Herbsttagung Programm & Abstracts - Deutsche Gesellschaft für ...

Alternative und klassische Aktivierung primärer humaner Makrophagen – Ein
systembiologischer Ansatz
Bertrams Wilhelm 1,2 , Marsico Annalisa 3 , Schulz Christine 1,2 , Sittka Alexandra 1,2 , Du Bois Ilona 1,2 ,
Vingron Martin 3 , Suttorp Norbert 4 , Hippenstiel Stefan 4 , Schmeck Bernd 1,2
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FORSYS Partner Research Group “Systems Biology of Lung Inflammation”; 2 Molekulare
Pneumologie, Deutsches Zentrum für Lungenforschung, Philipps-Universität Marburg; 3 Max Planck
Institute for Molecular Genetics, Berlin; 4 Medizinische Klinik m.S. Infektiologie und Pneumologie,
Charité – Universitätsmedizin Berlin
Einleitung: Makrophagen sind auf Grund ihrer vielseitigen funktionalen Ausprägungen ein wichtiger
Aspekt in der Pathogenese der Lunge. Neben dem M1 Subtyp, induziert durch die sogenannte
klassische Makrophagenaktivierung, existiert auch der alternativ aktivierte M2 Subtyp, welcher u.a. in
der Sarkoidose und bei Tumorerkrankungen beschrieben ist. Die Rolle von microRNAs in der
Ausprägung (Polarisierung) dieser Makrophagen-Subtypen ist noch weitgehend unerforscht und soll in
dieser Studie adressiert werden.
Methoden: Das miRnom und das Transkriptom von unpolarisierten (M0) und polarisierten
Makrophagen (M1, M2) wurde mittels Array-Technologie bestimmt, und die gewonnenen Daten
wurden bioinformatisch korreliert. Durch Vorhersagealgorithmen gestützt wurden so putative
microRNA/mRNA Interaktionen identifiziert. Diese wurden durch Luciferase-basierte Reportersysteme
und Transfektionsexperimente bestätigt.
Ergebnisse: Mittels Luciferase-Reporterassay wurden die mRNAs für SH2B2, LAMP2, MRC1 und
erführende Experimente scheinen die Regulation von
SH2B2 und LAMP2 auf mRNA- bzw. Protein-Ebene zu belegen.
Diskussion: SH2B2 ist ein Scaffold Protein, das an der Signaltransduktion über Shc und Grb2
beteiligt ist. Seine Rolle in Makrophagen ist bisher nicht erforscht. In Analogie zu B-Zellen vermuten
wir einen Effekt auf die MAP-Kinase-Kaskaden über die Ras-GTPase und p38. Die microRNAvermittelte
Regulation von SH2B2 würde sich somit unter Anderem in der p38-Aktivität
niederschlagen.
LAMP2 ist ein lysosomales Strukturprotein. Seine Herunterregulation durch microRNAs könnte eine
verminderte Lysosomenstabilität zur Folge haben. Dies versuchen wir in Replikationsstudien mit
intrazellulären Bakterien (Legionella pneumophila) zu erforschen.
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