im saisonalen Verlauf - Kora

2.4 Herstellung der Flüssigkeits- und PartikelmarkerAus einer Vielzahl in der Literatur angegebenen Marker wurden dieFlüssigkeitsmarker Cr-EDTA und Co-EDTA und der Partikelmarker Chrommarkiertes Heu ausgewählt und nach den von Binnerts et al. (1968) und Udén etal. (1980) beschriebenen Methoden hergestellt.2.4.1 Co-EDTA25 g Co(II)acetat * 4H 2 O, 29,2 g EDTA und 4,3g LiOH * H 2 O wurden in 200 mlAqua dest. durch Erwärmen gelöst. Nach dem Abkühlen wurde 20 ml H 2 O 2(30%ig) dazugegeben und bei Raumtemperatur 2-3 Stunden stehen gelassen.Nach der Zugabe von 300 ml 95%igem Ethanol wurde die Lösung über Nachtgekühlt und das auskristallisierte Co-EDTA durch Filtrieren von der Lösunggetrennt. Der Filterrückstand wurde mit 80%igem Ethanol gewaschen undgetrocknet (Udén et al. 1980). Die Co-EDTA-Kristalle können nach Bedarf in Aquadest. gelöst werden. Die Co-Konzentration des verwendeten Flüssigkeitsmarkersbetrug 11,5 g * l -1 .2.4.2 Cr-EDTA143,88 g CrCl 3 * 6 H 2 O und 201 g Na 2 EDTA * 2 H 2 O (Titriplex III) wurden getrenntin 1000 ml bzw. 1500 ml Aqua dest. durch Erwärmen gelöst. Die beiden Lösungenwurden zusammengebracht und ca. eine Stunde gekocht. Nach 10-15 Minutenerfolgt ein Farbumschlag der Lösung. Nach dem Abkühlen auf Zimmertemperaturwurde ein eventueller Überschuß an EDTA mit 5,88 g CaCl 2 * 2 H 2 O (40 mmol)gebunden und mit Aqua dest. auf 3000 ml aufgefüllt. 10N NaOH (ca. 110 ml)wurde für die Einstellung des pH-Wertes auf 6,0 verwendet (Binnerts et al. 1968).Die Cr-Konzentration der Cr-EDTA-Lösung betrug 9 g * l -1 .2.4.3 Mit Chrom markiertes HeuDas getrocknete Heu wurde mit einer Mühle (Retsch Mühle SM1, Haan,Deutschland) zerkleinert (< 2 mm Partikelgröße). Zur besseren Bindung desMarkers an die Fasern wurden die löslichen Bestandteile des Heus 4 Stunden beiZimmertemperatur mit Natrium-lauryl-sulfat (20 g * l -1 ) gelöst. Über einem Sieb (1mm Porengröße) wurden die Partikel mit Wasser und Aceton gewaschen undanschließend bei 65 °C im Trockenschrank (Memmert UM 600, Kl.1, Schwabach,Deutschland) getrocknet.Die Markierung der Partikel erfolgte 24 Stunden bei 100 °C in Na 2 Cr 2 O 7 -Lösung,die ein Cr-Äquivalent von 13 % des Partikelgewichtes hat (ca. 33 g Na 2 Cr 2 O 7 für100 g Partikel). Das Gefäß wurde dabei mit Aluminiumfolie abgedeckt.Anschließend wurden die Partikel über einem Sieb (1 mm Porengröße) mitWasser gewaschen, mit Wasser bedeckt und mit Ascorbinsäure (50 % desPartikelgewichtes) eine Stunde inkubiert. Zum Entfernen des überschüssigenMarkers wurden die Partikel erneut mit Wasser gewaschen und bei 65 °C getrocknet(Udén et al. 1980). Die Cr-Konzentration des Cr-Heus betrug 70 mg * g -1 TS.24