Skript - Mikrobiologie und Weinforschung - Johannes Gutenberg ...

Pichia jadinii, 7 Tage auf Sabouraud-Agar kultiviert.Durchführung:1. Mit einer Pasteurpipette einen Tropfen Wasser auf einen fettfreienObjektträger tropfen.2. Unter sterilen Vorsichtsmaßnahmen mit der Impföse etwas Material vonder Schrägkultur entnehmen und mit einem zweiten Objektträger zueinem feinen Film ausziehen.3. Präparat lufttrocknen, anschließend Hitze fixieren.4. Objektträger mit Sudanschwarz B – Lösung übergießen und Farbe 15min einwirken lassen.5. Farbe abgießen, mit Filterpapier oder Kleenex abtrocknen, lufttrocknen.6. In Ethyllactat eintauchen, bis keine Farbe mehr abgeht (Pinzettebenutzen).7. Mit Filterpapier trocknen.8. 10 s mit Safraninlösung gegen färben, mit Wasser abspülen.9. Deckglas auflegen und unter Ölimmersion mikroskopieren.Auswertung:Die Lipideinschlüsse sind schwarzblau gefärbt, der Zellinhalt rot.Reagenzien:Sudanschwarz B: 0,3 g in 75 ml 95 %igem Ethanol lösen und mitIonenaustauscherwasser auf 100 ml auffüllen.0,5%ige wässrige Safraninlösung.Sabouraud-Agar:(g/l)Spezialpepton 10,0D(+)-Glukose 20,0Agar-Agar 17,0Phasenkontrastmikroskop13