Öffnen - eDiss - Georg-August-Universität Göttingen

Methoden - Kapitel 3.4.
Die Cycling-Parameter entsprachen (Tab. 3.3):
Tabelle 3.3: Cycling-Parameter für die Analyse autosomaler STRs.
Schritt Temperatur (°C) Dauer (min) Zyklen
Initial 95 5
Denaturation
Annealing / Elongation
94
59
Delay 60 45
Soak 10 10
1
2,5 40 - 45
Alle PCRs wurden in einem DNA Thermal Cycler Typ Mastercycler® gradient bzw.
personal der Firma Eppendorf durchgeführt.
3.4.5. Amplifikation gonosomaler Systeme (Sexplex)
Für eine absichernde Geschlechtsbestimmung für weibliche Individuen über den
Marker Amelogenin hinaus (vgl. Kap. 1.3.) wurde eine Amplifikation von gonosomalen
STR-Systemen in einer Multiplex (Sexplex) durchgeführt. Diese Multiplex
wurde von Schmidt et al. (2003) entwickelt und im Laufe der Zeit nur durch einen
leicht veränderten Primer für Amelogenin (Seidenberg et al. 2012, siehe Kap. 3.4.4.)
modifiziert. Neben diesem werden je zwei Y-chromosomale (DYS391 und DYS392)
und X-chromosomale (DXS6789 und DXS9898) STR-Systeme amplifiziert (Abb.
3.7).
Abbildung 3.7: Allelleiter der Multiplex-PCR gonosomaler STR-Systeme nach Schmidt et al.
2003. Abweichend von dieser Darstellung wurde in dieser Arbeit ein mit 6-FAM markierter Amelogeninprimer
verwendet. x-Achse = Länge der Produkte in Basenpaaren.
51