Arbeitsanleitung - Milenia Biotec GmbH

CRP
Lateral Flow Immunoassay for semi quantitative measurement
of human C-reactive protein (CRP) in whole blood and serum;
interpretation by the Milenia ® POCScan Reader
English: Page 1-6
Lateralfluss-Immunoassay zur semiquantitativen
Bestimmung von humanem C-reaktivem Protein (CRP)
in Vollblut und Serum;
Auswertung mit dem Milenia ® POCScan Reader
Deutsch: Seite 7-12
REF:
MQLRP 1
30
Milenia Biotec GmbH
Versailler Str. 1
D-35394 Gießen
Germany
Tel.: +49-641-94 8883-0
Fax: +49-641-94 8883-80
E-mail: info@milenia-biotec.de
http://www.milenia-biotec.de
MQLRP / B / 2012-06-20

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Explanation of Symbols
Symbols (E)
Symbole (D)
Explanation
Erklärung
Symbols (E)
Symbole (D)
Explanation
Erklärung
Use by
Verwendbar bis
Contains sufficient for
Inhalt ausreichend für
In vitro diagnostic medical device
In-vitro Diagnostika
Manufacturer
Hersteller
Batch code
Chargenbezeichnung
For IVD performance
evaluation only
Nur zur IVD
Leistungsbewertung
REF
Catalogue number
Katalognummer
Consult Instructions for
use
Gebrauchsanweisung
beachten
Storage conditions
Lagerungsbedingungen
Consult attended
documents
Begleitdokumente
beachten
Milenia Biotec, Versailler Straße 1, D-35394 Gießen
Milenia QuickLine CRP (MQLRP)

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Materials Provided,- Storage and Stability
Preparation Storage at Shelf life
Components Cat.-No. Content
CRP Test Unit:
MQSRP
s
30 ready to use 2 - 8 °C
membrane coated with
Use
monoclonal (mouse) anti-hCRP
immediately
antibody; monoclonal (mouse)
after opening
anti-hCRP antibody conjugated
the foil pouch!
to gold particles
CRP/ hsCRP Chase Buffer:
PBS-Buffer, pH 7.4
This bag contains
30 Transfer pipettes
10 µL, disposables
Certificate of Analysis
MQCBC
1 vial
with 3 ml
(yellow
cap)
in the closed
foil pouch until
expiration date
ready to use 2 - 8 °C until expiration
date
MQP1030 30 see procedure p.5 until expiration
date
CoA-
MQLRP
Material Safety Data Sheets are available on request (look as well www.milenia-biotec.de).
Intended Use
1
• For in vitro diagnostic use.
• Milenia ® QuickLine CPR is designed for semi quantitative measurement of human CRP in whole blood and
serum
Materials Required But Not Supplied
Pipet and tips: 5 µL (serum samples)
Specimen Collection and Preparation
Whole blood: capillary blood, venous blood, or serum.
Avoid hemolysis; separate serum from blood cells within two hours.
Whole Blood: avoid blood from clotting e.g with anticoagulants like heparin, EDTA; no citrate.
Volume Required
Whole blood: 10 µL
Serum: 5 µL
Warnings and Precautions
• Read these instructions and the Milenia ® POCScan Reader Manual carefully before performing the
test. Follow them step by step!
• Store reagents at 2 - 8° C!
• Do not use the kit after expiration date!
• Do not use test unit if foil pouche is damaged!
• Protect test units from moisture!
• Compare batch code of your kit and the given batch code in your reader; if necessary: change batch
code and parameters. (s. Milenia ® POCScan Reader Manual –‘Enter Test Parameters’)
• Do not interchange components of packages of different batch codes!
• All samples, used units, pipettes, tips, and other contaminated material should be handled carefully
and as potentially infectious.
• For professional users.
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Milenia QuickLine CRP (MQLRP)

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Summary and Explanation
Being an acute phase protein, C-reaktive protein (CRP) is mainly synthesized in the liver. However, recent
research has shown that the inflammatory protein is also produced in other tissues such as vascular smooth
muscle cells and adipocytes. The expression of CRP is particularly increased in pathologically altered vessels.
The CRP serum level was originally determined to detect and monitor acute inflammation. The value may
increase up to 1000fold under acute inflammatory conditions.
Method and Test Principle
The Milenia ® QuickLine CRP test is a lateral flow immunoassay designed for semi quantitative measurement
of human CRP in capillary blood, venous blood, or serum.
The sample is pipetted into the sample application port.
The CRP in patients’ sample binds first to a monoclonal anti-CRP antibody that is conjugated to gold particles.
The CRP-loaded gold particles diffuse through the membrane and pass Test line T. There, a monoclonal CRP
specific antibody is coated on the membrane. At this place the CRP-gold-particels were bound specifically and
become visible as Test line T. The color intensity of the Test line is directly proportional to the concentration of
CRP in the sample. The intensity increases during incubation time. Excess gold conjugate diffuses further over
the test membran. Conjugat-specific antibodies that applied onto the membrane are functioning as Control line
(C). Here the residual gold conjugate is captured and forms a well visible line during the incubation time.
Increasing or decreasing colour’s intensity of the Control line can not be used for any interpretation.
The test unit must be evaluated colourimetrically with the Milenia ® POCScan Reader.
The result displayed on the reader is calculated according to a stored standard curve.
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Test Procedure
Preparation:
Allow test unit and chase buffer to come to room temperature (18 – 28 °C) before opening!
Never store test units at room temperature! Use test units immediately after opening!
Compare batch code on the outerbox label and given batch code at Milenia ® POCScan Reader if
necessary enter new batch code and parameters. (see Milenia ® POCScan Reader Manual, p. 12/13)
Consult attended documents: Certificat of Analysis (CoA-MQLRP) - batch code specific.
Capillary blood collection:
a) Hold transfer pipet horizontally into the blood drop without pushing the bulb.
The blood is filled in automatically by capillarity-up to the black mark, equivalent to 10 µL.
b) To apply the sample into the sample application port of the test unit squeeze pipet’s bulb to empty
it. Do this in a timely manner but not too fast.
Avoid blood clotting or air bubbles. (Risk of false results)
Steps
1.
Pipet 10 µL whole blood or 5 µL serum into the sample application port
of the test unit.
2.
Add 2 drops chase buffer
Note: Do not contaminat the vial with sample material!
3.
4.
Incubation
10 minutes at room temperature (18 - 28 °C)
Put test unit in the drawer.
Close drawer!
Start
SCAN
- Mode, SCAN IN PROGRESS:
Scan
Result calculation
5. Result is displayed.
Scan Mode
CRP: 10 - 20 mg/l
Next test Delete Print
If result is INVALID check described items on flyer:
“Notice INVALID/ A / 2009-10-16
For enquiries or error messages, please contact your local distributor or
Customer Service at Milenia Biotec GmbH.
E mail: cwillsch@milenia-biotec.de
The Milenia ® POCScan Reader manual can be downloaded from the
website www.milenia-biotec.de
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Function Control
In any case, the Control line (C) has to appear!
It is only used as functional control and can not be used for the interpretation of the test line.
If the control line is not detectable after 10 minutes incubation time, the result is invalid!
The analysis has to be repeated with a new test unit!
Valid results
Invalid results
ID
T
C
ID
T
C
ID
T
C
ID
T
C
Expected Values
During measurement the firmware controls validity of the results. If the test is not valid, no test result will be
shown (see above ‘Functional Control’).
Results should be verified concerning the entire clinical status of the patient. Additionally every decision for
therapy should be taken individually.
Performance Characteristics
Sample material:
Whole blood like capillary blood, venous blood (heparin, EDTA, no citrate),
or serum
Incubation time:
Normal range:
Measurement ranges:
Sensitivity:
Specificity:
Calibration
10 minutes at room temperature (18 - 28 °C)

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CRP
Lateral Flow Immunoassay for semi quantitative measurement
of human C-reactive protein (CRP) in whole blood and serum;
interpretation by the Milenia® POCScan Reader
English: Page 1-6
Lateralfluss-Immunoassay zur semiquantitativen
Bestimmung von humanem C-reaktivem Protein (CRP)
in Vollblut und Serum;
Auswertung mit dem Milenia® POCScan Reader
Deutsch: Seite 7-12
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Erklärung der Symbole
Symbols (E)
Symbole (D)
Explanation
Erklärung
Symbols (E)
Symbole (D)
Explanation
Erklärung
Use by
Verwendbar bis
Contains sufficient for
Inhalt ausreichend für
In vitro diagnostic medical device
In-vitro Diagnostika
Manufacturer
Hersteller
Batch code
Chargenbezeichnung
For IVD performance
evaluation only
Nur zur IVD
Leistungsbewertung
REF
Catalogue number
Katalognummer
Consult Instructions for
use
Gebrauchsanweisung
beachten
Storage conditions
Lagerungsbedingungen
Consult attended
documents
Begleitdokumente
beachten
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Kitbestandteile, Lagerung und Stabilität
Komponenten Art.-Nr. Inhalt Vorbereitung Lagerung bei Haltbarkeit
CRP Test-Einheit
(CRP Test Unit):
Membran-beschichtet mit
monoklonalem (Maus) antihCRP
Antikörper; monoklonaler
(Maus) anti-hCRP
Antikörper im Goldkonjugat
Laufpuffer
(CRP/ hsCRP Chase
Buffer):
PBS-Puffer, pH 7,4
Transferpipetten (This bag
contains 30 Transfer
pipettes 10 µL), Einweg
MQSRP 30
Stück
MQCBC
1 Fl. mit
3 ml
(gelber
Deckel)
MQP1030 30
Stück
gebrauchsfertig 2 - 8 °C
im
verschlossenen
Plastikbeutel
im
verschlossenen
Plastikbeutel bis
zum Verfallsdatum
gebrauchsfertig 2 - 8 °C bis zum Verfallsdatum
Bedienung siehe
Testdurchführung
Seite 11
bis zum Verfallsdatum
Analysen-Zertifikat
CoA- 1
(Certificate of Analysis) MQLRP
Sicherheitsdatenblätter sind auf Anfrage erhältlich (siehe auch unter www.milenia-biotec.de).
Zweckbestimmung
Für den in-vitro Diagnostik Gebrauch.
Milenia ® QuickLine CRP ist für die semiquantitative Messung von humanem CRP in Vollblut oder Serum
entwickelt.
Nicht im Lieferumfang enthaltenes Material
Pipette und Pipettenspitzen: 5 µl (Serum).
Probenentnahme und -vorbereitung
Vollblut: Kapillarblut, venösem Blut oder Serum
Hämolyse vermeiden; Serum innerhalb von 2 Stunden von den Blutzellen trennen.
Vollblut: Blutgerinnung vermeiden, z.B. durch Zugabe von Antikoagulantien wie Heparin, EDTA; kein Citrat.
Benötigtes Probenvolumen
Vollblut: 10 µl
Serum: 5 µl
Hinweise und Vorsichtsmaßnahmen
• Diese Gebrauchsanweisung und das Milenia ® POCScan Handbuch vor der Testdurchführung
aufmerksam lesen. Arbeitsschritte beachten!
• Reagenzien bei 2 - 8° C lagern!
• Kit nicht nach dem Verfallsdatum verwenden!
• Die Testeinheiten nicht verwenden, falls der Folienbeutel beschädigt ist!
• Die Testeinheit vor Feuchtigkeit schützen!
• Vergleichen der Chargenbezeichnung und der eingegebenen Chargenbezeichnung im Reader, falls
nötig: Ändern der Chargenbezeichnung und der Parameter. (Milenia ® POCScan Handbuch,
„Eingabe der Testparameter“)
• Keine Komponenten aus Testpackungen verschiedener Chargen verwenden.
• Alle Proben, Testeinheiten, Pipetten, Pipettenspitzen und anderes kontaminiertes Material sollten
vorsichtig und als potenziell inkektiös behandelt werden.
• Für Fachpersonal.
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Zusammenfassung / Anwendungsbereich
Als Akute-Phase-Protein wird C-reaktiven Protein (CRP) hauptsächlich in der Leber synthetisiert. Neuere
Forschungsergebnisse konnten aber auch in anderen Geweben – zum Beispiel in den glatten
Gefäßmuskelzellen der Koronararterien und in den Adipozyten – eine Produktion des Entzündungsproteins
feststellen. Insbesondere in pathologisch veränderten Gefäßen ist die Expression von CRP erhöht.
Ursprünglich wurde der CRP-Serumspiegel bestimmt, um eine akute Entzündung nachzuweisen und zu
überwachen.
Methode und Testprinzip
Der Milenia ® QuickLine CRP Test ist ein Lateralfluss-Immunoassay zur semiquantitativen Bestimmung von
humanem CRP in Kapillarblut, venösem Blut oder Serum.
Die Probe wird in den Probenauftrag der Testeinheit pipettiert.
Das CRP der Patientenprobe bindet zuerst an einen monoklonalen anti-CRP Antikörper, der an Goldpartikel
konjugiert ist. Die mit CRP beladenen Goldpartikel diffundieren über die Membran und passieren die Testlinie
(T). Dort ist ein monoklonaler CRP-spezifischer Antikörper an die Membran gebunden. An dieser Stelle
werden die CRP-Goldpartikel spezifisch gebunden und als Testlinie sichtbar. Die Farbintensität der Testlinie
ist direkt proportional zur CRP-Konzentration der Probe. Die Intensität nimmt während der Inkubationszeit zu.
Überschüssiges Goldkonjugat diffundiert weiter über die Testmembran. Die Konjugat-spezifischen Antikörper,
aufgebracht auf der Membran, dienen als Kontrolllinie (C). Sie fangen das restliche Gold-Konjugat ab und
bilden innerhalb der Inkubationszeit eine gut sichtbare Linie. Anstieg oder Abfall der Farbintensität der
Kontrolllinie kann nicht für eine Interpretation herangezogen werden.
Die Testeinheit wird mit dem Milenia ® POCScan Reader kolorimetrisch ausgewertet.
Die angezeigten Messwerte wurden in Übereinstimmung mit einer gespeicherten Standardkurve berechnet.
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Testdurchführung
Vorbereitung
Testeinheit und Laufpuffer vor dem Öffnen auf Raumtemperatur (18 – 28 °C) bringen!
Testeinheit niemals bei Raumtemperatur lagern! Testeinheit unmittelbar nach dem Öffnen
verwenden!
Chargenbezeichnung auf dem Außenettiket und eingegebene Chargenbezeichnung im
Milenia ® POCScan Reader vergleichen – falls nötig, neue Charge und Paramenter eingeben.
(Milenia ® POCScan Reader Handbuch, S. 11-12)
Begleitdokumente beachten: Analysenzertifikat (CoA-MQLRP) – Chargenspezifisch!
Kapillarblutentnahme
a. Transferpipette horizontal in den Bluttropfen halten, ohne auf den Kolben zu drücken. Das Blut fließt
durch Kapillarkräfte bis zur schwarzen Markierung, Äquivalent für 10 µl.
b. Um die Probe in den Probenauftrag aufzubringen, muss der Kolben gedrückt werden, bis die Pipette
vollständig entleert ist. Dies ist zügig, aber nicht zu schnell durchzuführen.
Blutgerinnsel und Luftblasen sind zu vermeiden (Gefahr falscher Ergebnisse).
1.
Schritte
10 µl Patientenblut oder 5 µl Serum in den Probenauftrag der
Testeinheit pipettieren.
2.
2 Tropfen Laufpuffer zugeben.
Hinweis: Eine Kontamination der Flasche mit Probenmaterial vermeiden.
3.
4.
Inkubation
10 Minuten bei Raumtemperatur (18 - 28 °C)
Testeinheit in die Schublade legen.
Schublade schließen.
SCAN
Modus starten
Scan
Messwert Berechnung
5. Messwert wird angezeigt.
Scan Mode
Liegt ein „INVALID“ Messwert vor, überprüfen Sie die beschriebenen
Punkte auf dem Flyer:
CRP: 10 - 20 mg/l
„Hinweis INVALID/A/2009-08-12“
Für Anfragen oder Fehlermeldungen wenden Sie sich bitte an den
Customer Service der Milenia Biotec GmbH.
E-mail: cwillsch@milenia-biotec.de
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Das Handbuch kann von der Website www.milenia-biotec.de
heruntergeladen werden.
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Funktionskontrolle
Die Kontroll-Linie (C) muss immer sichtbar werden!
Sie dient nur als Funktionskontrolle und kann nicht zur Beurteilung der Farbintensität der Testbande
herangezogen werden. Wenn die Kontroll-Linie nach 10 Minuten Inkubationszeit nicht sichtbar ist, ist das
Ergebnis ungültig! Der Test muss mit einer neuen Testeinheit wiederholt werden!
Gültige Ergebnisse
Ungültige Ergebnisse
ID
T
C
ID
T
C
ID
T
C
ID
T
C
Erwartete Ergebnisse
Während der Messung wird von der Firmware überprüft, ob der Test gültig ist. Wenn der Test ungültig ist, wird
kein Messwert angegeben (siehe „Funktionskontrolle“).
Resultate sollten anhand der gesamten Klinik des Patienten verifiziert werden. Darüber hinaus sollte jede
Therapie-Entscheidung individuell getroffen werden.
Testcharakteristika
Probenmaterial:
Inkubationszeit:
Normalbereich:
Messbereich:
Sensitivität:
Spezifität:
Kalibration:
Vollblut wie z.B. Kapillarblut, venöses Blut (Heparin, EDTA, kein Citrat)
oder Serum
10 Minuten bei Raumtemperatur (18 – 28 °C)