Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz
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8 Experimenteller Teil<br />
Vor der Synthese werden die entsprechenden Flow-Tests durchgeführt. Zur<br />
Vorbereitung der Synthese wird ein chemistry-file ausgewählt (meist „20µmol<br />
spezial.kem“) und auf den Synthesizer geladen. Dann werden das sequence- und<br />
das run-file erstellt und vom Rechner an den Synthesizer übertragen. Außerdem<br />
werden die Aminosäuren in NMP gelöst (125 mmol in 0,5 ml; falls sich die<br />
Aminosäure nicht vollständig durch vortexen löst, wird sie kurz mit Ultraschall<br />
behandelt), in die Kartuschen pipettiert und in den Synthesizer geladen. Das mit Harz<br />
befüllte 3 ml Reaktionsgefäß wird eingespannt und die Synthese wird gestartet.<br />
Für den 0,1 mmol Ansatz werden folgende Lösungen verwendet. Die Zahlen geben<br />
die Flaschennummer am Synthesizer an; nicht erwähnte Flaschennummern bleiben<br />
leer:<br />
1) abs. Piperidin<br />
4) Cappinglösung:<br />
0,8 g HOBt wird in ca. 100 ml NMP gelöst. 19 ml Acetanhydrid und 9 ml<br />
DIPEA werden zu gegeben und anschließend wird die Lösung mit NMP<br />
auf 400 ml aufgefüllt.<br />
5) 0,45 M HOBt/HBTU in DMF:<br />
In einem Messzylinder werden 37,9 g (100 mmol) HBTU und 15,3 g<br />
(100 mmol) HOBt eingewogen und auf 200 ml mit DMF aufgefüllt.<br />
Anschließend wird solange gerührt, bis sich alles aufgelöst hat (ungefähr<br />
10 Minuten).<br />
6) MeOH HPLC grade<br />
7) 2 M DIPEA in NMP:<br />
69,6 ml DIPEA werden mit 130,4 ml NMP gemischt.<br />
9) DCM, peptide grade<br />
10 und 11) NMP, peptide grade<br />
Vor der Synthese werden die entsprechenden Flow-Tests durchgeführt. Zur<br />
Vorbereitung der Synthese wird ein chemistry-file ausgewählt und auf den<br />
Synthesizer geladen. Dann werden das sequence- und das run-file erstellt und vom<br />
Rechner an den Synthesizer übertragen. Außerdem werden die Aminosäuren in die<br />
Kartuschen eingewogen (10 eq. für FastMoc 1,0 mmol) und in den Synthesizer<br />
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