Dissertation Klaus Heitkamp 1999

3 Theoretischer Teil 23e) Bestimmung von Hydroperoxiden mit 1,5-DiphenylcarbohydrazidSetzt man 1,5-Diphenylcarbohydrazid in Gegenwart einer Säure mit Hydroperoxiden um, sobildet sich bei erhöhter Temperatur ein roter Farbstoff (Diphenylcarbazon), der bei etwa565 nm ein Absorptionsmaximum besitzt.HNNHONHHN+ ROOH- ROH- H 2ONNONHHNAbbildung 15Reaktion von 1,5-Diphenylcarbohydrazid mit HydroperoxidenDiese Reaktion nutzte 1926 Stamm als erster zum Nachweis von oxidierten Fetten. 76 Dazuwurde das Reagenz in Vaseline suspendiert und mit dem zu untersuchenden Fett versetzt. DasVerfahren lieferte jedoch zunächst nur unbefriedigende Ergebnisse und wurde später vonKorpaczy wesentlich verbessert, indem er das Reagenz in Tetrachlorethan löste und somit denNachweis in Lösung durchführte. 77 Hamm et al. entwickelten auf dieser Grundlage einephotometrische Bestimmungsmethode für Lipidhydroperoxide und erreichten damit eineNachweisempfindlichkeit, die in etwa auch mit anderen photometrischen Verfahren erreichtwurde. 78 Als Nachweisgrenze gaben Hamm et al. eine Peroxidzahl von 0,003 bei Einsatz von1 g Fett an. Unter den gegebenen Reaktionsbedingungen entspricht das einer Konzentrationvon etwa 10 µmol/l. Da die Reaktion auch in apolaren, nichtwäßrigen Lösungsmittelnstattfindet, eignet sie sich zur Nachsäulenderivatisierung bei der Bestimmung vonLipidhydroperoxiden in der Normalphasen-HPLC.f) Leuko-FarbstoffeAls Leuko-Farbstoffe (griech.: leukos = weiß, farblos) bezeichnet man weiße, farblose odernur schwach gefärbte Verbindungen, die in der Regel die reduzierte Form von Farbstoffendarstellen. Da die oxidierte Form der Verbindungen kräftig gefärbt ist, eignen sich Leuko-Farbstoffe deshalb als Redoxindikatoren. Aufgrund der oxidierenden Eigenschaften der(Lipid-)Hydroperoxide ist auch eine Verwendung zum Nachweis und zur Quantifizierung vonHydroperoxiden denkbar.