Ätherische Öle + - Pharmazie

Einführung PBIII
WS2012/13
Apotheker Andreas Marmann 1

• Dr.Abdessamad Debbab
Betreuer
• Phenolische Verbindungen, Polyketide
• Tel. 0211-81 15989 Abdessamad.Debbab@uni-duesseldorf.de
• Dr.Amal Hassan
• Alkaloide
• Tel. 0211 81-14173 Amal.Hassan@uni-duesseldorf.de
• Apothekerin Imke Form/ M.SC. Georgeos Daletos
• Herzglykoside, Saponine, Johanniskraut
• Tel. 0211 81-12728 Imke.Form@uni-duesseldorf.de
• Tel. 0211 81-14164 Georgeos.Daletos@uni-duesseldorf.de
• Apotheker Andreas Marmann
• Ätherische Öle, Gaschromatographie
• Tel. 0211 81-11745 Andreas.Marmann@uni-duesselorf.de
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Voraussetzungen
• Erfolgreich abgelegtes 1. Staatsexamen
Ist vor Beginn des Praktikums vorzuzeigen!
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Gliederung
• Seminarteil
• Max. 1 Fehltermin
• Praktikumsteil
• Max. 2 Fehltermine
• Vier Blöcke
• Ein Kolloquium pro Block, max. zwei Wiederholungen
• Pro Versuch ein Protokoll
• Abschlussprüfung
• Inhalt: Vorlesung diesen Semesters, Praktikum, Seminare
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User: Pharmazie
Passwort: biologie

Termine
• Seminare
Apotheker Andreas Marmann 6

Termine
• Praktikum
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Termine
• Klausur
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Protokolle
- „ Ein Protokoll hält oder legt fest, zu welchem
Zeitpunkt oder in welcher Reihenfolge welcher
Vorgang durch wen oder durch was veranlasst
wurde. Protokollierung bezeichnet dabei die
Niederlegung der drei Protokollbestandteile
Zeitpunkt, Veranlasser und Vorgang. Erfolgt
die Niederlegung in Schriftform, spricht man
auch von Niederschrift.“ Wikipedia

Protokolle
• Protokolle können nach dem Zeitpunkt ihrer Anfertigung, nach
ihrem Inhalt und nach der Art der Niederlegung unterschieden
werden.
• Protokollierung bezeichnet in zeitlicher Hinsicht drei Grundarten:
– 1. das Voraus-Protokoll („A-priori-Protokollierung“), die Regelung eines künftigen
Ablaufs
– 2. die Jetzt-Protokollierung, die unmittelbare Beobachtung eines derzeitigen Ablaufs
(Monitoring),
– 3. das Gedächtnisprotokoll („A-posteriori-Protokollierung“), die Nachweisung eines
gewesenen Ablaufs.
Protokoll dienen der Rekonstruierbarkeit und
ermöglichen eine gezielte Fehlersuche!

Phytochemisches Praktikum
Charakterisierung von Drogenmaterial
durch quantitative Untersuchungen
• Gemessen werden (Analyten):
– Wirkstoff und/oder
– Analytische Leitsubstanz (z.B. Valerensäure in
Valeriana radix)
• Ziel: Standardisierung
– Standards sind gegeben durch
Arzneibuchmonographien
Apotheker Andreas Marmann 12

Allgemeine Vorgehensweise
1. Extraktion
- Erschöpfende Extraktion
- Verfahren zur Einstellung eines
Konzentrationsgleichgewichts
2. Reinigung des Extraktes
- Flüssig-Flüssig-Verteilung (z.B. Ausschütteln)
- Chromatographie
3. Quantifizierung des gereinigten Extrakts
- Photometrie (meist nach Derivatisierung)
- Titration
Apotheker Andreas Marmann 13

Beispiel Weidenrinde
Weidenrinde besteht aus der ganzen oder
geschnittenen, getrockneten Rinde junger Zweige oder
aus ganzen getrockneten Stücken junger Zweige des
laufendenen Jahrs verschiedener Arten der Gattung
Salix, einschließlich S. purpurea, S. daphnoides und S.
fragilis. Die Droge enthält mindestens 1,5% Gesamt-
Salicylalkohol-Derivate, berechnet als Salicin und
bezogen auf die getrocknete Droge.“
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Spezielle Probleme
• Wirkbestimmende Inhaltsstoffe sind oft nicht oder nur
unvollständig bekannt, oder liegen als komplexes
Stoffgemisch vor
• Analysenergebnis ist oft nicht der richtige Analytengehalt
– Mess-Signal wird nicht allein durch die Analyten verursacht
• Analyten befinden sich in einer sehr komplexen Matrix
– Matrixbestandteile stören viele Quantifizierungsmethoden
– Meist keine direkte Quantifizierung möglich
• Spezifität des Meßverfahrens verbessern
– Nutzung einer Kombination von Stoffeigenschaften
– Dies erfordert mehrere Arbeitschritte (Fehlerfortpflanzung!)
– 100% Spezifität wird praktisch nie erreicht
Konventionsmethoden !
Apotheker Andreas Marmann 15

Ätherische Öle
Arnika
Ginkgo
Apotheker
Andreas Marmann

Ätherische Öle
Definition
- Substanzgemische (keine Substanzklasse) aus pflanzlichen
Ausgangsstoffen
- bei RT flüssig
- leicht flüchtig
- aromatischer Geruch
(‏bitter - intensiver Geschmack (scharf oder
- meist gelbe Farbe oder farblos
- (meist) geringere Dichte als Wasser
- hohes Lichtbrechungsvermögen
- optisch aktiv
- in Wasser schwer löslich
- in lipophilen LM gut löslich

Hauptinhaltsstoffe
Ätherische Öle
Chemie
- Terpene (a-, mono-, bi- und tricyclische Mono- und
(‏Sesquiterpene
- Phenylpropane
Nebenkomponenten
- N- und S-haltige Verbindungen
- Polyacetate
- Alkane, Alkene und multifunktiuonell substituierte
Verbindungen

Terpene
Ätherische Öle
Chemie-Biosynthese
2 Wege: Acetat-Mevalonat-Weg (Cytosol von
(‏Eukaryonten
Pyruvat-Glycerinaldehyd-Weg
(‏Plastiden (Eubakterien, Plasmodien,
Phenylpropane
Shikimisäure-Chorisminsäure-Weg

Acetat-Mevalonat-Weg

Pyruvat-Glycerinaldehyd-Weg

Terpene - Biosynthese

Shikimisäure-Chorisminsäure-Weg

Ätherische Öle
Vorkommen
Vorkommen: höhere Pflanzen, Pilze und Moosen.
Familien: Apiaceae, Asteraceae, Cupressaceae, Lamiaceae,
Lauraceae, Myrtaceae, Pinaceae, Rutaceae, Zingiberaceae
(‏nigrum • Ölzellen (Piper
(‏Apiaceae • Schizogene Ölbehälter (Ölstriemen der
(‏Citrus-Früchte‏)‏ • Lysigene Ölbehälter
(‏Asteraceae‏)‏ • Drüsenhaare
(‏Lamiaceae‏)‏ • Drüsenschuppen
• Milchröhren (Euphorbiaceen)

• antimikrobiell
Ätherische Öle
+/-nachgewiesene Wirkungen
hemmend bis abtötend; Phenol

Ätherische Öle
+/-nachgewiesene Wirkungen
• hyperämisierend
Haut: Campher
Schleimhaut: Anis, Eukalyptus, Kiefernadelöl
(‏appetitanregend‏,‏ Magenschleimhaut: Pomeranzenschale (reflektorisch
• kühlend, lokal anästhesierend
Menthol
• expektorierend
vermehrte Bildung von Interciliarflüssigkeit; Thymian

Ätherische Öle
+/-nachgewiesene Wirkungen
• antiphlogistisch
Kamille
• harntreibend
Wacholderbeeren
• insektenabweisend
Zitronenöl, Lavendel
• sedierend
Melisse, Hopfen, Lavendel
• toxisch
Thujon: zentraldegenerativ
β-Asaron: cancerogen

Ätherische Öle
Gewinnung
• Auspressen
• Wasserdampfdestillation
• Extraktion mit lipophilen LM (→essence concrete→essence
(‏absolut
(‏chaud • Enfleurage (à froid / à

Ätherische Öle
Identität und Reinheit
(‏Drogen‏)‏ • mikroskopisch
• chromatographisch
• GC, HPLC, DC
• sensorisch
• physikalische Methoden
(‏‎0,69-1,12‎ (ca. • rel. Dichte
(‏‎1,450-1,590‎ (ca. • Brechungsindex
• optische Drehung

Ätherische Öle
Dichte
niedrige rel. Dichte: niedermolekulare, aliphatische KW
höhere rel . Dichte: acyclische Terpene
Je höher der Cyclisierungsgrad und Sauerstoffgehalt, desto
höher das spezifische Gewicht.
„leichte Öle“
„schwere Öle“
dazwischen
(‏‎0,850-0,858‎‏)‏ Zitronenöl
(‏‎0,855-0,865‎‏)‏ ger. Terpentinöl
(‏‎1,030-1,071‎‏)‏ Nelkenöl
(‏‎1,180-1,189‎‏)‏ Wintergrünöl
(‏‎0,900-0,916‎‏)‏ Pfefferminzöl
(‏‎0,904-0,917‎‏)‏ Kümmelöl

Ätherische Öle
Gehaltsbestimmung-Wasserdampfdestillation
Siedepunkte der ätherischen Öle liegen zwischen 150-320°C.
Gewinnung durch azeotrope Destillation möglich.
→ Ätherische Öle sind in Wasser nicht löslich, sie geben kein
homogenes Gemisch.
→ Sie verhalten sich nicht wie ideale Gase.
→ Nach Avogadro addieren sich die Dampfdrücke zweier nicht
miteinander mischbarer Gase.
→ Es kommt zur Siedepunktserniedrigung.
→ Die ätherischen Öle können weit unter ihrer Siedetemperatur
in den gasförmigen Zustand übergehen und mit dem Wasser
„flüchten“.

Ätherische Öle
WDD-Apparaturen nach Ph.Eur.
Stahl
Neo-Clevenger

Ätherische Öle
WDD-Apparatur nach Ph.Eur.

Ätherische Öle
Gehaltsbestimmung-Wasserdampfdestillation
Konventionsmethode!
1. Größe der Einwaage
2. Zerkleinerungsgrad der Droge
3. Menge (Art) der Destillierflüssigkeit
4. Hilfsphase
5. Destillationsdauer
6. Destillationstemperatur = Destillationsgeschwindigkeit
7. (‏Stahl/Neo-Clevenger‏)‏ Bestimmungsart und Apparatur
8. Heizquelle

Ätherische Öle
Gehaltsbestimmung-Wasserdampfdestillation
Hauptfehlerquellen
• Apparatur vorher nicht sorgfältig gereinigt.
• Rückstoß in der Apparatur, weil die kleine Bohrung im
Schliffstopfen nicht über dem Belüftungsansatz liegt.
• Kühlung zu schwach/stark eingestellt (Dampf tritt aus / Öl
bleibt am Kühler hängen → am Ende der Destillation kurzes
Abstellen der Kühlung, um es mit dem Dampf in das Messrohr
zu treiben.).
• Vordestillation nicht ausreichend lange (30 min).
• Droge zu früh zerkleinert → Verflüchtigung des Öls.

Ätherische Öle

Drogen im
Praktikum

Anisi fructus/aetheroleum
Pimpinella anisum, Apiaceae
• gg. Atemwegskatarrhe, dyspeptische Beschwerden
• mind. 20 ml/kg äther. Öl, hauptsächlich Phenylpropane
t-Anethol
84-93%
Estragol
0,5-6%
Anisaldehyd

Anisi stellati fructus/aetheroleum
Illicium verum, Schisandraceae
• gg. Atemwegskatarrhe, dyspeptische Beschwerden
• mind. 70 ml/kg äther. Öl
• billiger als Anisi fructus

Anisi stellati fructus/aetheroleum
• Cave Verfälschung mit japanischem Sternanis
• Illicium anisatum, Schisandraceae
Anisatin

Foeniculi amari/dulcis fructus
Foeniculum vulgare, ssp. vulgare, var. vulgare/dulce, Apiaceae
• dyspeptische Beschwerden, Atemwegskatarrhe
äther. Öl t-Anethol (+)-Fenchon
Estragol
Süßer
Fenchel
mind. 20
ml/kg
> 80 ml/kg
< 7,5 ml/kg
< 10 ml/kg
Bitterer
Fenchel
mind. 40
ml/kg
> 60 ml/kg
> 15 ml/kg
> 5ml/kg

Carvi fructus/Carvi aetheroleum
Carum carvi, Apiaceae
• Karminativum, gg. dyspeptische Beschwerden
• mind. 30 ml/kg äther. Öl

Aurantii amari epicarpium et mesocarpium
Citrus aurantium ssp aurantium, Rutaceae
• gg. Appetitlosigkeit
• mind. 20 ml/kg äther. Öl
(‏Öl • Bitterwert mind. 600 (durch Flavonoide, z.B. Naringenin, nicht im

Eucalypti folium/aetheroleum
Eucalyptus globulus, Myrtaceae
(‏äußerlich‏)‏ • gg. Atemwegserkrankungen; rheumatische Beschwerden
(‏Heterophyllie‏)‏ • sichelförmige Folgeblätter
• mind. 20 ml/kg äther. Öl
< 1,5%
(‏kardiotoxisch‏)‏

Caryophylli flos/aetheroleum
Syzygium aromaticum, Myrtaceae
• Antiseptikum, Antiphlogistikum in Zahnheilkunde; Karminativum
• mind. 150 ml/kg äther. Öl
– wg. hohen Ölgehalts Verreibung mit Kieselgel vor WDD, um Verluste zu
(‏Hilfsphase‏)‏ minimieren, CAVE: ρ(Nelkenöl) > ρ(H 2 O)!

Menthae piperitae folium/aetheroleum
Mentha X piperita, Lamiaceae
([‏longifolia • Tripelbastard (M. aquatica X M.spicata [M. rotundifolia X M.
• Spasmolytikum
– gg. krampfartige GI-Beschwerden, Atemwegskatarrhe
• Reizung von Kälterezeptoren
– gg. Muskel-, Nerven-, Kopfschmerzen
• Antiseptikum
– gg. Mundschleimhautentzündung
• Ganzdroge: mind. 12 ml/kg äther. Öl
• Schnittdroge: mind. 9 ml/kg
Minzöl (M.arvensis aetheroleum) durch WDD,
teilweise Abtrennung des Menthols und
Rektifizierung

Menthae piperitae folium/aetheroleum
Mentha X piperita, Lamiaceae
Inhaltsstoffmuster

Salviae / trilobatae folium
Salvia officinalis/triloba, Lamiaceae
• lokales Antiseptikum, Antihidroikum (innerlich), Karminativum
äther. Öl
Cineol
α,β-Thujon
Echter Salbei
mind. 15 ml/kg
15%
35-60%
Dreilappiger Salbei
mind. 18 ml/kg
65%
5%
ZNS-toxisch, krampfauslösend

Lavendulae flos
Lavandula angustifolia, Lamiaceae
• gg. nervöse Unruhe, Schlafstörungen; nervöse GI-Beschwerden
• Insektenrepellent, Geruchskorrigienz
• mind. 13ml/kg äther. Öl

Serpylli herba
Thymus serpyllum, Lamiaceae
• Antiseptikum, Expektorans
– gg. akute/chronische Atemwegserkrankungen
(‏Thymol • mind. 3 ml/kg äther. Öl, (mind. 0,1% Phenole, berechnet auf

Thymi herba/aetheroleum
Thymus vulgaris/zygis, Lamiaceae
• Antiseptikum, Expektorans
– vgl. Serpylli herba; gg. Entzündungen des Mund-/Rachenraumes
(‏Thymol • mind. 12 ml/kg äther. Öl (mind. 0,5% Phenole, berechnet auf

Emerson-Reaktion
Nachweis von Phenolen
Oxidative Kupplung mit 4-Aminophenazon in Gegenwart eines
Oxidationsmittels, z.B. Kaliumhexacyanoferrat(III) zu gefärbten
Chinoniminen, die photometrisch vermessbar sind.
Voraussetzung:
• phenolische OH-Gruppe
• unsubstituierte para-Stellung oder leicht abspaltbare Gruppe
(‏Reaktion • Fehlen einer o-Nitrogruppe (behindert die

Emerson-Reaktion
4-Aminophenazon Phenol farbiges Chinonimin

Matricariae flos/aetheroleum
Matricaria chamomilla, Asteracae
• Antiphlogistikum, Spasmolytikum, Karminativum, Stomachikum
• mind. 4 ml/kg blaues äther. Öl, davon >1% Chamazulen und >20% Bisabolol
und oxidierte Derivate
O
O
Z-En-in-dicycloether
Chamazulen

Matricariae flos
Chamomilla (Matricaria) recutita, Asteracae
-H2O
Bei der WDD (zweistufig) geht das genuin in der
Pflanze enthaltene Matricin („Proazulen“) in
Chamazulen über. Im Praktikum erfolgt die
photometrische Quantifizierung von Chamazulen
mit Guajazulen als Vergleichssubstanz (ist nicht in
Kamille enthalten).

Arnika

Arnicae flos
Arnica montana, Asteraceae
• Inhaltsstoffe:
Sesquiterpenlactone (wesentliches
(‏Wirkprinzip
(‏Monoterpene äther. Öl (v.a.
Flavonoide
Cumarinderivate
(‏Derivate Phenolcarbonsäuren (Zimtsäure und
Polyine
• Bis Ph.Eur.2002 auch Arnica chamissonis ssp. foliosa
zugelassen; Unterschied in der Zusammensetzung und
Wirkstärke

Arnicae flos
Arnica montana, Asteraceae
(‏NW • Antiphlogistikum (nur lokal wg.
– Prellungen, Verstauchungen, rheumatische Beschwerden,
oberflächliche Venenentzündungen
– Wirkung über Hemmung von NF-κB, NF-AT→ Aktivierung der
Entzündungskaskade wird gehemmt
• Exocyclische Methylengruppe/α,β-ungesättigter Pentanonring reagieren
(‏Aminosäuren nach Art einer Michael-Addition mit Thiolgruppen von
– nur äußerliche Anwendung auf unverletzter Haut, da innerlich toxisch
(‏Herzrhythmusstörungen (Schleimhautreizung, GI-Beschwerden,
(‏Compositen – CAVE Kontaktallergie (auch Kreuzallergie zu anderen

NF-κB

Arnicae flos
Sesquiterpenlactone

• STL vom Pseudoguajanolid-Typ
Arnicae flos
Sesquiterpenlactone
• zT. verestert mit kurzkettigen FS ( Essig-, Isobutter-, Isovalerian-, 2-
(‏Tiglinsäure Methylbutter-, Methylacryl-,
Helenalin/
Arnifoline
Chamissonolide
Dihydroh.
A. montana
mitteleurop.Herkunft
+
o
_
_
A. montana
o
_
_
spanische Herkunft
+
A. chamissonis
+
+
+
ssp. foliosa

Arnicae flos
Quantifizierungsmöglichkeiten der Sesquiterpenlactone
(‏Strukturen „Zimmermann-Reaktion“ (auf CH-acide 1.
3
2
1
H
R
OH
R
R
R
O
R'
O O O
R'
R'
R'
NO 2
NO 2
O 2 N
NO 2
farbiges Meisenheimer-Salz, kann
photometrisch vermessen werden
H
C 1 -bei Helenalinen und Dihydrohelenalinen
C 3 -bei Arnifolinen

Arnicae flos
Quantifizierungsmöglichkeiten der Sesquiterpenlactone
(‏Esterstrukturen 2. Hydroxamat-Reaktion (auf Lacton- und

Arnicae flos
Quantifizierungsmöglichkeiten der Sesquiterpenlactone
3. Chromatographische Methoden
Ph.Eur.: HPLC
im Praktikum: GC mittels internem Standard
außerdem: Zuordnung anhand von
Vergleichschromatogrammen
Santonin (STL vom
Eudesmanolid-Typ aus
Zitwerblüten, Artemisia cina,
Asteraceae; früher als
(‏angewendet Anthelminticum

Quantifizierung mittels Chromatographie
• Externer Standard - mit Kalibriergerade
• Zumisch-/Aufstockmethode
- über Peakflächenzunahme
- mit Standardsubstanz
• Interner Standard
Bedingungen:
(‏Standard‏)‏ m (Probe) *A
skf = ___________________
(‏Probe‏)‏ m (Standard) *A
nicht in Probe enthalten
keine Peaküberlagerung, aber
möglichst ähnliche Rf-Werte
ähnlicher Dampfdruck
keine Zersetzung
gut einwägbar + billig

Quantifizierung mittels Chromatographie
FID
Brenngas
Kapillarsäule
Trägergas N2
Ofen
Signalwandler

Quantifizierung mittels Chromatographie
Wärmeleitfähigkeitsdetektor
Flammenionisationsdetektor

Ginkgo

Ginkgo folium
Ginkgo biloba, Ginkgoaceae
• „lebendes Fossil“
• zweihäusiger Nacktsamer
• Verwendung standardisierter Extrakte

Ginkgo folium
Ginkgo biloba, Ginkgoaceae
Inhaltsstoffe:
(.‏Ph.Eur Flavonoide (mind. 0,5% lt.
Terpenlactone
(‏‎0,02-0,06%‎‏)‏ Sesquiterpene - Bilobalid
(‏‎0,02-0,2%‎‏)‏ Diterpene - Ginkgolide
Ginkgolsäuren
Wirkungen:
• neuroprotektiv
• durchblutungsfördernd
– Verbesserung der rheologischen Eigenschaften des Bluts
– PAF-Antagonismus
• membranstabilisierend
• antioxidativ

Ginkgo folium
Ginkgo biloba, Ginkgoaceae
Ginkgolid
R 1
R 2
A
H
H
B
OH
H
C
J
OH
H
OH
OH
Bilobalid

Ginkgo folium
Ginkgo biloba, Ginkgoaceae
Flavonole
R
M r [g/mol]
Biflavone
R‘
R‘‘
R‘‘‘
M r [g/mol]
Kämpferol
H
286
Amentoflavon
OH
OH
OH
538
Quercetin
OH
302
Bilobetin
OCH 3
OH
OH
552
Isorhamnetin
OCH 3
316
Ginkgetin
OCH 3
OCH 3
OH
566

Ginkgo folium
Ginkgo biloba, Ginkgoaceae
Ginkgolsäure

Ginkgo folium
Gehaltsbestimmung im Praktikum
• Der Gehalt der wirksamkeitsbestimmenden terpenoiden
Inhaltsstoffe ist für eine zuverlässige Quantifizierung zu
gering.
• Nach Extraktion und Hydrolyse chromatographische
Bestimmung der Flavonoid-Aglyka und Umrechnung auf den
Gesamtgehalt an Flavonoidglykosiden, der dem Mittelwert
aller enthaltenen mono-, di- und triglykosidischen Flavonoide
entspricht.
• Ermittlung der enthaltenen Flavonoidaglyka mit Hilfe ihrer
UV-Spektren und Molekulargewichte.

Ginkgo folium
Gehaltsbestimmung im Praktikum
Referenzlösung
10,0 mg Quercetin-Dihydrat R in 20 ml Methanol lösen, mit 15,0 ml Salzsäure R und
5 ml Wasser R versetzen und mit Methanol auf 50,0 ml verdünnen.
Flavonoidgehalt = 2*
F 1 *m 1 *2,514*p
F 2 *m 2
F 1 : Summe aller berücksichtigten Peakflächen der Untersuchungslösung
F 2 : Peakfläche, die dem Quercetin der Referenzlösung entspricht
m 1 : Einwaage des Quercetins zur Herstellung der Referenzlösung [g]
m 2 : Einwaage der Droge zur Herstellung der Untersuchungslösung [g]
p: Prozentgehalt an wasserfreiem Quercetin in Quercetin-Dihydrat R

Flavonoidbestimmung mittels HPLC/DAD
und LC/MS
Schematischer Aufbau des Massenspektrometers
ESI-MS
•schonende Ionisierung
•kaum Fragmentierung
•Bildung von Quasimolekülionen
Ion-Trap Massenanalysator
(“‏Ionenfalle‏„)‏

Tylor cone
ESI
Electronic Spray Ionization
• Raleigh-limit
• Coulomb-Abstoßung
• Charge residue
model
• Ion evaporation
model
• Solvatationsenergie

Flavonoidbestimmung mittels HPLC/DAD
• Analysenlösung
(!‏LÖSUNG (KLARE •
• → in kleine HPLC-Gläschen füllen
• → per LC/MS vermessen
• → Vergleich hydrolisierter und
nicht hydrolisierter Flavonoide
und LC/MS
• → durch Fragmentierung
ermittelte Molekulargewichte
Angabe der enthaltenen
Flavonoidaglyka
Die Auswertung dieses Versuches
wird im Detail in einem separatem
Seminar im Praktikum besprochen
PBIII070426 #2 Ginkgo folium UV_VIS_1
180
mAU
WVL:235 nm
100
50
-20
4 - 1,1
5 - 1,2
8 - 10 1,5- 3,2
67 - 1,3
9 - 1,6
3 - 1,1
12 -- 0,2 0,7
18 - 37,2
19 - 37,8
20 - 38,9
11 - 124,5
- 26,4
17 - 35,4
16 - 33,4
13 - 26,9 15 - 33,2
14 - 30,9
21 - 47,0
0,0 10,0 20,0 30,0 40,0 50,0 60,0
P e a k # 1 02
0 %
7 0 , 0
%
- 1 0 , 0
2 0 6 . 6
2 5 5 . 3 3 7 2 . 7
2 0 0 2 5 0 3 0 0 3 5 0 4 0 0 4 5 0 5 0 0 5 5 0 5 9 5
nm
min
? I s o r h a m n e t in 9 9 9 . 3 0

Andere Massenspektrometrische
Methoden
• EI
• CI
• FAB
• APCI
• MALDI

APCI
Atmospheric Preasure Chemical Ionization
• Ähnlich ESI
• Keine elektrische
Spannung
• Ionisierung von LM
Molekülen

EI
Elektonenstoßionisation
• Häufiger Elektronenabspaltung als
Elektronenaufnahme

CI
Chemical Ionization
• Je nach Wahl des Gases:
– Ladungsaustausch
– Protonierungsreaktionen
– SE-Reaktion

FAB
Fast Atom Bombardment
• Analyt in Matrix gelöst
• Beschuss mit Ionen
• Positiv und negativ
Ionisierung

MALDI
Matrix Assisted Laser Desorption Ionization
• Analyt in Matrix vermischt
• Beschuss mit Laser
• Ohne große termische
Belastung überträgt die
Matrix die Ladung
• Gleichzeitige Ionisierung
aller Analyten
• Häufige Kombination mit
TOF

Verfahren Vorteile Nachteile
EI
CI
-Fragmentationssignale
- korrekte Intensität der
Isotopensignale
-Teilweise nur M+
-Polare und hochmolekulare Substanzen nicht
messbar
- Keine Fragmentationssignale -Sehr polare Substanzen nicht messbar
-inkorrekte Intensität der Isotopensignale
FAB - Polare Substanzen messbar -Beschränkte Substanzlöslichkeit in der Matrix
-Seltener Fragmentationen
ESI
APCI
MALDI
- Messung hochmolekularer
Susbtanzen
- Messung polarer & apolarer
Substanzen
-Gleichzeitige Registrierung
aller Ionen
-Bestimmung hoher Massen
-Beschränkte Art an LM
- starke Unterschiede in der Ionisierung
einzelner Substanzklassen
- Teilweise Addukt Ionen
- Zeitbedarf für Probenvorbereitung

Andere Analysatoren in der
Massenspektrometrie
TOF (Time-Of-Flight)

Andere Analysatoren in der
Massenspektrometrie
ICR (Ionen-Cyclotron-Resonanz-Spektrometer)

Naturstoffisolierung

Japanische Pagodenbaumspitzen
Gemmae sophorae japonicae, Fabaceae
• Heute hauptsächlich zur
Gewinnung von Rutosid
• Enthält neben Flavonoiden
auch Alkaloide

1 - 0,103
8 - 1,503
4
2 3 0,674
7 6 5 - 1,189 1,377 1,335 1,273 1,101
9 - 21,628
11 10 - 23,258 22,963
12 - 24,683
13 - 31,653
14 - 47,915
Droge 25g
12h
Soxhletextraktion
Extrakt
Einengen
Auskristallisieren
mit eiskaltem
Wasser
2x wiederholen
2.500
AM110512 #2 Rutosid UV_VIS_1
mAU
WVL:235 nm
Waschen/
Umkristllisieren
1.000
Prüfung auf
Reinheit
1,4376g
-200
min
0,0 10,0 20,0 30,0 40,0 50,0 60,0

Soxhlet-Extraktion
Apotheker Andreas Marmann 94

Soxhlet-Extraktion

Viel Spaß im Praktikum