TC-PRAKTIKUM - TCI @ Uni-Hannover.de
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25ENZYMEIn diesem Versuch soll die Kinetik einer enantioselektiven enzymatischen Hydrolyseeines D,L-Aminosäureesters zu <strong>de</strong>r entsprechen<strong>de</strong>n L-Aminosäure und <strong>de</strong>m D-Esteruntersucht wer<strong>de</strong>n. Dazu wird ein natives und ein immobilisiertes Enzym verwen<strong>de</strong>t. Imersten Teil sollen die kinetischen Parameter vmax und KM für das native Enzymermittelt wer<strong>de</strong>n; im zweiten Teil wird die Reaktionsgeschwindigkeit für dasimmobilsierte Enzym untersucht.1. THEORETISCHE GRUNDLAGEN- Aminosäuren, Proteine, Enzyme- Enzymkinetik- Hemmtypen (kompetitive-, nicht kompetitive-, unkompetitive-, Substrat-,Diffusions-Hemmung)- Allosterische Effekte, Kooperativität- Enzymimmobilisierung- Enzyme in <strong>de</strong>r TechnikLiteratur:-Karlson, Biochemie, Kurzes Lehrbuch <strong>de</strong>r Biochemie, 12. völlig neubearbeitete Auflage, Georg Thieme Verlag, Stuttgart,(New York) 1984-Lubert Stryer, Biochemie, Spektrum Chemie, 4. Auflage 1987-Hartmeier, Immobilisierte Biokatalysatoren, SpringerVerlag,Berlin, 19862. VERSUCHSDURCHFÜHRUNGGeräte:1x Messkolben 250 ml2x Bechergläser 200 ml2x Bechergläser 100 ml1x Messzylin<strong>de</strong>r 250 ml1x Peleusball2x Vollpipetten 25 ml1x Eppendorfpipette 100 µl mit gelben SpitzenPufferlösungen: pH 7, pH 5
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