Skript - Mikrobiologie und Weinforschung - Johannes Gutenberg ...

4. Objektträger auf Färbebank legen, mit Malachitgrünlösung bedecken,20 s mit der Flamme bis zur Dampfbildung erhitzen (nicht kochen) undweitere 40 s einwirken lassen.5. Mit destilliertem Wasser aus einer Spritzflasche abspülen.6. 5 min mit Safraninlösung gegen färben.7. Mit dest. Wasser abspülen.8. Deckglas auflegen und unter Ölimmersion mikroskopieren.Auswertung:Die Sporen sind grün gefärbt, der Zellinhalt rot.Reagenzien:5 %ige wässrige Malachitgrünlösung.0,5 %ige wässrige Safraninlösung.Sporenmedium:1,0 % Stärke0,3 % Fleischextrakt0,1 % Bacto-Pepton0,2 % KNO 3Volutin-Färbung (Die folgenden Färbungen werden am 2. Tagdurchgeführt)Viele Organismen speichern Phosphorsäure in Form von Polyphosphatgranula.Sie werden nach der Erstbeschreibung an Spirillumvolutans auch Volutin-Granula oder nach der charakteristischen Farbänderungmetachromatische Granula genannt. Volutin wird bevorzugt inälteren Zellen gebildet. Es ist mit basischen Farbstoffen (z.B. Methylenblau)nachweisbar.Organismus:Schizosaccharomyces pombe, 7 Tage auf Sabouraud-Agar kultiviert.Durchführung:1. Einen Tropfen alkoholische Methylenblaulösung auf einen fettfreienObjektträger bringen.2. Unter sterilen Vorsichtsmaßnahmen eine Öse Zellmasse vomSchrägröhrchen mit der Methylenblaulösung vermischen.3. 2-3 min einwirken lassen.10