Handbuch der Nanoanalytik Steiermark 2005 - lamp.tugraz.at

M21: Negativkontrastierung als Diagnostik
zwei bis fünf Zentimetern eine Wechselspannung
von 500 bis 1000 Volt angelegt. Dadurch werden
die Restmoleküle in der Kammer ionisiert. Diese
Radikale werden zur Anode hin beschleunigt, wo
die Netzchen (mit Trägerfilm) liegen. Dadurch wird
auf die Filmoberfläche eine Ladung aufgebracht, die
sie für kurze Zeit an der Luft hydrophil werden lässt.
Derart behandelte Netzchen sollten möglichst bald
verwendet werden, da die aufgebrachte Ladung
exponentiell wieder abnimmt.
Nun wird ein befilmtes Kupfernetzchen auf einen
Tropfen Suspension gelegt (s. Abb. 3). Nach
einer Adsorptionszeit von etwa einer Minute wird
die Suspension mit Filterpapier weggesaugt. Die
Filmoberfläche wird mit Wasser gewaschen, um
eventuell in der Suspension enthaltene Salze, die
auskristallisieren könnten, zu entfernen. Es wird ein
Tropfen Wasser auf die Oberfläche gebracht und
mit Filterpapier wieder weggesaugt. Dies kann bei
Bedarf mehrmals gemacht werden. Danach wird
ein Tropfen Schwermetallsalz-Lösung auf die Filmoberfläche
gebracht und nach ca. 10 Sekunden
mit Filterpapier wieder weggesaugt. Dies macht
man ein bis zweimal. Dann lässt man den Rest
des Schwermetallfilms auf dem Präparat an der
Luft trocknen. Dies ist nun die eigentliche Färbung.
Das Präparat ist jetzt bereit für das Elektronenmikroskop.
Abbildung 3:
Elisabeth Ingolic
Technische Universität Graz
Forschungsinstitut für Elektronenmikroskopie und
Feinstrukturforschung
und Zentrum für Elektronenmikroskopie Graz
Ausführung der Negativfärbung in
schematischer Darstellung.
Methoden:
M2 | M26 | M44
Lösungen: —
Abbildung 2:
Links: Schematische Darstellung
der Negativkontrastierung. Rechts:
Negativkontrastierung eines abnormen
Lipoproteins (25 nm).
Institute:
Kontakte:
I4
K15
Adenoviren | Negativkontrastierung | Phosphorwolframsäure | Probenpräparation | Rotaviren
Transmissionselektronenmikroskopie | Uranylacetat
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Handbuch der Nanoanalytik Steiermark 2005