REPRODUKTION PFERD - VeterinÃ¤rmedizinische UniversitÃ¤t Wien

REPRODUKTION PFERD 

4. Fortbildung des 

Graf Lehndorff‐Instituts für 

Pferdewissenschaften 

16. Februar 2013

Programm 

1. Geschlechtsbedingte Rittigkeitsprobleme – Ursachen und 

Behandlungsansätze 

(Dr. Juliane Kuhl, Wien) 

2. Möglichkeiten und Grenzen der Zuchttauglichkeitsuntersuchung bei der 

Stute 

(Dr. Maximiliane Merkl, Neustadt/Dosse und Wien) 

3. Zyklusmanipulation bei der Stute: aktueller Stand 

(Prof. Dr. Christine Aurich, Wien und Neustadt/Dosse) 

4. Herstellung und Einsatz von Tiefgefriersamen in der Pferdezucht 

(Dr. Mareike von Lewinski, Neustadt/Dosse)

Geschlechtsbedingte Rittigkeitsprobleme – Juliane Kuhl 

Wilder Hengst und zickige Stute? 

- 

Geschlechtsspezifische 

Rittigkeitsprobleme 

% 

100 

80 

60 

40 

20 

Geschlechterverteilung von Pferden im 

Leistungssport 

Dressur 

Hengste 

Wallache 

Stuten 

% 

100 

80 

60 

40 

20 

Springen 

Juliane Kuhl 

Besamungs- und Embryotransferstation 

Vetmeduni Vienna 

0 

1928-1949 

1950-1959 

1960-1969 

1970-1979 

1980-1989 

1990-1999 

2000-2010 

0 

1928-1949 

1950-1959 

1960-1969 

1970-1979 

Geschlechterverteilung der an Finalprüfungen des CHIO in 

Aachen startenden Pferde (1928-2010) 

1980-1989 

1990-1999 

2000-2010 

Spicker 2010 

Geschlechterverteilung in Springprüfungen 

Pferde in freier Wildbahn 

Wallache 

Hengste 

Stuten 

Haremgruppe 

Haremshengst und Stuten/Fohlen 

Junggesellengruppe 

Hengste oder 

Hengste und Stuten 

CHIO Aachen 

(2000-2010) 

Landesmeisterschaften 

BB (Finalprüfung 2012) 

Jungpferde 

Spicker 2010; Pferdezuchtverband Brandenburg-Anhalt 2012 

Hengst 

Wallach 

GnRH 

Hypothalamus 

GnRH 

Hypothalamus 

LH 

FSH 

Hypophyse 

LH 

FSH 

Hypophyse 

Östrogene 

Testosteron 

Inhibin 

Leydig 

-Zellen 

Testosteron 

Sertoli- 

Zellen 

Hoden 

Hengstverhalten 

Spermatogenese 

Chirurgische Kastration 

• Vorteil: effektiv, wenn bei jungen Tieren durchgeführt 

• Nachteile: irreversibel 

bei adulten Tieren nicht immer gewünschte 

Verbesserung der Verhaltensprobleme 

1


Alternativen zur chirurgischen Kastration beim Hengst 

Östrogene 

Testosteron 

GnRH Antikörper 

LH 

Leydig 

-Zellen 

GnRH 

FSH 

Testosteron 

Sertoli- 

Zellen 

Hypothalamus 

Hypophyse 

Inhibin 

Hoden 



GnRH Impfung 

• Improvac/Equity 

• Dosis 2 ml 

• Applikationsform laut Hersteller 

i.m., besser subcutan 

• 2x im Abstand von 4 Wochen 

• Cave: lokale Nebenwirkungen 

• Zusätzlich Behandlung mit 

NSAID (bei Impfung und bis 7 

Tage danach) 

GnRH 

Hypothalamus 

GnRH Vakzine beim Hengst 

GnRH Antikörper 

LH 

FSH 

Hypophyse 

Inhibin 

? 

Leydig 

-Zellen 

Sertoli- 

Zellen 

Hoden 



Antikörperbildung bei jungen 

Ponyhengsten (3-4 J.) 

Antikörperbildung bei adulten Hengsten 

(6-15 J.) 

Turkstra et al. 2005 Janett et al. 2009 



• Wirkdauer sehr variabel 

• Individuell und altersabhängig unterschiedlich 

starke Immunantwort 

• ältere Hengste → weniger Antikörper 

(evtl. 3. Impfung) 

• Samenproduktion und Plasma Testosteron 

hängen nicht zusammen → Messung 

Testosteron keine Aussage über Fruchtbarkeit 

• Fruchtbarkeit im Anschluss u.U. reduziert 

Plasma Testosteron 

Spermiengesamtzahl 

Janett et al. 2009 

2


Altrenogest beim Hengst 

Gestagene 

Östrogene 

Testosteron 

LH 

Leydig 

-Zellen 

GnRH 

FSH 

Sertoli- 

Zellen 

Hypothalamus 

Hypophyse 

Inhibin 

Hoden 

• Inhibition LH-Sekretion durch Gestagene 

↓ LH Konzentration nach etwa 8 Tage 

Verhaltensänderungen: 

↑ Dauer bis Erektion 

↑ Dauer bis Ejakulation bzw. 

↑ Inzidenz Ausbleiben der Ejakulation 

↓ Hodengröße 

↓ tägliche Spermienproduktion 

↓ morphologisch intakte Spermien 

Testosteron 



• Langzeitfolgen? 

Brady et al. 1997; Squires et al. 1997 

Altrenogest beim Hengst 

• Regumate 

• 0,044 mg/kg sid 

• Einfach zu applizieren, dafür täglich notwendig 

• Reversibel 

• Dopingrelevant 

Auszug aus der FEI Dopingliste 2013 

Fragen an den Stutenbesitzer 

• Wie äußern sich die Probleme genau? 

– Nimmt den Schenkel nicht an, buckelt, geht 

durch… 

– Benimmt sich wie ein Hengst, ist aggressiv… 

– Wiederkehrende milde Kolik 

• Wann treten die Probleme auf? 

– Immer gleich 

– Zu bestimmten Jahreszeiten (Frühjahr/Herbst) 

– Wenn die Stute rosst 

Besonderheit bei Pferden 

• Auch Stuten ohne aktives Ovargewebe 

(Anöstrus, Ovarektomie) zeigen häufig 

Rosse 

• Grund: Steroidproduktion in der 

Nebennierenrinde 

• Sinn: wahrscheinlich Festigung der 

sozialen Beziehung zw. Haremshengst 

und seinen Stuten 

Asa et al. 1980; Ginther 1992 

3


Rittigkeitsprobleme durch schlechten 

Vulvaschluß? 

• Schmerzreiz innerem 

Organ →schmerzhaftes 

Empfinden auf der 

Körperoberfläche 

• Schmerzsignale aus 

Hautareal häufiger 

→Gehirn assoziiert 

Aktivierung des Pfades mit 

Schmerzen im Hautareal 

• Beispiel Mensch: 

Herzinfarkt → 

schmerzhaftes 

Empfinden linke Schulter 

bis Arm 

• Stuten mit schlechter 

Vulvakonformation 

→häufig erhöhte 

Empfindlichkeit in der 

Flankengegend 

Christoffersen et al. 2007 

• Verbesserung von 

Rittigkeitsproblemen 

nach Caslick-OP 

• 6 Monate nach OP 

Probleme deutlich 

besser oder 

verschwunden bei 12 

von 14 Stuten 

Studie Vulvaschluss 

Behandlung zyklusabhängiger Probleme 

Rosseunterdrückung 

• Luteolyse blockieren 

• Gelbkörperaktivität 

simulieren 

• Immunisieren gegen 

GnRH 

• Oxytocingabe in der 

Lutealphase 

– Tag 8-14 p.ov. 

– 1x tgl. 60 IE Oxytocin 

i.m. 

• Einsetzen von 

Glasmurmeln in die 

Gebärmutter 

– Sollen Conceptus 

simulieren 

Christoffersen et al. 2007 

4


Glasmurmeln 

• Idee: Trächtigkeit simulieren 

• 1-3 Glasmurmeln 

(ø 30-35mm) 

intrauterin 

• Beginn Behandlung 

24 Std. nach Ovulation 

• Bei ca. 40% der Stuten persistierender 

Gelbkörper für 57-120 Tage 

• Feldstudie in der Schweiz: bei 12 von 30 Stuten 

berichten Besitzer von einer Verbesserung der 

Verhaltensprobleme 

Nie et al.2001; Burger et al. 2008 

Oxytocingabe in Lutealphase 

• Oxytocin reguliert PGF2α Sekretion aus dem 

Endometrium während der spontanen Luteolyse 

• Dagegen ist Oxytocingabe während der frühen 

Lutealphase effektiv, die Luteolyse zu blockieren 

Abb. Aurich 2011 



• ↓PGF2α 

• ↓ COX-2 Expression am Endometrium 

• ↑ Progesteron über 30 Tage 

Keith et al. 2013 

• Effektiv zur Unterdrückung des Rosseverhaltens 

Keith et al. 2013 


• Wirkdauer? 

• Keith et al. 2013: 

Min. 30 Tage p.ov. 

Bei 13 Stuten 

• Vanderwall et al. 2007: 

30-40 Tage p.ov. 

bei 2 von 6 Stuten 

≥ 40 Tage 

bei den anderen 4 Stuten 

Saisonale Effekte? 

• Reversibel durch Applikation von PGF2α 

Bindung verschiedener Gestagene an den 

uterinen Progesteronrezeptor 

relative Bindung (%) 

1000 

500 

0 

Rind 

Pferd 

Schwein 

Progest. Norgest. Chlormad. Altrenogest 

Relative Bindung verschiedener Gestagene an den uterinen 

Progesteronrezeptor bei Rind, Pferd und Schwein (nach Frey 1999, mod.) 

Abb.: www.thelwell.org.uk 

5


Chlormadinonacetat 

• Keine Bindung an 

equinen 

Progesteronrezeptor - 

daher wirkungslos 

• Bisher einziges zur 

Rosseunterdrückung bei 

der Stute bei nationalen 

Turnieren zugelassenes 

Präparat 

• Seit 2013 von der FN 

nicht mehr zugelassen 

Altrenogest 

• 0,044 mg/kg p.o. sid 

• Effektiv zur Unterdrückung von 

Rossesymptomen 

• Dauer bis Effekt ca. 3-4 Tage 

• Reversibel 

• Zugelassen bei Stuten im 

Turniereinsatz 

– FEI: nach Deklaration (Form2) 

– FN: seit 2013 erlaubt bei Stuten 

GnRH Impfung 

• Improvac/Equity 

• Dosis 2 ml 

• Applikationsform laut Hersteller 

i.m., besser subcutan 

• 2x im Abstand von 4 Wochen 

• Cave: lokale Nebenwirkungen 

• Zusätzlich Behandlung mit 

NSAID (bei Impfung und bis 7 

Tage danach) 

Immunreaktion nach GnRH Impfung in Abhängigkeit vom 

Alter der Stuten 

Reversibilität GnRH Impfung in Abhängigkeit vom 

Alter der Stuten 

• Rückkehr zu 

regelmäßigen Zyklen 

nach Impfung ist 

altersabhängig 

• Einteilung der Stuten: 

– Kat. 1: ≤4 J. (N=25) 

– Kat. 2: 5-10 J. (N=16) 

– Kat. 3: ≥11 J. (N=10) 

Equine Veterinary Journal 

Volume 45, Issue 1, pages 111-113, 6 MAY 2012 DOI: 10.1111/j.2042-3306.2012.00577.x 

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.2042-3306.2012.00577.x/full#f2 

Equine Veterinary Journal 

Volume 45, Issue 1, pages 111-113, 6 MAY 2012 DOI: 10.1111/j.2042-3306.2012.00577.x 

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.2042-3306.2012.00577.x/full#f1 

6


GnRH Impfung 

Hengstverhalten bei der Stute 

• Fazit: 

– hoch effektiv Reproduktionsfunktion zu 

unterdrücken 

– variable Auswirkung auf Verhalten 

– Reversibilität kann nicht garantiert werden 

Hengstverhalten bei der Stute 

Smart Cody Joy – Quarterstute 15 J. 

• Kann ausgelöst werden durch hohe Dosen an 

– Östrogenen 

– Androgenen 

– Anabolen Steroiden 

• Aufspringen bei Eselstuten und Kühen 

→ normales Sexualverhalten 

• Bei Pferdestuten selten 

– Inzidenz bei ca. 5% pro Stute und Saison 

– Gelegentlich bei tragenden Stuten 

– In Verbindung mit erhöhten Testosteronkonzentrationen oder 

– Ovartumoren 

Progesteron 

• 2,2 nmol/l 

• Referenzwerte: 

– Anöstrus:12 nmol/l 

Testosteron 

• 3,5 nmol/l 

• Referenzwerte: 

– Stute:

Zuchttauglichkeitsuntersuchung – Maximiliane Merkl 

Zuchttauglichkeitsuntersuchung 

• Gibt Aufschluss über die 

Möglichkeiten und Grenzen der 


bei der Stute 

Dr. Maximiliane Merkl 

Klinik für Gynäkologie, Andrologie und Geburtshilfe 

Veterinärmedizinische Universität Wien 

Geschlechtsgesundheit 

Fertilitätsprognose 

• Wird die Stute tragend? 

• Bleibt die Stute tragend? 

• Mit welchen Problemen ist 

zu rechnen? 



Vorbericht 

• Vorbericht 

• Allgemeinuntersuchung 

• Gynäkologische Untersuchung 

• Äußere Untersuchung 

• Innere Untersuchung 

rektal 

vaginal 

• Weiterführende Untersuchungen 

• BU 

• Zytologie 

• Biopsie 

• Alter 

• Reproduktionsstatus 

• Bisherige Zuchtnutzung 

• Verlauf vorheriger Trächtigkeiten / Geburten 

• Resorptionen, Aborte 

• Vorbefunde (Tupfer / Biopsie) 

• Erkrankungen / Vorbehandlungen 

Allgemeinuntersuchung 

Trächtigkeitsverluste bei der Stute in 

Abhängigkeit von Alter von 

Reproduktionsstatus 

Ist die Stute in der Lage ein Fohlen 

auszutragen? 

Bewegungsapparat 

Ernährungszustand 

Konstitution 

Herz, Kreislauf 

Trächtigkeitsverluste bis Tag 35 (n=1476) 

% 15 

10 

5 

0 

Maidenstute Güststute Fohlen bei 

Fuss 

Trächtigkeitsverluste ab Tag 35 (n=837) 

% 15 

10 

5 

0 

Maidenstute Güststute Fohlen bei 

Fuss 

3-8 Jahre 

9-13 Jahre 

> 14 Jahre 

3-8 Jahre 

9-13 Jahre 

> 14 Jahre 

Miyakoshi et al., J. Equ.Vet.Sci, 2012 

1


Trächtigkeitsverluste bei der Stute in 

Abhängigkeit vom Ernährungszustand 

Trächtigkeitsverluste bei der 

Stute 

% 

25 

20 

15 

10 

Schlechter EZ 

Guter EZ 

• Unabhängig von: 

• Zwillingsreduktion 

• Reproduktionsstatus der Stute 

Tendenziell weniger Verluste in der Frühträchtigkeit bei Maidenstuten 

• Erhöhtes Risiko bei: 

5 

0 

Trächtigkeitsverluste 

bis Tag 35 


Tag 35 bis Geburt 

• Älteren Stuten (>9 Jahre) 

• Stuten mit schlechtem Ernährungszustand 

• Belegung in der Fohlenrosse 

• Stuten mit Endometriumzysten 


Miyakoshi et al., 2012 

Konformation der Vulva und 

Schamschluss 

Adspektion des äußeren 

Genitale 

• optimal 

• Vulva steht senkrecht 

• Guter Schluss 

• Dorsaler Schamwinkel überragt 

Beckenboden max. 4 cm 

• Abweichungen 

• Vulva stark geneigt 

• Schlechter Schluss 

• Sehr lange Scham 

• Dorsaler Schamwinkel überragt 

Beckenboden deutlich 

9 

Bilder aus Equine Reproduction, 2nd Edition 


Schamschluss 


Schamschluss 

2


Konformation der Vulva bei Vollblutstuten 

(n=305) in Abhängigkeit vom Alter 

Fertilität von Vollblutstuten (n=305) in 

Abhängigkeit von der Konformation der Vulva 

• Hemberg et al. 2005, Retrospective study on vulvar conformation in relation 

to endometrial cytology and fertility in thoroughbred mares 

• Hemberg et al. 2005, Retrospective study on vulvar conformation in relation 

to endometrial cytology and fertility in thoroughbred mares 

% 100 

90 

80 

70 

60 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

gute Konformation der Vulva, keine 

Caslick OP indiziert 

Caslick operiert (gesamt) 

3-5 Jahre 

6-8 Jahre 

9-11 Jahre 

> 11 Jahre 

% 

90 

80 

70 

60 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

Konzeptionsrate 

Geburt eines lebenden 

Fohlens 


Status der Stute bei 

Vorstellung auf der 

Deckstation: 

gute Konformation 

Caslick operiert 

Caslick OP erst nach 

Belegung 

Konformation und Schluss der 

Vulva 

Adspektion des äußeren Genitales 

• Eine schlechte Konformation der Vulva sowie 

mangelhafter Schamschluss 

• Treten vermehrt bei älteren, multiparen Stuten auf 

• Können eine Ursache für Fertilitätsstörungen sein 

Subklinische Endometritiden 

Geringere Konzeptions- und Abfohlraten 

Geringere Zahl lebender Fohlen 

Rechtzeitige Behebung des Problems 

Caslick OP 

Fütterung anpassen 

Endometriumzysten 

Transrektale Palpation und 

Sonografie 

• Ätiologie: Lymphlakunen oder dilatierte 

Uterindrüsen 

• Inzidenz: Ø 22,4% 

72% 

28% 

• Vermehrtes Vorkommen bei: 

• Alten Stuten 

• Multiparen Stuten 

• Oft in Verbindung mit weiteren Veränderungen des 

Endometriums 

Stuten 7-14 

Jahre 

Stuten >14 

Jahre 

Stanton et al., J.Equ.Vet.Sci., 2004 

3


Trächtigkeitsverluste bei Stuten mit 



% 15 

Stuten mit 


10 

(n=177) 

5 

0 


bis Tag 35 


Tag 35 bis Geburt 

Stuten ohne Zysten 

(n=2131) 

• Mögliche Probleme: 

• Trächtigkeitsuntersuchung 

‣ Dokumentation! 

• Behinderung der Motilität des 

Embryo 

• Eingeschränkte Versorgung des 

Embryo / Fetus 

‣ Prognose für die Fruchtbarkeit abhängig von 

Anzahl, Größe und Lokalisation der Zysten im 

Uterus 


Stanton et al., J.Equ.Vet.Sci., 2004 

Ovartumoren 

Granulosazelltumor 

Granulosathekazelltumor 

• Granulosathekazelltumor 

• Terratom 

• Zystadenom 

Zystadenom 

Terratom 

• Häufigster Ovartumor bei der Stute 

• Ovar vergrößert, derb, multizystische bis 

wabenartige Struktur 

• Endokrin aktiv: Inhibin, Steroide 

• Kontralaterales Ovar atrophisch 

• Verhaltensänderungen: hengstartig, aggressiv, dauerrossig, 

anöstrisch 

• Progesteron dauerhaft < 1 ng/ml 

• Testosteron > 0,1 ng/ml 

• Therapie: chirurgische Entfernung 

Bilder aus Equine Reproduction, 2nd Edt. 

Granulosathekazelltumor 

Vaginale Untersuchung 

Bilder aus: Equine Reproduction, 2nd Edt. 

24 

4


Vaginale Untersuchung 

Beurteilung der Zervix 

• Diagnose des Zyklusstandes 

• Funktionalität der Zervix 

• Hinweis auf Erkrankungen 

• Sonstige Veränderungen 

• Wenn Hinweis auf gestörte 

Zervixfunktion 

‣ Manuelle Palpation 

Vaginale Inspektion 

Weiterführende 

Untersuchungen 

28 

Endometriumtupfer 

Ergebnisse Endometriumtupfer 

• Bestimmung des Keimspektrums im 

Uterus 

• Wann? 

• Vor Zuchtsaison zum Nachweis von 

latenten Infektionen 

‣ Endometritis und Fruchttod 

‣ Abort infolge von Plazentitis 

• Bei Verdacht auf Endometritis 

• Auswahl des geeigneten Antibiotikums 

• Ergebnisse 1) 

 

• Echte Deckinfektionen sind sehr selten! 

T.equigenitalis, P.aeruginosa, K.pneumoniae (Typ 1,2,5) 

• Meist bedingt pathogene Keime 

• Häufigste Erreger 

• β-hämolysierende Streptokokken (56%) 

• E. coli (15%) 

• Staph. aureus (10%) 

Interpretation der Ergebnisse immer im Zusammenhang mit 

der Klinik! 

Resistenztest nicht vergessen! 

1) Beaufort Cottage Laboratories (2002–07) 

5


Endometriumtupfer 

Low-volume-uterine-lavage 

LeBlanc et al., Theriogenology 2007; Niel, Theriogenology, 2005 

• Falsch negative Ergebnisse möglich 

• Tupfer kommt nur mit kleinem Bereich des Endometriums in 

Kontakt 

• Bakterien besiedeln nicht immer die gesamte 

Oberfläche des Uterus 

• Plaques – Bildung möglich 

• Schutz vor körpereigener Immunantwort und Antibiose? 

• z.B. E.coli 

• Wann? 

• Stuten mit Fruchtbarkeitsstörungen 

• Bei Verdacht auf subklinische Endometritis 

• Negative Tupferprobe(n) 

• Vorteil 

Größeres Areal des Endometriums wird erfasst 

Höhere Sensitivität im Vergleich zur reinen 

Tupferprobe! 

(LeBlanc et al., Theriogenology 2007) 

Low-volume-uterine-lavage 

• Durchführung 

• Katheter (10 - 12 cm) bzw. lange Inseminette in den 

Uterus vorführen 

• 60-80 ml sterile Kochsalzlösung infiltrieren 

• Rektale Massage des Uterus 

• Ablassen der Flüssigkeit in steriles Röhrchen 

• Zentrifugation bei 400 g für 10 min 

• Dekantieren bis auf 5 ml 

• Tupferprobe aus dem Pellet für BU 

Zytologie 

• Verschiedene Entnahmetechniken 

• Tupfer / Zytobrush / Low Volume Flush 

• Mikroskopie 

• Anzahl Epithelzellen und Entzündungszellen (PMNs) 

• Bakterien, Pilze 

• Sonstige Verunreinigungen 

• Verschiedene Arten der Auswertung 

• Anteil PMNs / Epithelzellen 

• Anzahl PMNs / Gesichtsfeld 

• Menge an Debris 

Diff Quick ® 

Card, Theriogenology, 2005 

Zytologie: Vergleich verschiedener 

Entnahmetechniken bei Stuten mit 

chronischer Infertilität 

Zytologie: Vergleich verschiedener 

Entnahmetechniken bei Stuten mit 

chronischer Infertilität 

60 

50 

40 

Tupfer Zytobrush Low Volume Flush 

Tupfer 

Intakte Zellen 

Deformierte 

Zellen 

Zellfragmente 

Low Volume Flush 


Deformierte 

Zellen 

Zellfragmente 

30 

20 

Cytobrush 

10 


0 

Zellen/Gesichtsfeld PMN/Gesichtsfeld PMN/Epithelzelle 

Deformierte 

Zellen 

Cocchia et al., Theriogenology 2012 


6


Zytologie: Einfluss verschiedener Entahmeund 

Auswertetechniken bei Stuten mit 

chronischer Infertilität (n=20) 

Zytologie 

Anzahl PMNs/Gesichtsfeld 

% 100 

50 

0 

Tupfer 

Zytobrush 


keine 

Entzündung 

Diagnose 

moderate 

Entzündung 

% 100 

50 

PMNs / Epithelzellen 

0 

Tupfer 

Zytobrush 


akute Endometritis 

Diagnose 

• Zytologie variiert stark mit der Entnahmetechnik 

Gesamtzellzahl, Anzahl PMNs, Anzahl Epithelzellen 

Intakte / zerstörte Zellen 

Andere Entzündungszellen 

Hintergrund 

‣ Hoher Grad an falsch positiven und falsch negativen 

Ergebnissen 

‣ Entnahmetechnik bei der Auswertung berücksichtigen 

• Kaum zusätzliche Informationen 

• Bei akuter Endometritis: Diagnose mittels gyn. Untersuchung und BU 

• Bei subklinischer Endometritis: Aussagekraft zu ungenau 


Biopsie 

Auswertung Biopsie 

• Wann? 

• Fruchtbarkeitsstörung ohne klinische Befunde 

• Alte Maidenstuten 

• Vorberichtlich langwierige Endometritiden 

• Konformationsänderungen der Vulva 

• Normales Endometrium 

(Lutealphase) 

• gleichmäßige Verteilung der 

Uterindrüsen, 

• kaum zelluläre Infiltration 

• Akute Entzündung 

• PMNs in Epithel, Drüsen 

und Stratum compactum 

 

Entzündliche und degenerative Veränderungen 

werden erfasst! 

• Wichtig: Immer Zyklusstand und Vorbericht angeben! 

Auswertung Biopsie 

Endometriumbiopsie 

• Chronisch degenerative 

Veränderungen 

(Endometrose) 

Zuordnung des Endometriums zu 

Kategorien in Abhängigkeit vom 

Reproduktionsstatus (n= 105) 

Rosse Gelbkörperphase Anöstrus 

• Drüsennester 

• Periglanduläre Fibrose 

• Zystische Dilatation von 

Drüsen 

• Endometriumsatrophie 

• Chronische Entzündung 

• Lymphozyten, 

Plasmazellen 

Kategorie 

Veränderungen 

des 

Endometriums 

Erwartete 

Abfohlrate 

I Keine >80 % 

IIA Geringgradig 50-80% 

IIB Mäßig 10-50% 

III Deutlich


Zuordnung des Endometriums zu Kategorien 

in Abhängigkeit vom Alter (103 Stuten) 

Zuordnung des Endometriums zu Kategorien 

in Abhängigkeit vom Alter (103 Stuten) 

12 Jahre 

12 Jahre 

Anzahl Stuten 

30 

25 

20 

15 

10 

5 

0 

I bis IIA IIA bis B IIB III 

Kategorie 

Anzahl Stuten 

30 

25 

20 

15 

10 

5 

0 

Tragend: 

89% (8/9) 

Tragend: 

Tragend: 

Tragend: 

82% (31/38) 

80% (12/15) 

Keine Info 

I bis IIA IIA bis B IIB III 

Kategorie 

Aurich et al. 2011 


Endometriumbiopsie 

Beurteilung der morphologischen Veränderungen 

des Endometriums in jeder Zyklusphase möglich 

Alter der Stute hat einen signifikanten Einfluss 

auf die Kategorisierung des Endometriums und 

die Fertilitätsprognose 

Durch gutes Management sind gute bis sehr gute 

Trächtigkeitsraten auch bei Stuten höherer 

Kategorien möglich! 

Was kann ein einmalige ZTU 

nicht leisten? 


Belegungsinduzierte 

Endometritis 

Ausbleiben der Ovulation 

8


Art der Besamung und 

Trächtigkeitsraten an der 

Besamungsstation der Vetmeduni Wien 

% der 

Stuten 

100 

80 

60 

40 

20 

0 

Art der Besamung 

100 

80 

60 

40 

20 

0 

Trächtigkeitsraten am 

Ende der Saison 

Conclusio 

Wesentlich für die Fruchtbarkeit einer Zuchtstute ist ein 

gutes Management 

Voruntersuchung von Zuchtstuten vor der Saison 

 

 

 

Fruchtbarkeitsmindernde Probleme rechtzeitig vor 

Saisonbeginn abstellen 

Anpassung des Besamungsregimes und des 

Managements 

Regelmäßige und systematische Untersuchungen 

während der zur Belegung genutzten Rosse 

Vielen Dank! 

…Fragen? 

9

Zyklusmanipulation bei der Stute – Christine Aurich 

Manipulation des Zyklus bei der Stute 

‐ Aktueller Stand ‐ 

Christine Aurich 

Graf Lehndorff‐Institut für Pferdewissenschaften und 

Besamungs‐ und Embryotransferstation 


Zyklusmanipulation bei der Stute 

• Rosseinduktion 

• Ovulationsinduktion 

• Rosseverschiebung 

• Ovulationsinduktion im Frühjahr 

Indikationen für eine 


• Terminierung des Rosseeintrittes 

• Terminierung des optimalen Besamungszeitpunktes 

–begrenzte Verfügbarkeit des Hengstes 

–Probleme mit dem Samentransport 

–Einsatz von Tiefgefriersamen 

– Turniereinsatz 

• Zyklussynchronisation 

• Prophylaxe und Therapie pathologischer Ovarbefunde 

Anforderungen an die 


• Vorhersagbarkeit des 

Wirkungseintritts 

• Wiederholbarkeit der 

Wirkung 

•Keine negative Beeinflussung 

der Fruchtbarkeit 

•Keine Nebenwirkungen 

Wiederholbarkeit der Ansprechbarkeit der 

Ovulation im nicht manipulierten Zyklus der Stute 

• In aufeinanderfolgenden Rossen 

ovulieren Stuten mit einem 

vergleichbaren Durchmesser des 

präovulatorischen Follikels 

• Auch der Verlauf des 

endometrialen Ödems 

(„Radspeichenstruktur“) verhält 

sich in aufeinanderfolgenden 

Rossen sehr ähnlich Cuervo‐Arango & Newcombe 2008) 

Durchmesser des präovulatorischen 

Follikels (mm) 

60 

40 

20 

0 

keine Behandlung 

1. Rosse 

2. Rosse 


Follikels bei Stuten (n=20) in 

2 aufeinanderfolgenden Rossen 

Nach Aurich 2010 modifiziert 

1


Rosseinduktion 

= Vorzeitiger Abbruch der Lutealphase 

Indikationen: 

• Vorverlegung der Rosse bei Stuten zur 

Besamung, da Hengst/Samen sonst nicht 

verfügbar 

• Vorverlegung der 2. Rosse post partum 

• Beseitigung eines persistierenden Gelbkörpers 

• Abbruch einer Frühträchtigkeit 

Rosseinduktion bei der Stute 

• Luteolytische Substanzen: 

– Prostaglandin F 2 ,z.B. Dinoprost, 5‐10 mg/Tier 

–PGF 2 ‐Analoga (= biochemisch modifiziert) 

z.B. Cloprostenol, 100‐250µg/Tier 

• einmalige Applikation 

• Voraussetzung: Vorhandensein eines endokrin 

aktiven, auf PGF 2 ansprechbaren Gelbkörpers 

(= Blütegelbkörper ‐> zwischen Tag 5 und 14 des 

Zyklus) 

Genestran ad us. vet. 

Synthetische Prostaglandin‐Injektionslösung für Rinder, 

Pferde und Schweine 


Eigenschaften / Wirkungen 

• Genestran enthält als Wirkstoff (+)‐Cloprostenol, den 

biologisch aktiven Teil des synthetischen Prostaglandins 

Cloprostenol, welches ähnlich wie das natürliche endogene 

PGF 2α wirkt. Da in Genestran nur das biologisch aktive (+)‐ 

Cloprostenol vorhanden ist, genügen bereits geringe Dosen, 

um luteolytische Effekte und/oder stimulierende 

Wirkungen auf das Myometrium zu erzielen. Die Belastung 

durch Fremdsubstanzen wird gering gehalten und die 

notwendige Wartezeit auf ein Minimum reduziert. 

Quelle: Tierarzneimittel Kompendium der Schweiz 


‐ Zeitpunkt der PGF 2 ‐Injektion 

Rosse 

1 2 

Lutealphase 

Rosse 

1 

2 


•Dauer bis Rosseeintritt und Ovulation abhängig von 

Follikelwachstum auf den Ovarien zum Zeitpunkt 

der Prostaglandin‐Applikation 

‣ Früh in der Lutealphase ‐> relativ kleiner, 

wachsender Follikel ‐> später Eintritt der Ovulation 

‣ Später in der Lutealphase ‐> großer Follikel 

• im Wachstum: schneller Eintritt der Ovulation 

• oder Follikelatresie und Neuanbildung eines 

Follikels, daher später Eintritt der Ovulation 

2


Einfluss von Cloprostenol‐Dosis und Follikelgröße 

auf das Intervall bis zur Ovulation 

(Newcombe et al. 2008) 

Durchmesser des dominanten Follikels bei Cloprostenol‐Injektion: 

28‐31mm 32‐35mm >36mm 





28‐31mm 32‐35mm >36mm 

Intervall bis zur Ovulation (Tage) 






28‐31mm 32‐35mm >36mm 

Einfluss der Cloprostenol‐Dosis auf Intervall bis zu 

Ovulation sowie die Ovulationsrate des 

dominanten Follikels (Newcombe et al. 2008) 

Tage bis zur Ovulation 

Ovulationsrate 

5 

100 

Tage bis zur Ovulation 

4 

3 

2 

1 

80 

60 

40 

20 

Ovulationsrate (%) 

0 

0 

8,75 

12,5 

25 

75 

125 

250 

625 


Dosis von Cloprostenol (µg) 

Zeitlicher Eintritt von Rossebeginn und Ovulation nach Behandlung 

mit PGF 2α in niedrigen Dosierungen 

(= 10 bzw. 2,5% der empfohlenen Dosierung) 

(nach Handler et al. 2004, modifiziert) 

Intervall von 

PGF-Behandlung bis... 

Ovulation 

Rossebeginn 

0 5 10 15 20 

Tage 

0,8mg PGF/100kg 

0,2mg PGF/100kg 

Kontrolle 

Follikelgröße bei Ovulation nach PGF 2α 

(Cuervo‐Arango & Newcombe 2008) 


Follikels (mm) 

60 

40 

20 

0 

Kontrolle 

Cloprostenol 

Durchmesser des präovulatorischen Follikels bei Stuten 

mit Spontanovulation bzw. nach Applikation von 

Cloprostenol (125 bis 250 µg) zur Rosseinduktion 

(n=13) 

*signifikante Unterschiede in der Follikelgröße 

* 

3




• Schon geringe Dosierungen 

von PGF 2α (1mg/Tier) und 

Cloprostenol (8,75 µg/Tier) 

wirken luteolytisch 

• PGF 2α und seine Analoga 

wirken zusätzlich luteotroph 

und erhöhen die endogene 

LH‐ und FSH‐Sekretion 

Effekt des PGF‐Analogons Luprostiol auf 

die LH‐Sekretion bei 4 anovulatorischen 

Stuten (Jöchle et al. 1987) 

‣ Die Cloprostenol‐Dosis beeinflusst das Intervall von 

der Applikation zur Ovulation 

‣ Insbesondere bei großen Follikeln und hoher 

Dosierung kann die Ovulation sehr schnell eintreten 

(‐> Untersuchungsintervall anpassen!) 

‣ Die PGF 2α ‐Behandlung reduziert die Größe des 

dominanten Follikels bei der Ovulation im Vergleich 

zu unbehandelten Kontrollzyklen 

‣ Aber: In 20 bis 35% der Fälle kommt es zur 

Regression des dominanten Follikels und Neubildung 

eines Follikels, der schließlich ovuliert ‐> 

Verzögerung der Ovulation 

Ovulationsinduktion bei der Stute 


Ovulationsinduktion 

= Vorzeitige Auslösung der Ovulation 

Indikationen: 

• Terminierung der Ovulation im Hinblick auf die 

Belegung der Stute (Ovulation optimal innerhalb von 

24h nach KB mit Frisch‐ oder Kühlsamen) 

• Terminierte Besamung (z.B. 30 und 42h nach hCG) bei 

Verwendung von TG‐Samen 

• Stimulation der Ovulation bei Stuten mit reduzierter 

endogener LH‐Sekretion (?) 


Induktion der Ovulation durch: 

1. Stimulation eines endogenen LH‐Peaks vor dem 

physiologischen durch GnRH‐Analoga 

2. Applikation von (rekombinantem) LH bzw. LH– 

Analoga (hCG) 

‣ Ovulation tritt in beiden Fällen nach 24 bis 48 

Stunden ein (Maximum = 36h post injektionem) 

‣ Die Entscheidung zur Ovulationsinduktion sollte 

möglichst frühzeitig getroffen werden, um den 

optimalen Zeitpunkt wählen zu können 

4



Voraussetzungen: 

1. Stute in Rosse 

(DD: Vorhandensein eines 

Zwischenrossefollikels) 

2. Follikel von 35mm 

3. Radspeichenstruktur +++ 

‣ Ovulationsinduktion, sobald 

diese Kriterien erfüllt sind 


GnRH und –Analoga 

‣ wiederholte Injektion (z.B. bei Buserelin in 12h‐Intervallen) 

‣ Langzeitformulierungen (z.B. Ovuplant) 

Humanes Choriongonadotropin 

‣ Einmalige Applikation von 1500 (bis 3000 IE) ist zur 

Ovulationsinduktion ausreichend 

ca. 90% der Stute ovulieren innerhalb von 48h nach Injektion, 

das Maximum der Ovulationen 36h nach Injektion. 

Auftreten von Ovulationen nach Applikation 

von hCG (1500 IE) bei Stuten im Östrus 

% der behandelten Stuten 

40 

30 

20 

10 

0 

6 12 18 24 30 36 42 48 54 >54 

Ovulation (Stunden nach hCG) 

Ovulationsinduktion mit hCG (2500IE) vs. 

Deslorelin (1,5mg)(McCue et al. 2007) 

Gruppe N Follikel 

(mm) bei 

Applikation 

Intervall bis 

zur 

Ovulation 

% 

Ovulationen 

innerh. 48h 

Kontrolle 19 38,9 ±2,2 3,1 ±1,6 a 36,8% a 

hCG 128 40,3 ±2,9 2,0 ±0,7 b 88,3% b 

Deslorelin 101 40,4 ±2,8 1,9 ±0,7 b 90,1% b 

ab: p


Zusammenfassung Ovulationsinduktion 

• Sichere Ovulationsinduktion mit hCG und Deslorelin 

• Gute Wiederholbarkeit der Ovulationsinduktion 

• Aber: 

• hCG führt bei häufiger Applikation zur Bildung von 

Antikörpern (selten) 

• Deslorelin‐Implantat führt bei etwa 25% der Stuten zu 

verlängerten interovulatorischen Intervallen 

1. Ovulationsinduktion durch 

• hCG (1500 IE; n=47) 

• Ovuplant (Entfernung 48h nach 

Applikation; n=48) 

• Ovuplant (keine Entfernung; n=27) 

2. Rosseinduktion 5 bis 9 Tage 

nach Ovulation 

3. Intervall bis zur nächsten 

Ovulation als Zielgröße 

Intervall PGF bis Ovulation (Tage) 

30 

20 

10 

0 

hCG 

Ovuplant Ovuplant 

entfernt 

Entwicklung von rekombinantem LH 

für den Einsatz beim Pferd 

(Jablonka‐Shariff et al. 2007) 

Synthese von rekombinantem 

equinem LH in einer Hamster‐ 

Ovarzelllinie 

Einsatz von rekombinantem LH 

zur Ovulationsinduktion bei der Stute 

(Yoon et al. 2007) 

Ovulationsrate (%) 

100 

80 

60 

40 

20 

0 

Kontrolle hCG 0,3 0,6 0,75 0,9 

mg rekombinantes LH 

Ovulationsrate bei unbehandelten Kontrollstuten sowie mit hCG bzw. 

verschiedenen Dosierungen von reLH behandelten Stuten 

Behandlungsschemata bei Belegung mit 

Frisch‐ oder gekühlter Transportsamen 

Behandlungsschemata bei Belegung mit 

Tiefgefriersamen 

ROSSE 

FK FK+hCG FK+KB FK 

Tag 3 Tag 4 Tag 5 Tag 6 

ROSSE 

FK+hCG FK+1.KB FK+2.KB 

FK 

42h 

30h 

Tag 3 Tag 4 Tag 5 Tag 6 

Ovulation 

36h 

Ovulation 

FK = Follikelkontrolle 

hCG = Injektion von hCG (1500 IE) 

KB = Besamung, bei Ausbleiben der Ovulation Nachbesamung nach 48h 

FK = Follikelkontrolle 

hCG = Injektion von hCG (1500 IE) 

1.KB = 1. Besamung mit TG‐Samen (30 Stunden nach hCG‐Injektion) 

2.KB = 2. Besamung mit TG‐Samen (42 Stunden nach hCG‐Injektion) 

6


Einfluss einer Zyklusmanipulation auf Trächtigkeitsraten 

(per Zyklus) und Doppelovulationsraten 

(nach Katila 2003, modifiziert) 

Doppelovulationen nach Rosseinduktion 

mit Cloprostenol 


Behandlung Trächtigkeitsrate* Doppelovulationen 

PGF 48,7 % 16,2 % 

hCG 47,9 % 10,7 % 

PGF+hCG 48,7 % 17,2 % 

Keine 43,6 % 9,9 % 

*Besamung mit gekühltem Transportsamen 

Auftreten von hämorrhagischen Follikeln nach 

Rosseinduktion mit Cloprostenol 


Auftreten von hämorrhagischen Follikeln nach 

Rosseinduktion mit Cloprostenol 


„Nebenwirkungen“ bei Rosse‐ und 

Ovulationsinduktion 

• Dosierung: 2mg/kg 2mal täglich 

• Eventuell Probleme bei Stuten, die aufgrund 

verschiedener Indikationen mit NSAIDs behandelt 

werden??? 

• Behandlung mit Dexamethason (50mg bei Besamung) 

oder NSAIDs nach Dosierungsanleitung führte in 

eigenen Studien nicht zu einem Ausbleiben der 

Ovulation 

• Doppelovulationen 

‣ Zwillingsgraviditätsrate 

‣ Trächtigkeitsuntersuchung vor 

Tag 16 post Ovulationem 

• Anovulatorische 

hämorrhagische Follikel 

‣ Konzeptionschance 

7


Rosseverzögerung bei der Stute 

= Verschiebung der Rosse durch Gestagenapplikation 


Indikationen: 

• Verschiebung der Rosse in einen Zeitraum, wo 

Samen/Hengst verfügbar 

• Verschiebung der Fohlenrosse zur besseren 

Uterusinvolution 

• Ständige Unterdrückung der Rosse bei Sportpferden 

• Induktion von fertilen Ovulationen im Frühjahr 

Controlled Internal Drug Release = CIDR 


relative Bindung (%) 

Rind 

1000 

Pferd 

Schwein 

500 

0 

Progest. Norgest. Chlormad. Altrenogest 

Relative Bindung verschiedener Gestagene an den uterinen 

Progesteronrezeptor bei Rind, Pferd und Schwein (nach Frey 1999, mod.) 

• Nur Gestagene, die an 

den equinen 

Progesteronrezeptor 

binden, sind wirksam 

• Applikation >8 Tage 

• Vaginal“spiralen“ 

• Altrenogest (0,044mg/kg 

einmal täglich oral) 

Progesterone Releasing Intravaginal Device 

= PRID 


• Eintritt der Rosse: 

nach Vaginalspiralen: ca. 2‐3 Tage 

nach Altrenogest: ca. 3‐4 Tage 

• Probleme 

1. Ovulationen während der Gestagenapplikation 

‣ Prostaglandin bei Behandlungsende 

2. Intervall bis zum Eintritt der Rosse/Ovulation 

abhängig von Follikelgröße 

‣ Ovarkontrolle bei Behandlungsende 

8


Ovulationsinduktion im Frühjahr 

Indikationen: 

• Frühzeitige Belegung von 

Stuten im Frühjahr 

• Begrenzte Verfügbarkeit von 

Hengsten in der Saison 

• Starke Frequentierung 

bestimmter Hengste in der 

Hochsaison und Stute selbst 

nicht tragend 

Behandlungsschema 

1. CIDR‐B für 10 bis 12 Tage 

2. Wenn Follikel > 30mm 

‐>Behandlungsende 

3. Ovulationsinduktion mit hCG oder Ovuplant bei/ kurz nach Behandlungsende 

Behandlung Rosse Ovulation Trächtigkeit 

Ovuplant 

(n=146) 95% 96% 54% 

hCG 

(n=159) 86% 89% 61% 

Keine 

(n=101) 81% 55% 44% 

Newcombe et al. (2002) 

Einfluss der Follikelgröße bei Behandlungsbeginn 

auf die Erfolgsrate der Behandlung anovulatorischer Stuten 

Follikelgröße bei 

Behandlungsbeg 

inn 

Anzahl der 

Stuten 

Stuten, die 

belegt wurden 

Stuten, die 

tragend wurden 

30mm 36 59% 52% 

Ovulationsinduktion im Frühjahr 

mit Gestagenen 

• Auch bei Stuten mit kleinen 

Follikeln kann die Behandlung 

zur Induktion einer Ovulation 

führen 

• Stuten, die mit einer deutlichen 

Rosse (Radspeichenstruktur) 

reagieren, haben eine gute 

Konzeptionschance 

• Nach Behandlungsende bleiben 

die Stuten meist im Zyklus 

Newcombe et al. (2002) 

9

Herstellung von Tiefgefriersamen – Mareike von Lewinski 

Herstellung und Nutzung von 

Tiefgefriersamen in der Pferdezucht 

Dr. Mareike von Lewinski 

Graf‐Lehndorff‐Institut Neustadt (Dosse) 

Begriffsbestimmungen 

1. Frischsperma 

Nativsperma: unverdünnt, KB unmittelbar 

nach Gewinnung 

flüssigkonserviertes Sperma („Frischsperma“) 

‐ KB ≤ 12h nach Samengewinnung, RT/+5°C. 

‐ KB nach Versand und 24‐36h nach 

Samengewinnung,+5°C 

2. Tiefgefriersperma (‐196° C) 

Tierärztetagung 16.02.2013 


Anzahl Stuten 

50000 

40000 

30000 

20000 

10000 

Bedeutung TG‐Samen 

0 

Natursprung 

KB TG 

1985 

1990 

1995 

2000 

2004 

2005 

Jahr 


KB FS 

ET 

2006 

2007 

2008 

2009 

2010 

2011 

Besamung und Natursprung in der deutschen Reitpferdezucht 

(FN‐Jahresberichte) 

belegte Stuten in % 

80 

70 

60 

50 

40 

30 

20 

10 

0 

Bedeutung TG‐Samen 

Natursprung KB. Frischsamen KB, TG-Samen 

Frankreich 


Deutschland 

Belegung von Stuten der Reitpferderassen durch Natursprung 

und Besamung in Deutschland und Frankreich 2004 

(FN‐Jahresberichte, Haras nationaux ‐ Chiffres d`elevage) 

Lippizaner 

5% 

TG‐Samen‐Herstellung 

Rassenverteilung 

AQUH 

29% 

Pony 

2% 

Isländer 

7% 

Araber 

12% 

Traber 

10% 


PRE 

1% 

Vollblut 

Warmblut 

34% 

Rassenverteilung TG‐Samenherstellung an der 

Besamungsstation der Vetmeduni Wien 2002‐2012 

Vorbereitung TG‐Samen 

‣ TG‐Eignung des Hengstes? 

‣ Andrologische Untersuchung 

‣ 30tägige Quarantäne und Untersuchung des Hengstes 

gemäß RL 92/65 EWG (CEM, EIA, EAV) 

‣ 30 Tage vor und während der Samengewinnung kein 

Natursprung 

‣ Versand 

‐ national 

‐ EU 

‐ Drittländer (z.T. weitere Voruntersuchungen) 


1


TG‐Eignung von Hengsten 


Alterseffekte 

VMot > 35% 

VMot < 35% 

25% 

VMot < 35% 

19% 

32% 

75% 

VMot > 35% 

81% 

68% 

Hengste bis 10 Jahre 

Hengste über 10 Jahre 

Qualität von TG‐Samenportionen (n=964), Hengste verschiedener 

Rassen, Besamungsstation Vetmeduni Wien 2002‐2012 


Qualität von TG‐Samenportionen (n=964), Hengste verschiedener 

Rassen, Besamungsstation Vetmeduni Wien 2002‐2012 


Lippizaner 

Warmblut 

AQUH 

Araber und Vollblut 

sonstige 

Traber 

Isländer 


Rasseeffekte 

0% 20% 40% 60% 80% 100% 

VMot < 35% VMot > 35% 


200 

180 

160 

140 

120 

100 

80 

60 

40 

20 

0 


Jahreszeit 

Verteilung TG‐Samenproduktion im Jahresverlauf, Besamungsstation 

Vetmeduni Wien 2002‐2012 



Jahreszeit 


Jahreszeit 

140 

120 

100 

80 

60 

40 

20 

0 

Vmot < 35% Vmot > 35% 

TG‐Samenqualität im Jahresverlauf 

Besamungsstation Vetmeduni Wien 2002‐2012 


TG‐Samenqualität in den Wintermonaten 

Besamungsstation Vetmeduni Wien 2002‐2012 


2


Samenentnahme 

Samenbeurteilung und ‐verdünnung 

Zentrifugation: Konzentration der Spermien 

Resuspension mit Einfrierverdünner 

Endverdünnung: Glycerin ca. 2,5% 

Samenentnahme 

• Samenentnahme 3 mal pro Woche 

• Abschöpfung überalterter Samenzellen nach längerer 

Deckruhe: optimale Samenqualität nach 

7 bis 14 Tagen regelmäßiger Samenentnahme 

Konfektionierung 

(0,5ml Pailletten) 

Kühlung/Gefrierung 

Lagerung (‐196 °C) 



Samenbeurteilung 

Samenbeurteilung für die 

Tiefgefriersamenkonservierung 

‣ Ejakulate mit einer 

Samendichte > 200 Mio. Sz/ml 

‣ Vorwärtsmotilität > 50% 

‣ Anteil formnormaler 

Samenzellen > 70% 

Samenverdünner 

1. Zentrifugations‐ bzw. Vorverdünner: 

• Verdünnungsverhältnis: 1 + 1; (50Mill. SZ/ml) 

• Seminalplasmaretention (ca. 5%) 

2. Tiefgefrierverdünner: 

• Merck‐Laktose‐Verdünner 

modifizierter Frischsamenverdünner 

• Osmolarität 

• Kryoprotektiva 

• Glycerol (optimal 2,5% in der Endverdünnung) 



Resuspension / Kryoprotektiva 

• Verwendung von Tiefgefriersamenverdünner mit 

„Gefrierschutzmittel“ 

• penetrierende (Glycerol, Zuckeralkohole,DMSO) und 

nicht penetrierende (Zucker, Aminosäuren, versch. Proteine) 

Kryoprotektiva 

• Glycerolzusatz nicht mehr als 2,5% in der 

Endverdünnung 

IZR 

EZR 

3.H 2 O 

2.Osm ↑ EZR 

1.Glycerol 


Glycerol 

+ H 2 O 

IZR 

EZR 

Konfektionierung 

Konfektionierung in 0.5 ml Pailletten 

• gute Samenqualität 

• homogenes Einfrieren (kleines Volumen, große 

Oberfläche) 

• geringes Lagervolumen 

• begrenzte Handlichkeit 

(insbesondere, wenn viele 

mehrere Pailletten pro 

KB‐Portion) 


3


Kennzeichnung 

Tierzuchtgesetz: unmittelbar, unverwechselbar, dauerhaft 

Richtlinie 92/65 EWG 

‣ Identität des Hengstes (Name, Lebensnummer) 

‣ herstellende Station (Name, EU‐Nummer) 

‣ Datum der Samenherstellung (Chargendatum) 

Abkühlung des Samens 

Kühlung / Gefrierung 

– Temperaturbereiche: 

1. 37°C ‐ ~20°C Pferdespermien relativ unempfindlich 

2. 18°C ‐ ~8°C temperatursensitiver Bereich 

reversible Verlangsamung aller Stoffwechselfunktionen 

– Kühlraten: 

• 0,05 bis 0,1°C/min (ideal) 

• 0,2°C/min (Kühlschrank direkt) 

• 0,07°C/min (Wasserbad mit 20 °C im Kühlschrank) 

• 0,04°C/min (Equitainer®) 



Computergesteuerter 

Einfrierprozess 

Kühlung / Gefrierung 

• Schritt 1: 20°C bis 5°C, 50 min 

(temperatursensitiver Bereich) 

• Schritt 2: 5°C bis ‐25°C, 3 min 

• Schritt 3: ‐25°C bis ‐140°C, 4,6 min 

Gesamtzeit 57,6 min 



Lagerung 

• obligatorische 30tägige Lagerung vor Verwendung 

oder Versand 

• in dieser Zeit Nachuntersuchung am Hengst 

frühestens 14 Tage und spätestens 90 Tage nach 

Produktionsdatum (RL 92/65 EWG Anhang D) 


Kalkulation KB Portion 

‣ Mind. 300 Mio. gesamtbewegliche Samenzellen pro Portion 

z.B. Quaterback 16.02.2013: 30 Pailletten TG‐Samen 

• Auftaukontrolle 

Dichte 400 Mio. SZ/ml 

Motilität: 55 % (V), 25%(O), 30% (U) = 80% motile SZ 

Wieviele Pailletten/KB? Wieviele Portionen insgesamt? 

• 400:2= 200 Mio Sz/Paillette x 0,8 (80% Mot) 

• 160 Mio. gesamtbewegliche SZ /Paillette 

• 300 : 160= 1,86 = 2 Pailletten /KB 

• 15 Portionen insgesamt 


4


Versand 

nach Ablauf der 30tägigen Lagerfrist und Eingang der 

Testergebnisse der Nachuntersuchung mit Negativbefund 

Versand der gewünschten Portionen 

begleitet von 

‣ Attest (zzgl. Importerlaubnis und 

Ausfuhrbescheinigung) 

‣ Samenschein 

‣ Samenverwendungsnachweis 


Besamung 

Auftauen von TG‐Samen 

Auftauen der Besamungsportion unmittelbar vor 

der Verwendung im Wasserbad 

‣ Normalpailletten (o.5 ml) 37°C 15‐30 sec. 

Sameneinführung 

‣ Manuell oder instrumentell 

‣ Gebärmutterkörper 

‣ (tief intracornual) 

‣ (auf Eileiterpapille) 



5


TG Samenproduktion als 

Dienstleistung 

TG Samenproduktion als 

Dienstleistung in Neustadt (Dosse) 

• Das Brandenburgische Haupt‐ und Landgestüt und das 

Graf Lehndorff Institut Neustadt (Dosse) bieten 

gemeinsam die Herstellung von Tiefgefriersamen bei 

Hengsten als Dienstleistung an 

• Zu diesem Zweck können Hengste aller Rassen 

vorübergehend in die EU‐Besamungsstation Neustadt 

(Dosse) aufgenommen werden 

• Routinemäßig kann der hergestellte Tiefgefriersamen in 

alle EU‐Länder versandt werden. 

• Export in Drittländer entsprechend deren spezifischen 

Anforderungen 



Vielen Dank für Ihre 

Aufmerksamkeit 


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