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Skript - Mikrobiologie und Weinforschung - Johannes Gutenberg ...

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Wirkungsweise <strong>und</strong> Beispiele für antimikrobiell wirksame Mittel:I. Zerstörung oder Veränderung der Zellstruktura) Zerstörung wichtiger Zellbestandteile (z.B. Eiweißdenaturierung durch Alkohol).b) Zerstörung der Zellwand (z.B. durch Lysozym).c) Störung der Funktion der Cytoplasmamembran z.B. durch Phenol <strong>und</strong> Kresole,kationische Detergentien (z.B. Cetylpyridiniumchlorid), anionische Detergentien(z.B. Seife, Natriumtetradecylsulfat), Antibiotica (z.B. Polymyxin E), mancheFarbstoffe usw.d) Verbindungen von Nukleinsäuren z.B. mit basischen Farbstoffen wie Akriflavin,Gentianaviolett.II. Störung des Energiestoffwechselsa) Reaktion mit Proteinen <strong>und</strong> Enzymaktivierung durch Schwermetalle.b) Reaktion mit der prosthetischen Gruppe von Enzymen z.B. Cyanid.c) Competitive Hemmung durch CO.d) Verhinderung der oxidativen Phosphorylierung z.B. durch 2,4-Dinitrophenol.III. Störung von Biosynthese <strong>und</strong> Wachstuma) Verhinderung der normalen Proteinsynthese z.B. durch Aminosäureanaloge wie5-Methyltryptophan, p-Fluorphenylalanin.b) Verhinderung der normalen Nukleinsäuresynthese z.B. durch Purin- <strong>und</strong>Pyrimidinanaloge wie 6-Mercaptopurin, 5-Bromuracil, Mitomycin C (einAntibiotikum, das die DNS-Synthese stört).c) Hemmung der Coenzymsynthese z.B. durch Sulfanilamid.d) Hemmung der Zellwandsynthese z.B. durch Penicillin.Um die Wirkung einer Substanz auf das Wachstum von Mikroorganismen zuprüfen, wird für die qualitative Untersuchung die auxanographische Methode, fürdie quantitative Untersuchung die Hemmstoff-Verdünnungsreihe angewendet. DasPrinzip beider Methoden kann in vielfacher Hinsicht variiert werden.Hemmung des Bakterienwachstums (1x pro Gruppe)a) Qualitativer vergleichender Test zur Bestimmung des Resistenzspektrumsverschiedener Bakterien <strong>und</strong> eine Hefe:Die Testkeime werden ausgestrichen. Sterile 8 x 1,5 cm große sterileFilterpapierstreifen werden mit 0,2 ml 5 % Streptomycin-Lösung (Eppendorf-Pipette) befeuchtet, mit steriler Pinzette (mit Alkohol abflammen!) senkrecht zuden ausgestrichenen Mikroorganismen auf eine Standard-I-Platte gelegt.Testkeime:Bacillus sphaericusMicrococcus luteusEscherichia coli K12Saccharomyces cerevisiae29

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