Effekt selektiver und nicht selektiver nichtsteroidaler Antiphlogistika ...

Material und Methoden
Tabelle 3: Übersicht über die verwendeten Primärantikörper im Western Blot
Primärantikörper Verdünnung Spezifität Herkunft
COX-1 1:200 Ziegen IgG,
polyklonal
COX-2 1:200 Ziegen IgG,
polyklonal
β-Aktin 1:5000 Maus IgG,
monoklonal
Santa Cruz Biotechnology,
Inc., Heidelberg
Santa Cruz Biotechnology,
Inc., Heidelberg
Santa Cruz Biotechnology,
Inc., Heidelberg
Anschließend wurde die Nitrocellulosemembran wieder zusammengesetzt. Für die
Chemilumineszenz wurde das Super Signal ® West Dura Trial Kit (Thermo Fisher
Scientific GmbH, Dreireich) auf die Nitrocellulosemembran aufgegeben und für drei
Minuten inkubiert Daran schloss sich die Immunodetektion und die Auswertung der
Fotos mit der Fusion SL Chemilumineszenz-Detektionseinheit mit der Fusion
Software (Vilber Lourmat, Frankreich) an.
3.5 Lichtmikroskopische Untersuchung
Die Tunica muscularis und die Tunica serosa wurden von einem Untersucher (S.F.)
ausgewertet. Die Proben lagen verblindet vor. Die von der Lunafärbung (eosinophile
Granulozyten) und der Calprotectin-Immunhistochemie (neutrophile Granulozyten)
lichtmikroskopisch mit Hilfe des Axioskops (Carl Zeiss Jena GmbH, Jena) und der
Mikroskop Kamera DP-70 inklusive Software DP-Soft (Olympus Europa GmbH,
Hamburg) gewonnen Bilder wurden histomorphometrisch mit Hilfe des Programms
Image Pro Express 6.3 (Media Cybernetics, Bethesda, Maryland, USA) ausgewertet.
Die Schnitte der COX-1 und -2 Immunhistochemie wurden deskriptiv untersucht.
3.5.1 Auswertung Lunafärbung und Calprotectin-Immunhistochemie
3.5.1.1 Tunica muscularis
Die Auswertung der Tunica muscularis gliederte sich in zwei Teile:
1. Bestimmung der absoluten Anzahl sowohl an neutrophilen Granulozyten als
auch an eosinophilen Granulozyten pro Quadratmillimeter Gewebe
82