m)C-19, 21 (4 H) 4,18 ppm (m), 4,33 ppm (m) 4,19, 4,34 ppm (m)C-23, 24 (6 H) 1,41 ppm (s) —C-25 (3 H) 3,33 ppm (s) —Tabelle 151 H-NMR-Daten verschiedener Trilinolein-Derivate (vgl. Abbildung 22 undKapitel 6.5.11 und 6.5.12)4.1.6 Diskussion der ErgebnisseZur Synthese isomerenreiner Hydroperoxyfettsäuren hat sich die Oxidation mehrfach ungesättigterFettsäuren mit Lipoxidase aus Sojabohnen gut bewährt. Auf diese Weise lassen sichin relativ kurzer Zeit große Mengen der 13S-Hydroperoxyverbindungen von Linol- undLinolensäure synthetisieren. Analog zu Scheller et al. 128 konnten bei Durchführung der Reaktionbei pH 10 keine anderen Isomere nachgewiesen werden. Die Synthese der entsprechenden9S-Hydroperoxy-octadeca-10(E),12(Z)-diensäure verlief dagegen nicht zufriedenstellend.Zwar gelang die Enzymisolierung und eine erste Aufreinigung durch Dialyse ohne Probleme,die Enzymaktivität reichte jedoch mit 1594 ± 361 Units/mg Protein (im Vergleich zu 100000Units/mg bei der ebenfalls verwendeten Sojalipoxidase Typ I-B) bei weitem nicht aus, einehinreichend große Menge Produkt zu isolieren. Eine weitere chromatographische Aufreinigungder Proteinlösung im Anschluß an die Dialyse wäre somit von Vorteil gewesen. Galliardund Phillips 26 sowie und Reddana et al. 27 beschreiben nach einer solchen Reinigung eine
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- Seite 19 und 20: 6 3 Theoretischer Teil3 Theoretisch
- Seite 21 und 22: 8 3 Theoretischer TeilDer Radikalke
- Seite 23 und 24: 10 3 Theoretischer TeilDie Bildung
- Seite 25 und 26: 12 3 Theoretischer TeilHHR1R2R1R2(I
- Seite 27 und 28: 14 3 Theoretischer Teil3.2 Eigensch
- Seite 29 und 30: 16 3 Theoretischer TeilR1R2OOH R1 O
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- Seite 45 und 46: 32 4 Ergebnisse und Diskussion4 Erg
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- Seite 103 und 104: 90 4 Ergebnisse und Diskussionund a
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- Seite 107 und 108: 94 4 Ergebnisse und Diskussion1,0In
- Seite 109 und 110: 96 4 Ergebnisse und DiskussionReage
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50 4 Ergebnisse und DiskussionSubstanzVIIIIXProtonen an C-X (Anzahl)C-3,4,5,6,7,14,15,16,171,2 - 1,8 ppm (m) 1,2 - 1,8 ppm (m)C-2´,3´,4´,5´,6´,7´,15´,16´,17´ (54 H)C-2,82,0 - 2,5 ppm (m) 2,1-2,5 ppm (m)C-2´,8´,11´,14´ (12 H)C-9 (1 H) — 5,52 ppm (dt)J 8-9 =6,8 Hz; J 9-10 =11,1 HzC-20— 5,3-5,4 ppm (br m)C-9´,10´,12´,13´ (9 H)C9,205,3-5,5 ppm (br m) —C-9´,10´,12´,13´ (11 H)C-10 (1 H) 6,04 ppm (dd)J 9-10 =J 10-11 =11 Hz6,05 ppm (dd)J 9-10 =J 10-11 =11,1 HzC-11 (1 H) 6,55 ppm (dd)J 10-11 =11 Hz; J 11-12 =15 Hz6,61 ppm (dd)J 10-11 =11,1 Hz; J 11-12 =15,2 HzC-12 (1 H) 5,65 ppm (dd)J 11-12 =15 Hz; J 12-13 =7 Hz5,62 ppm (dd)J 11-12 =15,2 Hz; J 12-13 =7,1 HzC-13 (1 H) 4,41 ppm (dt)J 12-13 =J 13-14 =7 Hz4,42 ppm (dt)J 12-13 =J 13-14 =7,4 HzC-18, C-18´ (9 H) 0,86-0,94 ppm (m) 0,85 - 0,96 ppm (m)C-19, 21 (4 H) 4,18 ppm (m), 4,33 ppm (m) 4,19, 4,34 ppm (m)C-23, 24 (6 H) 1,41 ppm (s) —C-25 (3 H) 3,33 ppm (s) —Tabelle 151 H-NMR-Daten verschiedener Trilinolein-Derivate (vgl. Abbildung 22 undKapitel 6.5.11 und 6.5.12)4.1.6 Diskussion der ErgebnisseZur Synthese isomerenreiner Hydroperoxyfettsäuren hat sich die Oxidation mehrfach ungesättigterFettsäuren mit Lipoxidase aus Sojabohnen gut bewährt. Auf diese Weise lassen sichin relativ kurzer Zeit große Mengen der 13S-Hydroperoxyverbindungen von Linol- undLinolensäure synthetisieren. Analog zu Scheller et al. 128 konnten bei Durchführung der Reaktionbei pH 10 keine anderen Isomere nachgewiesen werden. Die Synthese der entsprechenden9S-Hydroperoxy-octadeca-10(E),12(Z)-diensäure verlief dagegen nicht zufriedenstellend.Zwar gelang die Enzymisolierung und eine erste Aufreinigung durch Dialyse ohne Probleme,die Enzymaktivität reichte jedoch mit 1594 ± 361 Units/mg Protein (im Vergleich zu 100000Units/mg bei der ebenfalls verwendeten Sojalipoxidase Typ I-B) bei weitem nicht aus, einehinreichend große Menge Produkt zu isolieren. Eine weitere chromatographische Aufreinigungder Proteinlösung im Anschluß an die Dialyse wäre somit von Vorteil gewesen. Galliardund Phillips 26 sowie und Reddana et al. 27 beschreiben nach einer solchen Reinigung eine
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