Untersuchung eines neuartigen Mechanismus der Aktivierung ...

Diskussion
Abbildung 5.1: Präzipitations-Kurve aus Antigen und Antikörper nach Heidelberger [aus 6]. Zu einer
fixen Menge Antikörper werden steigende Mengen Antigen zugesetzt und die Menge des resultierenden
Präzipitats bestimmt. Als Beispiel dafür gewählt, dass die Größe des Präzipitats abhängig ist vom Verhältnis der
Bindungspartner zueinander. Die in der Abbildung dargestellte Präzipitatbildung aus Antikörper und Antigen im
Äquivalenzbereich kann bei IgE und IPSE in keinem der untersuchten Mischungsverhältnisse nachgewiesen
werden. Daher kann eine Quervernetzung von IgE durch IPSE, wie hier am Beispiel von Antikörper durch
Antigen gezeigt, ausgeschlossen werden.
Zusammenfassend konnte weder mittels chemischer Quervernetzung noch mittels
Größenausschlusschromatographie die Ausbildung von großen Komplexen nachgewiesen
werden, die auf eine Quervernetzung von Immunglobulin durch IPSE schließen lassen. Somit
zeigen diese Experimente zwar eine Bindung von IPSE an Immunglobulin aber keine
Quervernetzung und bestätigen daher die Befunde aus Sandwich-Blot-Experimenten (s. 5.2;
Schramm, unveröffentlicht), Doppelimmunodiffusions-Experimenten (Blindow, 2004;
Wodrich, 2006) und Biacore-Analysen (Blindow, 2004). Darüber hinaus wurde gefunden,
dass die Bindung von IPSE an IgG bzw IgE in Lösung relativ schwach ist, mit IgG sogar so
schwach, dass sie mit Hilfe der Gelchromatographie nicht nachgewiesen werden kann.
Die exakte Stöchiometrie der Bindung zwischen IPSE und Immunglobulin konnte mit diesen
Experimenten noch nicht bestimmt werden. Allerdings weisen die Ergebnisse der
Größenausschlusschromatographie darauf hin, dass eine Bindung von mehr als einem aber
weniger als vier IPSE-Moleküle pro IgE möglich ist. Dieser Befund passt mit früheren
Biacore-Befunden von Blindow (2004) überein, die auf eine Bindung von zwei Molekülen
IPSE an ein Molekül Immunglobulin hinweisen (s. auch Einleitung 1.8).
86