Deutsche Gesellschaft für Arbeitsmedizin und Umweltmedizin e.v.

148
DGAUM – 47. JAHRESTAGUNG POSTER
eingehenden Schulung unterschiedlich, mit
Ausnahmen jedoch meist zufriedenstellend
oder gut. Die Gewinnung von Betriebsärzten
zur Betreuung der Unternehmen ist in
einigen Regionen schwierig.
Genetische Untersuchungen
P37
Datenaufbereitung mittels nichtlinearer
Klassifikationsverfahren zur
Erhöhung der statistischen Aussagekraft von
Odds-Ratio-Analysen
Norman Bitterlich1 , Joachim Schneider2 1 2 Biostatistik, Medizin & Service GmbH, Chemnitz, Institut
und Poliklinik für Arbeits- und Sozialmedizin, Universitätsklinikum
Gießen und Marburg GmbH, Gießen
Unterschiede individueller Empfindlichkeiten
gegenüber Einwirkungen kanzerogener
Gefahrstoffe werden u. a. durch Polymorphismen
fremdstoffmetabolisierender
Enzyme erklärt. Molekularepidemiologische
Fall-Kontroll-Studien zu Lungenkrebserkrankungen,
die die multiple logistische Regression
(MLR) anwenden, verweisen mittels
Odds-Ratio-Analyse (OR) auf erwartete
Abhängigkeiten, können aber oft selbst bei
Subgruppen keine statistische Signifikanz
nachweisen. Adjustierung auf Alter und
Rauchen verbessern die Aussagekraft nur gering.
Die Homogenisierung des Datenmaterials
mittels Ein-/Ausschlusskriterien
wirkt zwar unterstützend hinsichtlich der
Arbeitsthesen, jedoch verringern sich die
Fallzahlen dabei so, dass die statistische
Signifikanz nicht erreicht werden kann.
Von über 1000 Personen eines Hochrisikokollektivs
wurden Polymorphismen des
Cytochromoxydasen (CYP) und des Glutathion-S-Transferase-(GST-)Systemsbestimmt.
Die DNA-Extraktion erfolgte nach
Standardmethoden, die Analyse der Genprodukte
mittels Real-time-PCR-Analyse.
Die Einzelparameter wurde geschichtet nach
dem histologischen Tumortyp mittels MLR
statistisch ausgewertet. Eine Subgruppenuntersuchung
zeigt Tendenzen auf, die in
einer weiteren Analyse zu bestätigen sind.
Es werden Fuzzy-basierte Klassifikationsverfahren
auf die genannten Einflussfaktoren
angewandt. Damit gelingt eine
verbesserte Klassenzuordnung gegenüber
der MLR. Während sich hierbei ein negativer
Einfluss des Alters zeigt, der den epidemiologischen
Erkenntnissen widerspricht,
bilden die Fuzzy-basierten Verfahren diesen
Einfluss besser ab. Die Fuzzifizierung der
Parameter eignet sich als Datenvorverar-
Arbeitsmed.Sozialmed.Umweltmed. 42, 3, 2007
beitung, die OR-Analyse gewinnt an Aussagekraft.
Die Arbeitsthesen werden nun
als signifikant nachgewiesen. Der Einfluss
der Genpolymorphismen wird deutlich.
Bei einem suszeptiblen Patienten kann eine
130fache Risikoerhöhung, an Lungenkrebs
zu erkranken, für einen stark rauchenden
75-Jährigen gegenüber einem 30-jährigen
Nichtraucher nachgewiesen werden,
wohingegen bei fehlendem Gendefekt im
CYP1B1-System eine 90fache Risikoerhöhung
resultiert. Das Verfahren ermöglicht
eine anwenderspezifische Interpretation der
Ergebnisse und eignet sich für eine breite
Klasse von Parametern.
P38
Genexpressionsanalysen von Zellen
nach Beschallung mit einem Infrapulsgenerator
Silvester Siegmann1 , Klaus Siegmund1 , Elisabeth
Borsch-Galetke1 , Bernd Prisack2 1Institut für Arbeitsmedizin und Sozialmedizin, Heinrich-
Heine-Universität Düsseldorf, 2Institut für Onkologische
Chemie, Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf
Im Rahmen eines Forschungsvorhabens
wurden Versuche mit einem Infrapulsgenerator
(IPG) durchgeführt. Dabei wird in 4
Rohren ein Luft-Azetylen-Gasgemisch zur
Knalldruckerzeugung gezündet und eine
schussartige Belastung erzeugt. Testzellen
waren mit Phytohämaglutinin stimulierte
periphere menschliche Lymphozyten und
dermale Fibroblasten. Nach 48-stündiger
Vorkultivierung erfolgte ihre Beschallung
jeweils in einem Abstand von 3 und 12 m
zum IPG. Pro Versuchsstufe wurden 2 parallele
Lymphozytenkulturen beschallt, zusätzlich
wurden Kulturen ohne Infraschall-
Einwirkung als Kontrollen verwendet.
Die Schalldruckpegel variieren je nach
Entfernung zwischen ca. 155 dB (3 m Entfernung)
und 145 dB (12 m Entfernung).
Es wurde sehr homogen etwa die Hälfte
der über 22 000 Gene auf einem Affymetrix-Genchip
detektiert. Die Anzahl der
veränderten Gene ist deutlich geringer als
in vergleichbaren Belastungsexperimenten
mit einer Panzerhaubitze 2000.
Die Lymphozyten „Kontrolle“ gegen
„Belastung“ nach Belastung zeigen in diesem
Versuch je nach Nähe zur Pulsquelle eine
Aufregulierung zwischen 0,7 und 1,6 %.
Zur Signifikanzanalyse der Microarraydaten
wurde die SAM-Methode eingesetzt.
Die SAM-Methode („significant analysis of
microarrays applied to radiation response“)
weist jedem Gen einen Score zu. Dieser
Score beruht auf der jeweiligen Genexpressionsveränderung,
unter Berücksichtigung
der Standardabweichung dieses Gens bei
wiederholten Messungen. Die Anzahl der
Gene, deren Expression als signifikant verändert
betrachtet wird, kann dadurch, dass
der Mittelwert einer Genexpressionsserie
sich um wenigstens einen vorgegebenen
Faktor verändert, eingeschränkt werden.
In der Regel erwartet man wenigstens eine
Veränderung um den Faktor “2”, um im
Rahmen der Messungenauigkeit von einer
nicht auf Zufall basierenden Veränderung
sprechen zu können.
Wird diese Methode angewendet, so
ergibt sich eine Rate als falsch detektierter
Gene von über 50 %. Wählt man hier die
Gene mit den 100 größten Scores aus, so
sind davon 51 Gene allein auf die zufällige
Varianz der Expression zurückzuführen.
Auch wurden nur 2 Gene im Durchschnitt
wenigstens um den Faktor 2 verändert.
Von einer genschädigenden Wirkung
der o. g. Schallbelastung durch einen Infrapulsgenerator
ist daher nicht auszugehen.
P39
Sirtuin 1 (Sirt1) Polymorphismusstudien
beim Vibrationsbedingten
Vasospastischen Syndrom (VVS)
Susanne Völter-Mahlknecht1 , Bernd Roßbach1 , Stephan
Letzel1 , Ulrich Mahlknecht2 1Institut für Arbeits-, Sozial- und Umweltmedizin, Johannes
Gutenberg-Universität, Mainz, 2Medizinische Klinik, Universität
Heidelberg
Stickstoffmonoxid (NO) ist ein starker
Vasodilatator. Sirtuine sind epigenetisch
wirksame Substanzen, die letztlich in einer
Zelle dafür verantwortlich sind, welche
Gene in welcher Situation und zu welchem
Zeitpunkt an- bzw. abgeschaltet werden.
Das Sirtuin Sirt1 wird durch den NO-Liberator
Nitroprussid stärker exprimiert und
seine enzymatische Aktivität nimmt zu. Ziel
des Projektes war es nun zu untersuchen,
ob es einen genetischen Polymorphismus
für Sirt1 gibt, der möglicherweise dafür
verantwortlich sein könnte, dass bei VVS-
Patienten trotz der Anwesenheit von NO
der vasodilatierende Effekt ausbleibt.
Es wurden 40 Männer und zwei Frauen
untersucht. 59 % der Betroffenen waren vor
Unterlassung der Vibrationsexposition im
Bereich der Forstwirtschaft tätig. Die übrigen
arbeiteten u. a. als Steinmetze, Zahntechniker,
Gärtner. Methodisch wurde der
Light Cycler eingesetzt.
Mittels der Analyse des In-silico-Expressionsprofils
mit Hilfe des EST profile
viewers (NCBI) konnte eine sehr starke Expression
von Sirt1 in Gefäßendothelzellen
nachgewiesen werden. Daher wurde unter-