3-Seminar-Enzyme - wilmnet.de
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o Vorgehen beim indirekten Verfahren (Antikörper-Messung)<br />
a) man benötigt eine Antigen-bela<strong>de</strong>ne Nachweisplatte<br />
b) Zugabe <strong>de</strong>s Serums und Adsorption <strong>de</strong>r Antikörper am Antigen<br />
c) Zugabe eines enzymgebun<strong>de</strong>nen Antikörpers gegen <strong>de</strong>n ersten<br />
Antikörper<br />
d) Zugabe eines Substrates, welches durch das Enzym umgebaut wird in<br />
einen photometrisch messbaren Stoff<br />
e) Messung <strong>de</strong>s Stoffes und somit indirekter Nachweis <strong>de</strong>s ersten<br />
Antikörpers<br />
o Vorgehen bei <strong>de</strong>r Antigen-Messung<br />
a) man benötigt eine mit Antikörpern-bela<strong>de</strong>ne Platte<br />
b) Zugabe <strong>de</strong>r Testlösung mit Antigen<br />
c) Zugabe eines enzymgebun<strong>de</strong>nen spezifischen Antikörpers auf das<br />
Antigen<br />
d) Zugabe eines Substrates, welches durch das Enzym in einen<br />
photometrisch messbaren Stoff umgebaut wird<br />
e) Die Intensität <strong>de</strong>r Farbreaktion ist direkt proportional zur<br />
Antigenkonzentration.<br />
o Vorgehen bei <strong>de</strong>r Konkurrenzmetho<strong>de</strong><br />
a) man benötigt eine mit Antikörpern-bela<strong>de</strong>ne Platte<br />
b) Zugabe von enzymgebun<strong>de</strong>nen Antigen und einer bestimmten Menge<br />
an unbekannter Konzentration <strong>de</strong>s Antigens<br />
c) Zugabe <strong>de</strong>s Substrates<br />
d) Die Intensität <strong>de</strong>r Farbreaktion wird jetzt indirekt proportional zur<br />
Antigenmenge sein.<br />
ALAT & ASAT<br />
- Alanin-Aminotransferase = GPT (Glutamat-Pyruvat-Transaminase)<br />
- Aspartat-Aminotransferase = GOT (Glutamat-Oxalacetat-Transferase)<br />
- sind bei<strong>de</strong> spezifisch für Erkrankungen <strong>de</strong>r Leber<br />
- HWZ: ASAT ~17h / ALAT ~47h<br />
- Im Verlauf kann <strong>de</strong>r De-Ritis-Quotient (ASAT/ALAT) eine Aussage über die<br />
schwerer <strong>de</strong>r Erkrankung geben<br />
- Quotient > 1 = schwere o<strong>de</strong>r chronische Schädigung<br />
- Quotient < 1 = Abklingen <strong>de</strong>r Erkrankung<br />
Anhang:<br />
- Säure-Basen-Theorie von Broensted<br />
o Säuren sind Protonendonatoren Teilchen die Wasserstoffionen abgeben<br />
o Basen sind Protonenakzeptoren Teilchen die Wasserstoffionen aufnehmen<br />
o die durch die Abspaltung eines Protons entstehen<strong>de</strong> Base bezeichnet man als<br />
korrespondieren<strong>de</strong> o<strong>de</strong>r konjugierte Base<br />
- Säure-Basen-Theorie nach Lewis<br />
o Säuren verfügen über Elektronenlücken<br />
sie sind Elektronenpaarakzeptoren<br />
o Basen haben ein freies Elektronenpaar<br />
sie sind Elektronenpaardonatoren<br />
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