Angelika Semmler - KOPS - Universität Konstanz

6 Synthese fluoreszenzmarkierter Phosphopeptide
6.2 Auswahl des Fluoreszenzlabels
Die Auswahl des Fluoreszenzlabels wird vor allem von der späteren Anwendung
bestimmt. Wie bereits erwähnt, sollen die hier beschriebenen Peptide in einem SH2-
Domänen-Mikroarray angewendet werden. Das Fluoreszenzlabel muss also in erster
Linie an den Chipreader angepasst sein. Der in der Gruppe von Prof. Hauck
verwendete Chipreader ist für die Verwendung der Fluoreszenzfarbstoffe Cy3 und
Cy5 ausgestattet. Möchte man kostengünstigere Farbstoffe als Label verwenden, so
muss man darauf achten, dass diese ähnliche spektroskopische Eigenschaften
aufweisen. Sulforhodamin-B-sulfonylchlorid ist ein geeigneter Farbstoff und wurde in
unserer Gruppe bereits als Fluoreszenzlabel verwendet (Tabelle 9). [130]
Tabelle 9 Vergleich der spektralen Eigenschaften von Sulforhodamin-B-sulfonylchlorid
Farbstoff Farbe des
(SRBS chlorid) mit Cy3.
Fluoreszenzlichtes
λ max, abs.
[nm]
λ max, em.
[nm]
ε max
[10 5 M -1 cm -1 ]
SRBS-OH Orange 564 583 7,2 0,33
Cy3 Orange 550 570 15,0 >0,15
98
φF