Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

3 Sollbruchstellen
Zweck
Tabelle 2 Quantifizierung des Peptids 53 nach Behandlung mit den aufgelisteten
Reaktionsbedingungen, zur Ermittlung der Stabilität der Linker.
Reaktions-
bedingung
Reaktions-
zeit
Ausbeute in %
(Mittelwert ± Standardabweichung)
Glycolamidester HMBA
Eichgerade 102 ± 22 101 ± 10
Ringöffnung BrCN in TFA aq. 17,5 h 48 ± 6 67 ± 9
Partieller
Edman-Abbau
(PED)
Screening
Seitenketten-
schutzgruppen
Pyridin 17 h 114 ± 17 91 ± 10
Pyr/Wasser/NEt3 1 h 86 ± 15 91 ± 14
PITC/FmocOSu 1 h 106 ± 18 82 ± 8
TFA 18 h 30 ± 5 15 ± 2
PBS-Puffer (pH 7.4) 19 h 59 ± 7 92 ± 12
TBS-Puffer (pH 9.0) 1 h 9 ± 1 47 ± 3
Guanidinium HCl 15 min 100 ± 17 93 ± 10
TFA/TIS/Wasser 3 h 98 ± 15 73 ± 6
Pd(PPh3)4/DMB 2x30 min 116 ± 18 110 ± 10
betrachtet scheint dies mit einer Stabilität von zwei Dritteln noch vertretbar. Da TFA
aber bei der Abspaltung der Seitenkettenschutzgruppen, dem partiellen Edman-
Abbau und der Bromcyan-Spaltung verwendet wird, fällt die Labilität in der Summe
zu stark ins Gewicht. Somit werden auch diese beiden Linker als nicht geeignet
betrachtet.
Wie erwartet zeigte sich die Suche nach einem geeigneten Linker als schwierig.
Sowohl der Arylhydrazin-Linker, als auch der Glykolamid- beziehungsweise der
Benzamidester-Linker erwiesen sich als nicht hinreichend stabil unter den von uns
verwendeten Bedingungen. Es konnte kein Linker gefunden werden, der die
Umsetzung der Methionin-Sollbruchstelle und den anschließenden partiellen Edman-
Abbau an der festen Phase ermöglicht.
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