Untersuchung eines neuartigen Mechanismus der Aktivierung ...

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Ergebnisse A) IgE/HEK-IPSE 1:1 B) IgE/HEK-IPSE 1:4 C) IgE/HEK-IPSE 2:1 Abbildung 4.10: Silbergefärbte SDS-Gele zur Untersuchung der Fraktionen nach Auftrennung der IgE / HEK-IPSE-Gemische (1:1, 1:4, 2:1) mittels Superdex 200. A) Untersuchung der Fraktionen des 1:1- Gemisches. B) Untersuchung der Fraktionen des 1:4-Gemisches. C) Untersuchung der Fraktionen des 2:1- Gemisches. B1 – C2: Fraktionen. 62
Ergebnisse Wie schon vorher bei IgG wurde auch bei IgE die Komplexbildung mit Protein L im 1:1- Verhältnis untersucht. Da nur geringe Mengen an IgE zur Verfügung standen, wurden die Untersuchungen mit niedrigen Konzentrationen durchgeführt, sodass keine sichtbaren Präzipitate nachweisbar waren. Das Gemisch wurde nachträglich mit der Superdex 200 PC 3.2/30 aufgetrennt. A) B) Abbildung 4.11: Untersuchung der Komplexbildung von IgE und Protein L in Lösung mittels Superdex 200. IgE und Protein L wurden in Lösung 1:1 miteinander vermischt und nachträglich über eine Superdex 200- Säule aufgetrennt. A) Markerlauf. B) Proteinprofile von den Einzelmolekülen IgE (blaue Kurve) und Protein L (braune Kurve) und das Proteinprofil von dem IgE / Protein L-Gemisch (1:1) (rote Kurve). Auf Grund der kleinen Mengen war es hier nicht möglich die Fraktionen in einem Silbergel zu untersuchen. Abbildung 4.11 B zeigt das Proteinprofil der Einzelmoleküle IgE (blaue Kurve) und Protein L (braune Kurve) im Vergleich zu der Auftrennung des 1:1-Gemisches (rote Kurve). Der Peak von Protein L ist verschwunden und es hat sich stattdessen ein einheitlicher breiter Peak gebildet, was auf eine Bindung von IgE und Protein L hinweist. Zusätzlich hat sich der Peak stark nach links verschoben, was wiederum auf eine Bildung von größeren Komplexen hindeutet. Mit IgE und HEK-IPSE ist diese starke Verschiebung nach links nicht zu sehen. Auch mit IgG und Protein L ist diese starke Linksverschiebung und die Bildung eines einheitlichen Peaks nicht zu sehen gewesen. Es wurden aber hier vor dem Säulenlauf sichtbare Präzipitate und somit große Komplexe abzentrifugiert. 63
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Aus dem Forschungszentrum Borstel L
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Abkürzungsverzeichnis Abkürzungsv
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Zusammenfassung Zusammenfassung Die
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Einleitung 1 Einleitung Der Begriff
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Seite 109 und 110: Eigene Vorträge 7 Eigene Vorträge
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Seite 113: 10 Eidesstattliche Erklärung Hierm
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