Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

8 Experimenteller Teil
8.3.3 Synthese des cyclischen Peptids 41 zur Untersuchung von
Methionin als Sollbruchstelle
Die Synthese der Peptide erfolgte am 4-Fmoc-Hydrazinobenzoyl Am NovaGel TM
(01-64-0377) Harz. Zur Reduktion der Beladungsdichte wurde das Harz nach AAV 1
mit der ersten Aminosäure (Fmoc-βAla-OH/ Boc-βAla-OH) beladen. Es wurden
jedoch je 5 eq. Xaa verwendet. Die linearen Vorläufersequenzen wurden am Peptid-
synthesizer nach AAV 7 dargestellt. Als chemistry file wurde 20µmol(3ml)2.1.0.kem
ausgewählt. Die Elongation der Peptidkette erfolgte unter Verwendung der Module
HhDAFiiidD (PrPk Fmoc Depro/Single). Die verwendeten Aminosäuren waren die
folgenden: Fmoc-Ala-OH, Fmoc-βAla-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Gly-OH,
Fmoc-Glu-OAll, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Phe-OH und Fmoc-Pro-OH.
Nach der automatisierten Synthese wurde das Syntheseharz vom reaction vessel
des Synthesizers in eine Einwegspritze mit PE-Fritte überführt. Zur Entschützung der
mit Allyl geschützten Carbonsäure wurde das Harz wie in AAV 11a beschrieben
behandelt. Die N-terminale Fmoc-Schutzgruppe wurde nach AAV 10 gespalten. An-
schließend wurde wie in AAV 8 aufgeführt cyclisiert.
Zur Analytik wurden kleine Mengen des Peptids entnommen und nach AAV 18 vom
Harz gespalten.
Zur Spaltung der Met-Sollbruchstelle wurde das Harz nach AAV 14 behandelt.
Peptid (39→40)
Fmoc-Met(O)-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu(-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-OH)-OAll
MALDI-TOF-MS: 1479,0 m/z [M+H] +
Berechnet: C71H96N15O18S + (1478,6773 m/z)
amid))-OAll
Fmoc-Met(O)-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu(-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-N-(4-Bromphenyl-
MALDI-TOF-MS: 1632,1 m/z [M+H] +
Berechnet: C77H100BrN16O17S + (1631,6351 m/z)
Peptid (41→42)
Cyclo[Met(O)-Gly-Ala-Pro-Gly-Phe-Glu(-βAla-Pro-Pro-Arg(Pbf)-OH)]
MALDI-TOF-MS: 1198,9 m/z [M+H] +
Berechnet: C53H80N15O15S + (1198,5674 m/z)
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