Untersuchung eines neuartigen Mechanismus der Aktivierung ...

Ergebnisse
Abbildung 4.4: IgG-Fab wurde in einer Konzentrationsreihe (pmol/Dot) auf die Nitrozellulosemembran
gedottet. Erster Inkubationsschritt: E. coli-IPSE (50 pmol/ml; 500 pmol/ml), anti-
pmol/ml) als Positivkontrollen als oder TBST-Puffer als Negativkontrolle bzw. SAVAP-Kontrolle. Zweiter
Inkubationsschritt: biotinyliertes IgG-Fab (50 pmol/ml) oder TBST-Puffer (SAVAP-Kontrolle). Die Bindung
wurde über SAVAP nachgewiesen. Erster Streifen zeigt den Bindungsnachweis von E. coli-IPSE (50pmol/ml)
an IgG-Fab mit anti-IPSE-Antiserum (anti-IPSE) und AP-anti human IgG (Fc)-Antikörper (AP-anti-IgG).
In diesem Sandwich-Blot ist keine Eigenbindung von IgG-Fab in der Negativkontrolle zu
erkennen, im Gegensatz zu dem Sandwich-Blot mit IPSE (s. 4.2). Ebenso konnte aber auch
keine Quervernetzung von IgG-Fab durch E. coli-IPSE gezeigt werden, während durch
Protein L oder anti-
4.4 Chemische Quervernetzung
4.4.1 Bindungsuntersuchung von IgG und E. coli-IPSE
Nachdem die Fragestellung, ob IPSE zwei Moleküle IgG binden kann aufgrund der
Eigenbindung von IPSE im Sandwich-Blot nicht gezeigt werden konnte (s. 4.2), sollte in
diesem Versuch die Bindung von IgG und E. coli-IPSE durch chemische Quervernetzung mit
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