Untersuchung eines neuartigen Mechanismus der Aktivierung ...

Ergebnisse
Abbildung 4.10 zeigt die Untersuchung der Fraktionen der einzelnen IgE / HEK-IPSE-
Gemische (1:1, 1:4, 2:1) in silbergefärbten SDS-Gelen. Bild A zeigt die Untersuchung des
1:1-Gemisches. Es ist zu erkennen, dass HEK-IPSE zusammen mit IgE in den Fraktionen B1
– B8 enthalten ist (IgE bei ca. 200 kDa und HEK-IPSE bei ca. 45 kDa) und somit eine
Bindung, wie schon aus dem Proteinprofil (Abbildung 4.9) vermutet, bestätigt ist. Zusätzlich
sind aber auch immer noch Banden von HEK-IPSE in den hinteren Fraktionen (B9 – B14) zu
erkennen, was auf einen Rest von nichtgebundenen HEK-IPSE-Molekülen schließen lässt.
Weiterhin sieht man aber auch in diesen Fraktionen noch schwach angefärbte Banden von
IgE. Dies ist vermutlich wieder durch Interaktionen mit der Säulenmatrix zu erklären, wobei
wenig IgE durch unspezifische Bindungen zurückgehalten wird und später zusammen mit
HEK-IPSE von der Säule gespült wird. Bild B zeigt die Untersuchung des 1:4-Gemisches.
Auch hier ist wieder die Bindung von HEK-IPSE an IgE bestätigt, beide Moleküle sind in den
Fraktionen B1 – B8 enthalten. Die kräftigere Bandenfärbung spricht dafür, dass etwas mehr
HEK-IPSE an IgE gebunden hat. Besonders in den Fraktionen B4 und B5 ist die Anfärbung
am stärksten, was darauf hindeutet, dass in diesem Bereich das meiste HEK-IPSE gebunden
hat. Daneben sind in den Fraktionen B11-B15, d.h. im Bereich des HEK-IPSE-Monomers, in
Übereinstimmung mit dem Proteinprofil sehr kräftige HEK-IPSE Banden zu sehen.
Zusätzlich treten in diesem Bereich auch wieder schwach angefärbte IgE-Banden auf. Bild C
zeigt die Untersuchung des 2:1-Gemisches. Hier sind ebenfalls wieder die Banden von HEK-
IPSE zusammen mit den IgE-Banden zu sehen, wobei hier die HEK-IPSE-Banden schwächer
angefärbt sind, was auf die weniger eingesetzte Menge zurückzuführen ist. Obwohl IgE hier
im 2:1-Verhältnis eingesetzt wurde, ist immer noch ungebundenes HEK-IPSE in den hinteren
Fraktionen zu erkennen, besonders in Fraktion C2.
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