Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz
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8 Experimenteller Teil<br />
geladen. Das mit Harz befüllte 8 ml Reaktionsgefäß wird eingespannt und die<br />
Synthese wird gestartet.<br />
UV-Monitoring des Syntheseverlaufs<br />
Zur Entfernung der Fmoc-Schutzgruppe wird das Harz je 8 min mit einer 20%<br />
Piperidin in NMP-Abspaltlösung behandelt. Von der Abspaltlösung erfolgt eine<br />
Absorptionsmessung bei 301 nm. Ist die Abweichung der Absorption größer 4% der<br />
vorherigen Messung, so erfolgt ein erneuter Fmoc-Abspaltschritt. Es erfolgen jedoch<br />
maximal sechs Fmoc-Abspaltschritte. Für jeden Aminosäurekupplungschritt werden<br />
6,25 eq. Aminosäure mit 4,75 eq. HBTU/HOBt und 10 eq. DIPEA aktiviert und 40 min<br />
gekuppelt. Zum Capping wird das Harz 1 min mit Cappinglösung behandelt. Waren<br />
zur vorherigen Fmoc-Abspaltung mehr als drei Piperidinbehandlungsschritte<br />
notwendig, so wird die Reaktionszeit beim Capping um 5 min verlängert.<br />
Nach der Synthese wird das Harz in eine mit einer Fritte versehene Einwegspritze<br />
umgefüllt.<br />
Leitfähigkeitsmessung zum Überprüfen des Syntheseverlaufs<br />
Die Synthese erfolgt analog zum oben beschriebenen Verlauf (UV-Monitoring).<br />
Jedoch wird von der Fmoc-Abspaltlösung anstelle einer Absorptionsmessung die<br />
Leitfähigkeitsmessung durchgeführt. Bei der PreviousPeak-Methode wird die Fmoc-<br />
Abspaltung solange wiederholt, bis sich die Leitfähigkeitswerte zweier aufeinander<br />
folgender Messungen um weniger als 5% unterscheiden. Bei Verwendung der<br />
FirstPeak-Methode wird immer der Messwert der ersten Abspaltung als<br />
Vergleichswert herangezogen.<br />
AAV 8 Cyclisierung<br />
Zum in NMP vorgequollenen Harz wird eine Mischung aus 4 eq. PyBOP, 6 eq. HOBt<br />
und 8 eq. DIPEA in NMP aufgezogen und über Nacht geschüttelt. Anschließend wird<br />
zehnmal mit DMF und fünfmal mit DCM gewaschen. Die Vollständigkeit der<br />
Cyclisierung wird mit Kaiser- und TNBS-Test überprüft. Die Cyclisierungsreaktion<br />
wird bis zur Vollständigkeit wiederholt, wobei die Aktivierungsreagenzien täglich<br />
erneuert wurden. Nach erfolgreicher Cyclisierung wird das Harz im Vakuum<br />
getrocknet. Die Cyclisierung mit PyAOP/HOAt erfolgt analog.<br />
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