Dissertation Carolin Grundgeiger - TOBIAS-lib - Universität Tübingen

2.6.2.2 Bestimmung kalziumhaltiger Bereiche
Material und Methoden 23
Der Kalziumanteil wurde an Präparaten, die mit der Silbernitratfärbung nach
von Kossa angefärbt waren, bestimmt. Zunächst wurde nach oben
beschriebener Methode (Kap. 2.6.2.1) die Plaquefläche mit dem 2,5fachen
Objektiv an den Segmenten AoBo II und AoBo III morphometrisch ermittelt. Die
Fläche (mm²) der schwärzlich gefärbten kalziumhaltigen Bereiche wurde mit
dem 10fach Objektiv ausgemessen und ins Verhältnis zur Gesamtplaquefläche
gesetzt. Daraus ergab sich der prozentuale Anteil an der Plaque. Dieser
prozentuale Anteil wurde mit der Plaquefläche multipliziert und daraus die
Fläche (mm²) der kalziumhaltigen Bereiche berechnet.
2.6.3 Digitale Auswertung
2.6.3.1 Prinzipielles Vorgehen
Zur digitalen Auswertung wurden vier diametral gelegene Ausschnitte der
Plaque eines Gefäßsegments fotografiert. Diese wurden im Bildbear-
beitungsprogramm Adobe Photoshop 7.0 mit der automatischen Tonwert-
korrektur (Bereich 0-255) nachbearbeitet. Dadurch wurde der Kontrast in
Bildern mit mittlerer Farbwertverteilung verbessert, indem die hellsten und
dunkelsten Pixel eines Bildes neu definiert wurden. Anschließend wurden die
Bildanteile, die nicht zur Plaque gehörten, entfernt. Die Auswertung erfolgte mit
der Software „Analyze It“, die den prozentualen Anteil der rot gefärbten Pixel an
der Gesamtpixelzahl bestimmt (Abb. 5). Aus den vier Einzelmessungen wurde
die Summe aller roten Pixel berechnet und zur Gesamtpixelzahl ins Verhältnis
gesetzt. Dieser prozentuale Anteil wurde mit der Plaquefläche multipliziert und
daraus die Fläche (mm²) der jeweiligen Plaquebestandteile berechnet.