Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

3 Sollbruchstellen
Probleme von ungewollter Fmoc-Abspaltung unter basischen Linker-Spalt-
bedingungen zu umgehen, erfolgte eine manuelle Abspaltung der N-terminal
verbliebenen Fmoc-Schutzgruppe (20% Piperidin). Anschließend wurde der
N-Terminus acetyliert, um das freie Amin zu cappen. Zum Abspalten des vollständig
geschützten Peptids wurde ein Teil des Harzes über Nacht mit einer
Propylaminlösung behandelt, gewaschen (DMF, MeOH, Wasser) und die vereinigten
Lösungen eingeengt. Nach Lyophilisieren wurde das Peptid mittels RP-HPLC und
anschließender ESI-Massenspektrometrie charakterisiert. Für darauffolgende
Stabilitätstests und Quantifizierungen wurde eine definierte Menge Harz eingewogen,
die säurelabilen Schutzgruppen abgespalten, das Harz den zu untersuchenden
Reaktionsbedingungen ausgesetzt und das Peptid anschließend abgespalten. Durch
Integration des Produktpeaks im RP-HPLC-Chromatogramm (bei tR=15,4 min)
konnte das Peptid quantifiziert werden.
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Abb. 3.22 Eichgerade der Glycolamidester-Datenreihe. Für die Datenreihe in magenta
wurden 2,4 mg 52 eingewogen. Die blaue Datenreihe entstammt einer
Einwaage von 1,7 mg 52.