Untersuchung eines neuartigen Mechanismus der Aktivierung ...

Einleitung
et al., 2005) handelt es sich um ein Protein, das die Proliferation sowie Freisetzung von IFN-
-2, IL-4 und IL-5 aus CD4+-Zellen von infizierten CBA und C57BL/6 Mäusen stimuliert
und eine Rolle als T-Zell-Mitogen spielen soll.
Stripping-Experimente mit -gebundenes IgE von der
Oberfläche der Basophilen entfernt wurde, zeigten, dass die Basophilenaktivierung durch
IPSE/alpha-1 IgE-abhängig ist (Haisch et al., 2001). Sowohl Basophile als auch das IgE
stammten von nicht-infizierten Spendern. Dies deutet auf eine antigenunspezifische Bindung
von IPSE/alpha-1 hin. IPSE/alpha-1 besitzt eine hohe spezifische Aktivität: zur
Basophilenaktivierung reichen bereits Konzentrationen im unteren nanomolaren Bereich (20-
100 ng/ml) aus. Es konnte weiterhin gezeigt werden, dass neben der Bindung an humanes
IgE, IPSE/alpha-1 auch speziesübergreifend - mit geringerer Affinität - an IgG, IgM und IgA
bindet. IPSE/alpha-1 ist somit ein allgemein Immunglobulin-bindender Faktor (Blindow
2004). Weitere Untersuchungen bestätigten zusätzlich die Bindung an Fab- und Fc-Fragmente
sowie an Fab 2 -Fragmente von IgE und IgG (Blindow, 2004) . Wie unter 1.5 beschrieben
erfolgt der allgemein akzeptierte Mechanismus der Basophilenaktivierung durch eine
Quer -rezeptorgebundenem IgEs (Metzger, 1992). Da IPSE/alpha-1
unspezifisch an IgE bindet, kann eine antigenspezifische Quervernetzung ausgeschlossen
werden. Unspezifische Quervernetzungen über die Bindung an Zuckerseitenketten, wie bei
einem Lektin (Haas et al., 1999) oder über Multivalenz, wie bei einem B-Zellsuperantigen,
konnte ebenfalls ausgeschlossen werden. Es war bereits bekannt, dass die Aminosäuresequenz
von IPSE/alpha-1 keine Ähnlichkeiten zu bekannten tierischen oder pflanzlichen Lektinen
aufweist (Schramm et al., 2003). Zusätzlich konnte gezeigt werden, dass IPSE/alpha-1 auch
an deglykosyliertes IgG-Fc-Fragment bindet (Blindow, 2004). Weitere Untersuchungen
hinsichtlich der Quervernetzung von Immunglobulinen durch IPSE/alpha-1 mit verschiedenen
Sandwich-Experimente im Dot-Blot (Schramm, unveröffentlicht) oder im BIACORE
(Blindow, 2004) sowie Doppelimmunodiffusions-Experimente (Blindow, 2004; Wodrich,
2006) mit IgE und IgG zeigten, dass IPSE/alpha-1 Immunglobuline nicht quervernetzen kann
und Basophile daher mit großer Wahrscheinlichkeit nicht durch IgE-Quervernetzung, sondern
durch einen anderen Wirkungsmechanismus aktiviert. Bindungsstudien von IPSE/alpha-1 an
IgG, IgG-Fab und IgG-Fc mittels Biacore-Experimenten in der Arbeit von Silke Blindow
(2004) ergaben, dass immobilisiertes IPSE/alpha-1 in der Lage ist sowohl zwei Moleküle
IgG-Fab als auch zwei Moleküle IgG-Fc unabhängig voneinander zu binden, aber nur ein
Gesamtmolekül IgG, obwohl eine Bindung von zwei Molekülen möglich wäre. Eine
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