PRAKTIKUM DER BIOCHEMIE

I - 4MeCuM – 1. Studienjahr/2. Halbjahr - SoSe 2004 – PRAKTIKUM DER BIOCHEMIE - VersuchsprotokolleVersuch 2:Kohlensäure-Hydrogencarbonat-Puffer2.2.1 Berechnen Sie die Molarität des NaHCO 3 (MG = 84) und des NaCl (MG = 58,5) in deraufstehenden Salzlösung-I.Zum Vergleich: Eine "physiologische Kochsalzlösung" ist 153 mM und 306 milliosmolar.Molarität = (g/l)/Molekular bzw. FormelgewichtNaHCO 3 : 2,1/84 = 0,025 (M = mol/l) → 25 mMNaCl: 7,5/58,5 = 0,128 (M = mol/l) → 128 mMSumme: 153 mM → 306 mosmolar2.2.2 Die gemessenen Extinktionen in Tabelle 2 (nächste Seite) eintragen und die Tabelle vervollständigenDazu müssen zunächst die pH-Werte in den vier Küvetten berechnetwerden, wofür der pK-Wert des p-Nitrophenols jetzt als bekannt vorausgesetzt wird: pKdes p-Nitrophenols = 7,15.2.2.3 Mit den in 2.2.2 bestimmten pH-Werten für die Küvetten 1 bis 3 wird jeweils das pK 1 'der Kohlensäure berechnet und der Mittelwert gebildet.Küvette 1:Küvette 2:Küvette 3:pH = 6,56; pK 1 ' = __6,338__pH = 7,23; pK 1 ' = __6,309__pH = 7,61; pK 1 ' = __6,388__pK 1 ' (Mittelwert) = _6,345__ → 6,35Berechnung von pK S´ (Platz Nr. 5):Küv. 1, 50 Vol% CO 2 : pK S´= 6,56 – lg (25/15) = 6,338Küv. 2, 10 Vol% CO 2 : pK S´= 7,23 – lg (25/3) = 6,309Küv. 3, 5 Vol% CO 2 : pK S´= 7,61 – lg (25/1,5) = 6,3882.2.4 Aus den Spalten 3a bis 3c der Tabelle 2 sollen die pH-Differenzen angegeben werden:1. vor und nach Zugabe der Milchsäure∆pH = 7,61 – 7,21 = 0,402. vor Zugabe der Milchsäure und nach erneutem Begasen, um diePufferwirkung des offenen Systems zu verdeutlichen.∆pH = 7,61 – 7,53 = 0,08