Effekt selektiver und nicht selektiver nichtsteroidaler Antiphlogistika ...

Diskussion
immunhistochemisch nicht untersucht. Die Darstellung der COX-1 und COX-2 ist von
Interesse gewesen, da zum Beispiel eine unterschiedlich starke Expression der
Enzyme in der Ring- und Längsmuskelschicht Hinweise auf einen unterschiedlichen
Einfluss der selektiven NSAIDs und nicht selektiven NSAIDs liefern könnte. Damit
könnten eventuell Rückschlüsse auf eine unterschiedliche Motilitätsbeeinflussung
des Darms, durch eine unterschiedliche Hemmung der Prostaglandinbiosynthese,
durch NSAIDs gezogen werden.
Die COX-1- und COX-2-Immunhistochemie wurde am equinen Colon bereits
erfolgreich angewendet (MATYJASZEK et al. 2009; MORTON et al. 2009;
GROSCHE et al. 2011) und ist auch am Ileum des Schweins beschrieben
(BLIKSLAGER et al. 2002). Die genannten Arbeiten beschreiben alle ausschließlich
die Expression der COX-1 und COX-2 in der Tunica mucosa und Tela submucosa.
Für die Tunica muscularis und Tunica serosa liegen am Pferd keine Studien vor. In
weiteren Studien am Dünn- und Dickdarm des Pferdes wurde die COX-1 und COX-2
in Mucosaproben auf Proteinebene mit Hilfe des Western Blots (TOMLINSON et al.
2004; LITTLE et al. 2007b; COOK et al. 2009a; MATYJASZEK et al. 2009;
MARSHALL et al. 2011) und auf mRNA Ebene mit Hilfe der PCR (HILTON et al.
2011) nachgewiesen. Mit Hilfe des Western Blots und der PCR kann zwar ein
Nachweis der COX-1 und COX-2 im Gewebe erfolgen, diese Methoden geben aber
keinen Hinweis darauf, welche Zellen die COX exprimieren. Da dies für die aktuelle
Studie aber von Interesse war, wurde die Immunhistochemie zur Darstellung der
COX-1- und COX-2-Verteilung im Gewebe gewählt.
Um falsch positive Ergebnisse auszuschließen, wurden für beide Antikörper Negativund
Isotypenkontrollen durchgeführt. Sie zeigten für beide Antikörper keine
Reaktionen.
Zur Bestätigung der COX-1- und COX-2-Expression wurde die COX-1 und COX-2 in
der Tunica muscularis auf mRNA Ebene mit Hilfe der RT-PCR erfolgreich
nachgewiesen. Zusätzlich gelang für die COX-1 auch auf Proteinebene im Western
Blot ein erfolgreicher Nachweis in der Tunica muscularis. Dies gelang für die COX-2
trotz mehrmaliger Versuche nicht. Eine β-Aktin spezifische Bande bei 43 kDa zeigte
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