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08.04.2015 Aufrufe

Methodenumstellung Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese (bisheriges Verfahren) auf die Kapillarelektrophorese Capillarys 2 (neues Verfahren) zum 18.03.2013 Bei der herkömmlichen Elektrophorese werden die Serumproteine getrennt, indem sie auf auf einem Trägermaterial (Zelluloseazetatfolie) einem elektrischen Feld ausgesetzt werden. Dabei finden sich in den einzelnen Fraktionen ein oder mehrere Proteine (Tabelle). Bei der Kapillarelektrophorese durchläuft das Serum eine mit Puffer gefüllte Kapillare, in der es aufgetrennt wird. Am kathodischen Ende der Kapillare werden die im zeitlichen Abstand vorbeikommenden Proteine im UV-Licht detektiert. Aufgrund der verbesserten Trennleistung kann die Zusammensetzung der einzelnen Fraktionen beim Vergleich Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese versus Kapillarelektrophorese variieren, auch weil einzelne Serumproteine in anderen Fraktionen abgebildet werden (Tabelle und Abbildung). Fraktion Alt (Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese) Neu (Kapillarelektrophorese) ______________________________________________________________________________ Albumin Präalbumin Präalbumin Albumin Albumin α-1-Lipoprotein (HDL) Prä-β-Lipoprotein (VLDL) β-Lipoprotein (LDL) Alpha-1 Saures α-1-Glykoprotein Saures α-1-Glykoprotein α-1-Antitrypsin α-1-Antitrypsin α-1-Lipoprotein (HDL) Alpha-2 α-2-Makroglobulin α-2-Makroglobulin Haptoglobin Haptoglobin Prä-β-Lipoprotein (VLDL) Beta-1 Transferrin Transferrin β-Lipoprotein (LDL) Hämopexin Komplement Beta-2 C3-Komplement C4-Komplement CRP Immunglobuline Gamma Immunglobuline Immunglobuline Der größte, für Sie sichtbare Unterschied zwischen der Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese und der Kapillarelektrophorese stellt sich in der Beta-Fraktion dar. Aufgrund der verbesserten Trennleistung der Kapillarelektrophorese, ist diese im Normalfall grundsätzlich zweigipflig (β-1 und β-2- Fraktion). In der Konzentrationsverteilung werden beide Fraktionen jedoch zusammengefasst. Extragradienten können wie bisher auch in diesem Bereich liegen und stellen sich dann entweder als weitere (dritte) Fraktion oder als Erhöhung der β-1 und/oder β-2-Fraktion dar.

Methodenumstellung<br />

Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese (bisheriges Verfahren) auf die<br />

Kapillarelektrophorese Capillarys 2 (neues Verfahren) <strong>zum</strong> 18.03.2013<br />

Bei der herkömmlichen Elektrophorese werden die Serumproteine getrennt, indem sie auf auf<br />

einem Trägermaterial (Zelluloseazetatfolie) einem elektrischen Feld ausgesetzt werden. Dabei<br />

<strong>finden</strong> sich in den einzelnen Fraktionen ein oder mehrere Proteine (Tabelle).<br />

Bei der Kapillarelektrophorese durchläuft das Serum eine mit Puffer gefüllte Kapillare, in der es<br />

aufgetrennt wird. Am kathodischen Ende der Kapillare werden die im zeitlichen Abstand vorbeikommenden<br />

Proteine im UV-Licht detektiert.<br />

Aufgrund der verbesserten Trennleistung kann die Zusammensetzung der einzelnen Fraktionen<br />

beim Vergleich Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese versus Kapillarelektrophorese variieren, auch<br />

weil einzelne Serumproteine in anderen Fraktionen abgebildet werden (Tabelle und Abbildung).<br />

Fraktion Alt (Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese) Neu (Kapillarelektrophorese)<br />

______________________________________________________________________________<br />

Albumin Präalbumin Präalbumin<br />

Albumin<br />

Albumin<br />

α-1-Lipoprotein (HDL)<br />

Prä-β-Lipoprotein (VLDL)<br />

β-Lipoprotein (LDL)<br />

Alpha-1 Saures α-1-Glykoprotein Saures α-1-Glykoprotein<br />

α-1-Antitrypsin<br />

α-1-Antitrypsin<br />

α-1-Lipoprotein (HDL)<br />

Alpha-2 α-2-Makroglobulin α-2-Makroglobulin<br />

Haptoglobin<br />

Haptoglobin<br />

Prä-β-Lipoprotein (VLDL)<br />

Beta-1 Transferrin Transferrin<br />

β-Lipoprotein (LDL)<br />

Hämopexin<br />

Komplement<br />

Beta-2<br />

C3-Komplement<br />

C4-Komplement<br />

CRP<br />

Immunglobuline<br />

Gamma Immunglobuline Immunglobuline<br />

Der größte, für <strong>Sie</strong> sichtbare Unterschied zwischen der Zelluloseazetatfolien-Elektrophorese und<br />

der Kapillarelektrophorese stellt sich in der Beta-Fraktion dar. Aufgrund der verbesserten Trennleistung<br />

der Kapillarelektrophorese, ist diese im Normalfall grundsätzlich zweigipflig (β-1 und β-2-<br />

Fraktion). In der Konzentrationsverteilung werden beide Fraktionen jedoch zusammengefasst.<br />

Extragradienten können wie bisher auch in diesem Bereich liegen und stellen sich dann entweder<br />

als weitere (dritte) Fraktion oder als Erhöhung der β-1 und/oder β-2-Fraktion dar.


Die Sensitivität für Veränderungen in einzelnen Fraktionen ist deutlich gesteigert, wobei speziell<br />

pathologische Erscheinungen deutlicher detektiert werden, z.B. oligoklonale Bandenmuster bei<br />

Infektionen oder M-Gradienten bei monoklonalen Gammopathien.<br />

Wie bisher sollte im Fall eines Extragradienten eine Immunfixations-Elektrophorese zur<br />

Bestätigung einer monoklonalen Gammopathie angeschlossen werden.<br />

Auf die u.g. leicht geänderten Referenzwerte sei ausdrücklich verwiesen:<br />

Fraktion Kapillar- Zelluloseazetatfolien-<br />

Elektrophorese (neu)<br />

Elektrophorese (alt)<br />

__________________________________________________________________________<br />

Albumin 53,1 - 66,5 59,9 - 70,6<br />

α-1-Globulin 3,2 - 5,7 2,1 - 4,4<br />

α-2-Globulin 7,5 - 12,5 5,2 - 9,7<br />

β-1-Globulin 5,2 - 8,2 -<br />

β-2-Globulin 3,4 - 6,6 -<br />

∑ β-Globulin 9,0 - 13,7 7,3 - 12,2<br />

γ-Globulin 10,1 - 19,8 11,2 - 19,9<br />

2.5 - 97.5 Perzentilen für gesunde Erwachsene im Vergleich beider Verfahren (in rel. %)<br />

Referenzbereiche für Kinder: siehe Befundbericht.<br />

Literatur: Bossuyt X Advances in serum protein electrophoresis, Adv Clin Chem, 2006, 42:43-80<br />

Persönliche Mitteilungen, MHH, Institut für Klinische Chemie, Prof. Dr. Brand<br />

Referenzbereichermittlung Fa. Sebia<br />

Stand: März 2013

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