Skript - Mikrobiologie und Weinforschung - Johannes Gutenberg ...

) Plattendiffusionstest:Mit einer sterilen Pipette werden jeweils 0,1 ml einer Bakteriensuspension aufeine Petrischale mit Standar-I-Agar getropft. Ein glasspatel wird kurz in 70%Ethanol getaucht und durch die Bunsenflamme gezogen. Dann wird nachAbkühlen mit dem Glasspatel die Bakteriensuspension gleichmäßig auf derAgaroberfläche verteilt.Vier sterile Filterplättchen (0.6 cm) werden in möglichst großem Abstandvoneinander auf dem erstarrten Keimschichtagar verteilt und leicht angedrückt.In die Mitte wird das Filterblättchen mit der unbekannten Konzentrationgegeben. Jeweils 5 µl der Antibiotikaverdünnungen werden mit einerEppendorf-Pipette auf die Plättchen aufgetragen.Es sind folgende Verdünnungen der Antibiotikum-Lösung herzustellen:Penicillin: Stammlösung: 1600 I.E./ml (mg Penicillin = 1660 I.E.).Konzentrationen: 0.02; 0.04; 0.08; 0.16 I.E. pro 5 µl. Zuerst wird eine 1 : 50Verdünnung, dann 1 : 2 Verdünnungen hergestellt (1 x pro Tisch). DieFilterblättchen werden mit einemBleistift beschriftet.Testkeim: Micrococcus luteusAuswertung a:Die Größen der Hemmzonen werden bestimmt.Auswertung b:Der Durchmesser (mm) der Hemmhöfe ist gegen den Logarithmus derAntibiotikakonzentration (µg/ml) aufzutragen. Die Penicillinkonzentration einerTestlösung (E) ist zu bestimmt. Bleistift, halblogarithmisches Millimeterpapierund Lineal sind mitzubringen.30