Untersuchung eines neuartigen Mechanismus der Aktivierung ...

Diskussion
5.1 E. coli-IPSE bindet im Dot Blot mit unterschiedlicher Intensität an das
IgG-Gesamtmolekül und dessen Fab- und Fc-Fragmente
Immunglobulin-bindende Moleküle, wie die bereits erwähnten B-Zellsuperantigene aus
Bakterien, können sowohl Fab- als auch Fc-Fragmente von Immunglobulinen binden und
damit eine Aktivierung von Zellen auslösen. So zeigten Genovese et al. (2000), dass die
Oberflächenproteine Protein A, aus Staphylococcus aureus, und Protein L, aus
Peptostreptococcus magnus, durch Interaktion mit IgE, humane Herz-Mastzellen zur
Mediatorenfreisetzung aktivieren. Protein A bindet an die Fab-Region von einigen IgM, IgA,
IgG und IgE-Molekülen und an die IgG-Fc Region mit separaten Bindungsstellen
(Deisenhofer, 1981; Inganäs, 1981; Romagnani et al., 1982). Wie bereits in der Einleitung
erwähnt, zeigten frühere Biacore-Daten (Blindow, 2004), dass IPSE als Immunglobulinbindender
Faktor, wie ein B-Zellsuperantigen, ebenfalls sowohl an Fab- als auch an Fc-
Fragmente von IgG und IgE bindet. Dabei wurde gefunden, dass IgG-Fc schneller als IgG-
Fab an immobilisiertes E. coli-IPSE bindet, aber auch schneller wieder dissoziiert, was auf
eine niedrigere Bindungsaffinität hinweist, während für die Bindung von IgG-Fab an E. coli-
IPSE eine langsamere Dissoziationsrate gemessen wurde. Bei den Biacore-Versuchen wurde
E. coli-IPSE immobilisiert und lösliches IgG bzw. IgG-Fragmente als Liganden eingesetzt.
Um der natürlichen Situation (IgG Zell-ständig, IPSE in Lösung) näher zukommen, wurden
diese Bindungsstudien mit immobilisierten IgG, Fab- und Fc-Fragmenten und löslichem
E.coli-IPSE im Dot Blot wiederholt. Auch in dieser Anordnung konnten die Biacore-Daten
bestätigt werden. IPSE bindet mit unterschiedlicher Intensität an das IgG-Gesamtmolekül,
Fab- und Fc-Fragmente, wobei die Fc-Fragmente deutlich schwächer gebunden werden als
die Fab-Fragmente. Die stärkste Bindung zeigte sich an das Gesamtmolekül von IgG. Dieser
Befund ist ein Hinweis darauf, dass für eine „optimale“ Bindung von IPSE das
Gesamtmolekül IgG erforderlich ist, was die aus Biacore-Daten abgeleitete Hypothese von
Blindow (2004) (s. 1.8) unterstützt und besagt, dass ein Molekül IPSE gleichzeitig an den
Fab- und an den Fc-Teil des IgG-Moleküls bindet.
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