TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

TEER (*cm 2 )
ERGEBNISSE
Zeitraum von sieben Tagen die TEER-Werte konfluenter Monolayer von hCMEC/D3-
Zellen auf 6Well-Inserts bestimmt.
Für diese Untersuchung, die am Tag 1 nach Erreichen der Konfluenz begann,
wurden zwei verschiedenen Membraneinlagen der genannten Firmen Corning Costar
Corporation und Greiner Bio-One GmbH sowie zwei Seren unterschiedlicher
Herkunft verwendet. Laut einer Studie von POLLER et al. (2008) beeinflusst
humanes Serum im Medium die Dichtigkeit der Zellschicht der humanen Zellen.
Verlauf des Widerstands in hCMEC/D3-Zellen
70
60
50
40
30
20
10
72 96 120 144 168 192 216
Stunden
Corning humanes Serum Greiner humanes Serum
Corning bovines Serum Greiner bovines Serum
Abbildung 5.13: Bestimmung des Verlaufs der TEER-Werte für Membraneinlagen der Firmen
Corning und Greiner sowie zwei Seren unterschiedlicher Herkunft in hCMEC/D3-Zellen auf
6Well-Inserts. Die Messung begann am 1. Tag der Konfluenz. Die TEER-Werte verhielten sich
über die ersten 5 Tage (120 h) relativ gleich, wobei die Zellen auf den Corning-Inserts generell
höhere TEER-Werte aufwiesen. Ab Tag 5 zeigten die Zellen auf Corning-Membraneinlagen, die
mit bovinem Serum kultiviert wurden, einen leichten Anstieg bis Tag 8 (ca. 192 h).
Unterschiede zwischen humanem und bovinem Serum konnten nicht gezeigt werden. Die
Zellen wurden am Tag 7 nach Erreichen der Konfluenz für einen Transport-Assay mit Digoxin
eingesetzt. Der TEER wurde vor Beginn der Inkubation und nach Entnahme der letzten Proben
bestimmt. Alle untersuchten Gruppen zeigten am Versuchsende einen Anstieg des TEERs (=
letzter Probenzeitpunkt). Ein Transport von Digoxin war nicht nachweisbar. Die Werte sind als
Mittelwerte angezeigt.
Die Messung ergab unabhängig von Material oder Serum gleich niedrige
TEER-Werte, die ihr Maximum am Tag 8 nach der Aussaat auf den Membran-Inserts
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