HPLC-Analytik Glutathion - bei Immundiagnostik
HPLC-Analytik Glutathion - bei Immundiagnostik HPLC-Analytik Glutathion - bei Immundiagnostik
HPLC-Analytik Glutathion Chromatographische Bedingungen Säulenmaterial: MZ Inertsil ODS-2; 5 µm MZ PerfectBond ODS-2; 5 µm Säulendimension: Bischoff Prontosil Eurobond; 5 µm 125 mm x 4 mm Fluss: 0,75 – 1,0 ml/min Detektion: Fluoreszensdetektion Exzitation: 385 nm Emission: 515 nm Temperatur: 30 °C Auftragsvolumen: 20 µl Laufzeit: ca. 10 Minuten Wir empfehlen die Verwendung einer Vorsäule um die Säulenhaltbarkeit zu verlängern. 10. BEHANDLUNG DER TRENNSÄULE Nach der Analyse sollte die Trennsäule mit ca. 30 ml Aqua bidest bei einem Fluss von 1 ml/min gespült werden. Anschließend wird die Säule in 50% Methanol in Wasser gelagert (ca. 30 ml, Fluss 0,7 ml/min). Zur Wiederinbetriebnahme wird das ganze System mit ca. 30 ml Laufmittel äquilibriert. 9
HPLC-Analytik Glutathion 11. AUSWERTUNG Berechnung Glutathiongesamt Peakhöhe Probe x Konzentration des Kalibrators Peakhöhe Interner Standard der Probe Glutathionreduziert F = Konzentration Probe (nmol/l) = x F = Konzentration Probe Peakhöhe Interner Standard des Kalibrators Peakhöhe Kalibrator Peakhöhe Probe x Konzentration des Kalibrators* Peakhöhe Kalibrator (* siehe Etikett) 10
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<strong>HPLC</strong>-<strong>Analytik</strong> <strong>Glutathion</strong><br />
11. AUSWERTUNG<br />
Berechnung<br />
<strong>Glutathion</strong>gesamt<br />
Peakhöhe Probe x Konzentration des Kalibrators<br />
Peakhöhe Interner Standard der Probe<br />
<strong>Glutathion</strong>reduziert<br />
F =<br />
Konzentration Probe (nmol/l) =<br />
x F = Konzentration Probe<br />
Peakhöhe Interner Standard des Kalibrators<br />
Peakhöhe Kalibrator<br />
Peakhöhe Probe x Konzentration des Kalibrators*<br />
Peakhöhe Kalibrator<br />
(* siehe Etikett)<br />
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