AK- BWA Maschinelle Dekontamination - HOBART GmbH

Teil 8
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8.1.5. Auswertung
Nach Durchlaufen der BWA werden die
Prüfkörper unter aseptischen Kautelen
(z. B. je eine sterilisierte Pinzette pro
Prüfkörper) abgenommen, einer Sichtkontrolle
auf Rückstände der Prüfanschmutzung
unterzogen und in je
10 ml Phosphat-Puffer-Lösung (PBS)
ggf. mit Inaktivierungssubstanzen übertragen.
Zusammensetzung der
Phosphat-Puffer-Lösung (PBS)
Lösung A: 16 g NaCl;
0,4 g KCI;
0,4 g KH 2PO 4
in 1.600 ml aqua dest. lösen.
Lösung B: 0,2 g CaCl 2
in 200 ml aqua dest. lösen.
Lösung C: 0,2 g MgSO 4
in 200 ml aqua dest. lösen.
Die Lösungen A bis C sind getrennt zu
sterilisieren und nach vollständigem Erkalten
unter sterilen Bedingungen ggf.
unter Hinzufügen der Inaktivierungssubstanzen,
siehe oben, zu vermischen.
Die Ermittlung der geeigneten Inaktivierungssubstanzen
ist im Gutachten anzugeben.
Die Rückgewinnung der Testkeime erfolgt
durch das Ausschütteln der in
Reagenzgläser überführten Prüfkörper.
Das Ausschütteln erfolgt in Reagenzglasständern
auf Schüttelgeräten mit
einer Frequenz von ca. 500 min –1 während
mindestens 20 min. Anschließend
erfolgt die Keimzahlbestimmung aus
der Schüttelflüssigkeit. Das verwendete
Verfahren ist anzugeben.
Die Transportkontrollen werden parallel
dazu – jedoch ohne Behandlung in der
Dekontaminationsanlage – in gleicher
Art und Weise in 10 ml PBS übertragen
und ausgewertet.
Als Methoden zur Keimzahlbestimmung
sind zulässig:
� Verdünnungsreihe und Oberflächenkultur
� Spiralgerät
Ein geeigneter Nährboden (z. B. Kanamycin-Aesculin-Azid-Agar)
ist zu verwenden.
Methodik der Keimzahlbestimmung und
verwendete Nährlösungen und Nährböden
sind im Gutachten anzugeben.
Die Inkubation der beimpften Nährböden
erfolgt bei 36 ± 1°C über 48 h.
Die Keimreduktion ergibt sich aus
der Differenz zwischen der Zahl der
nachgewiesenen KBE der Testkeime an
den behandelten und dem Mittelwert
der drei unbehandelten Testkörper
(Transportkontrollen). Der Reduktionsfaktor
muss mindestens 5 lg Stufen betragen.
8.1.6. Prüfung der Dekontaminationsmittellösung
Zur mikrobiologischen Überprüfung der
Dekontaminationsmittellösung werden
jeweils Proben von 100 ml aus dem
Vorratsbehälter entnommen und zwar
einmal vor Beginn der Prüfung sowie
anschließend nach jeder Testcharge vor
Zugabe der Testanschmutzung.
Am Ende der Prüfung (d. h. nach der
letzten Testcharge) werden 1000 ml aus
dem Vorratsbehälter entnommen.
Die Proben werden unmittelbar nach
der Entnahme in das gleiche Volumen
doppelt konzentrierter CSL mit geeigneten
Inaktivierungssubstanzen übertragen
und dann sofort abgekühlt.
Die Bebrütung der Ansätze erfolgt bei
36 ± 1°C über 72 h.
Getrübte Kulturen werden auf geeigneten
Nährböden ausgestrichen. Diese
sind im Gutachten anzugeben.
Im untersuchten Volumen (100 bzw.
1000 ml) darf der Testkeim nicht nachweisbar
sein. Aussagen über die Begleitflora
sollten im Gutachten vermerkt
werden.
8.2. Prüfung nach Aufstellung
Alle Prüfungen nach Aufstellung sind
vom Betreiber zu veranlassen. Sie dienen
dem Nachweis, dass die BWA ent-